快速校准
快速校准后的数据处理
移液器实际容量计算：将所测得的质量值带入以下公式，求得移液器在 当前温度下的实际容量值；
V m K t
式中：V ——在当前温度下的移液器的实际容量，单位为μL; m ——被检移液器所排出的超纯水质量， 单位为mg; K(t) ——测定值m和测定时超纯水温度的比例系数； 移液器的容量相对误差计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式， 求得移液器在当前温度下的容量相对误差；
此外，我们在加样时应选择与我们所需微升数相差 较近量程的移液器。
使用方法
二、加样方式
正向吸液：吸液时，将移液器按钮按到第一档吸液，释 放按钮。放液时，先按到第一档，打出大部分液体，再 按下第二档， 将余液排出。
适用于与水性质相同的液体和加样量比较大的液体
使用方法
二、加样方式
反向吸液：吸液时将按钮直接按到第二档再释放，这 样会多吸入一些液体，打出液体时只要按到第一档即 可。此时，吸头内部还有多余液体，可以补偿吸头内 部的表面吸附。
入液深度 1mm 2-3mm 3-6mm 6-10mm
注意事项
5 吸头入液时间 在将样品吸入吸头时，在样品中的入液时 间是良好移液技法中的关键因素。在平稳松开 定位销按钮之后，必须进行短暂暂停，然后再 从样品中取出，以确保将全量样品吸入吸头中。 如果量较大以及对于粘性物质而言，必须在等 候较长时间后再取出，因为移液器中的气室需 要一秒钟的时间才能实现均衡。 6 吸液速率 移液器的吸液速率不尽相同，因此会对结 果的精度与准确度产生影响。用户应使用以一 种平稳并且受控的方式释放移液器定位销按钮。 释放过快的定位销可能出现的最常见后果是： 气雾会进入移液器套柄中，从而损坏移液器的 内部部件。
表1：移液器容量允许误差和测量重复性
日常保养
如长时间不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处 于松弛状态以保护弹簧；我们各个科室在每天下班前都应该将移液枪 调到最大量程。 定期清洁移液器外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏 水擦拭，自然晾干；这里我们各个科室尤其是PCR室更需注意，在加 完前一个标本，感觉有液体溅到套筒上时，必须停止加样，用酒精将 套筒擦拭干净。 使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几 秒中，看看液面是否下降。如果漏液，则检查吸液嘴是否匹配和弹簧 活塞是否正常； 当移液器吸嘴内有液体时，严禁将移液器水平或倒置放置，以防液 体流入活塞室腐蚀移液器活塞； 使用正确的方法安装吸头，切记用力不能过猛，更不能采取跺吸头 的方法来进行安装；
使用方法
五、吸液、移液和放液
先将四指并拢握住移液器上部，用拇指 按住塞杆顶端的按钮，向下按到第一档， 再将吸头垂直浸入液面2~3mm，缓慢平稳 松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟。 缓慢抬起移液器取出吸液嘴，确保吸液 嘴外壁无残留液体。可用定性滤纸抹去吸 嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液 嘴口； 将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40° 倾斜，平稳地把按钮压到第一停点，停12s（粘性大的液体要加长停留时间）后， 继续按压到第二停点，排出残余液体。松 开按钮，然后将吸液嘴沿着内壁向上移开；
体 积何选择移液器?
