金银花中绿原酸的提取、分离纯化
绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸，异名咖啡鞣酸，是植物在有氧呼吸过程中经莽草酸途径代谢产生的苯丙素类化合物。

化学结构为：
绿原酸由结构可以看出它是含有羧基和邻二酚羟基的极性有机酸化合物，为酸性。

由于分子内含有邻二酚羟基，受热、见光易氧化，因此供试液要在阴凉、避光下保存备用，且高温和长时间加热不利于绿原酸的提取。

在碱性条件下，绿原酸易发生水解，植物体内存在的绿原酸往往是混合物而非单一组分。

绿原酸物理性质：
名称分子式分子量性状熔点溶解度
绿原酸C16H18O9 345.30 半水化合物为
针状晶（110℃
变为无水化合
物）208℃水中4%，在热水中溶解度更
大，易溶于乙醇、丙酮和甲醇
等极性溶剂，难溶于氯仿、苯、
乙醚等亲脂性有机溶剂
一、实验目的：
1、了解金银花中有关成分，掌握绿原酸的相关性质，设计提取方案
2、掌握pH梯度萃取法分离所需成分
3、掌握聚酰胺柱层析的方法
二、实验试剂、仪器
试剂：金银花，乙醇（70%、10%），盐酸（6mol/L），乙酸乙酯，NaOH（5%），乙酸，聚酰胺，硅胶
仪器：冷凝回流装置，抽滤装置，旋蒸仪，分液漏斗，层析柱
三、绿源酸的提取、分离和纯化
（1）提取：
称取金银花50g加入1000mL的圆底烧瓶中，加入500mL（10倍量）70%的
乙醇，75℃冷凝回流3h，倒出液体，再用400mL（8倍量）、400mL（8倍量）回流两次，每次2h,过滤，合并滤液，然后80℃下浓缩滤液或者是用旋蒸仪旋干滤液至无醇味。

（2）分离纯化：
①取金银花提取浓缩液，以浓度6mol/L的HCl溶液调pH值至3.0左右，以3倍量的乙酸乙酯分3次萃取，合并萃取液（乙酸乙酯层），以5%的NaOH溶液调萃取液pH至8.0左右，分取水层减压浓缩。

②取金银花浓缩液，用聚酰胺拌样，用聚酰胺（80-100目）装柱（用量大概为绿原酸粗品的5倍），装入柱径与柱长比为1：7的层析柱中，常压下用10%的乙醇作为洗脱剂洗脱，收集流分，点样与标准品对照（标准品用50%的甲醇溶解，0.2mg/mL），合并相同流分，旋干即为所要提取的绿原酸。

展开剂为乙酸乙酯：乙酸：水=2:1:1（硅胶色谱）。

(将相同流分合并后用乙酸乙酯重结晶能提高纯度)。