标称容量：在给定的有效量程范围内最大的容量。
例如：有一个可调式移液器，其有效量程是10μl-100μl，但实 际上我们都知道，其最小值可调节到7μl左右，最大值可调节 到110μl左右，那么这个移液器的标称容量是多少呢？
范围7μl-110μl，并不是厂家所宣称的量程， 也不是该加样枪的有效量程。
注意事项
4 吸头入液深度
正确的吸头入液深度对于微量移液器尤为重要。如果吸头入液过深，
则随着压力的加大，吸液量将会增多，保留在吸头表面的液体会影响结果。 如果吸头入液太浅，则会造成空气进入，从而产生气泡以及导致容量不准确。 正确的入液深度可使准确度提高达 5%。
移液器容量 2~20ul 20 ~ 200ul 100 ~ 1000ul 5000ul ~10ml
移液器的使用、校准和日常维护
报告人：余莹
基本知识 使用方法 注意事项 快速校准
相关文献
基本知识
移液器的工作原理： 活塞通过弹簧的伸缩运动 来实现吸液与放液。 在活塞推动下， 排出部分空气， 利用大气压吸取液体， 再由活塞推动空气排出液体。
吸 液 嘴
套 筒
量 程 显 示 窗
容 量 显 示 窗
吸 头 脱 卸 按 钮
快速校准
使用设备及物品：电子天平（测量范围200g；分度值 0.1mg）；烧杯（50ml）1个；烧杯（100ml）1个；定性滤 纸若干小块；超纯水80ml
打开电子天平，空载调零； 放入小烧杯待天平显示稳定后，按下归零键归零。给移液器上安装相 应的吸液嘴，对移液器的枪头进行预洗； 将移液器的容量调至被检点。被检点一般选择最小，中间和最大容量 值。也可以是某一指定的容量点； 使用移液器移取被检容量的超纯水至天平的小烧杯内； 待天平显示稳定后，马上读取并记录此时电子天平显示出的数值。记 录完毕将电子天平复零； 重复5次执行3-5条。记录完毕，将移液器的容量调至下一被检点继续。 被检点遵循从小到大的原则进行调整；
相关文献
移液器国际标准ISO 8655-2 移液器计量标准JJG 646-2006 梅特勒-托利多良好的移液技法 Eppendorf 移液器使用宝典
E V V 100% V
式中：V ——标称容量，单位为μL; V —— 5次测量的算数平均值，单位为μL.
快速校准
快速校准后的数据处理
移液器的容量重复性计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求 得移液器在当前温度下的容量重复性；
S
n1
V
100%
式中： σn-1 ——标准偏差； n ——测量次数； S ——重复性；
适用于粘稠液体和易挥发液体 无论是哪种吸液方式都要求做到快吸慢打
使用方法
三、设定容量值
粗调：通过调节旋钮将容量值迅速调整至 接近自己的预想值； 细调：当容量值接近设定值以后，应将加 样枪刻度显示窗平行放至自己的眼前， 通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想值， 从而避免视觉误差所造成的影响；
设定容量值时的注意事项：在调节量程 时，如果要从大体积调为小体积，则按照正 常的调节方法，旋转旋钮即可； 但如果要从小体积调为大体积时，则应先旋 转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设 定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
目前我们实验室基本都是采用正向吸液的方式。
注意事项
1 正确填充吸头 当某一吸头的建议（标称）范围为最大吸头容量（标称容量）的 10% 至 100% 时，可在 35% 至 100% 这一较小以及优化的范围内实现最高精确 度。在此范围内移液会减少对操作人员技法的要求，并可将结果准确度提高。 当达到标称容量的 50% 时可提供最佳结果。 2 吸液时保持垂直入液角 使入液角尽可能地接近垂直位置，否则垂直液柱较小，这样将会吸入过 多样品。 分液时，吸头应当与容器壁保持较小角度，从而确保良好的排液效果。 3分液技法 对于大多数应用而言，建议在分液时将吸头的末端贴靠容器壁。这可减 少或者消除分液后残留在吸头上的样品。沿侧壁向上滑动吸头末端将移液器 撤下，从而去除吸头孔处的任何残留液滴。
使用方法
四、装配吸液嘴
把套筒顶端插入吸液嘴，在轻轻用 力下压的同时，把手中的移液器按逆 时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记勿 用力过猛，更不能采取跺吸头的方法 来进行安装。 吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型 环，并可以看到连接部分形成清晰的 密封圈； 预洗吸液嘴：在安装了新的吸液嘴 或增大了容量值以后，应该把需要转 移的液体吸取、排放两到三次，确保 移液工作的精度和准度。