化1热带作物学报,2001,23(2):41～47[8]陈春玲,赖钟雄1龙眼体胚发生过程中特异蛋白的I EF 和S DS-P AGE 分析1福建农林大学学报,2002,31(1):135～136[9]王凤华,赖钟雄,郑金贵,吕柳新1龙眼体细胞胚胎发生过程中RNA 研究初报1福建农业大学学报,2001,30(4):561～562[10]陈春玲1龙眼体细胞胚胎成熟机理的研究1福建农林大学硕士学位论文,2001[11]Vasil,V 1and I 1K 1Vasil,1980:Is olati on and culture of cerealp r ot op lasts Part 21Embryogenesis and p lantlets f or mati on fr om p r ot o 2p lasts of Penniseiium Theor 1A ppl 1Genet 1,56:97-9936(3):175～180[12]赵洁,程井辰1石刁柏体细胞胚胎发生的细胞组织学研究1植物学报,1992,34(7):491～495[13]张新英,黄亚斌,尹光初,等1离体培养下大豆体细胞胚胎发生的组织学研究1植物学报,1992,34(3):214～218[14]郝建平,周小梅,李宝平,等1蛇床幼茎离体培养中体细胞胚胎形成的观察1武汉植物学研究,1994,12(3):247～250[15]郝建平,周小梅,李绍清1茴香组织培养中体细胞发生的组织细胞学研究1实验生物学报,1995,28(3):399～347[16]李惠芝,庞长民,杜勇军,等1福录考体细胞胚胎发生的观察1云南植物研究,1996,16(3):341～344[17]L i pavska H,Svobodova H,A lbrecht ova J,Kum styr ova L,Vag 2ner M,Vondrakova 1Z 1Carbohydrate status during s omatic e mbryo maturati on in Nor way s p ruce I n V itr o Celluar and Devel opmental B i 2ol ogy Plant 12000,36(4):260～267柑桔青霉菌侵染条件及致病性研究3陆宁海　徐瑞富　吴利民　田雪亮(河南科技学院植物保护系,新乡453003)　3基金项目:河南科技学院青年科学资助项目(编号030109) 作者简介:陆宁海(1976-),男,甘肃人,讲师,主要从事果树病理学的教学与科研工作。

收稿日期:2004-09-29摘　要　温度与保湿时间对柑桔青霉病菌(Pen icillium ita licum W eh mer )的侵染有很大的影响。

当温度为10℃时,病原菌潜育期达54h;20～25℃时潜育期仅为6～8h;而低于5℃时果实不发病。

保湿时间愈长,愈有利于病原菌的侵染,最少保湿时间为6h 。

病原菌侵染的最佳温度和保湿时间组合为20～25℃、24～48h 。

不同菌龄的柑桔青霉病菌对柑桔的致病力也有差异,培养8d 和12d 的菌株致病力较强,培养16d 的次之,培养5d 和20d 的致病力较差。

关键词　柑桔;青霉菌;侵染;致病性 柑桔青霉病是柑桔果实在贮藏运输期间发生严重的病害之一。

据统计,造成的损失一般为10%左右,有的高达30%以上,严重影响果实品质和商品价值。

谢永红等2003年报道了Fludi oxonil 对柑桔青霉病的抑制效果[1],罗永兰等2000年报道了柑桔青霉病菌的寿命与窖、库消毒剂的筛选[2]。

但是在病原菌生物学特性、发生流行规律、侵染条件、致病性和防治等方面缺乏系统研究,相关的报道也很少,难以有效指导防治。

为此,2003-2004年对该病原菌的侵染条件和致病性进行了系统研究,以期为防治提供理论依据。

1　材料与方法111　病原菌来源从发病的柑桔果实上以常规方法分离病原菌[3]。

用无菌水洗下分生孢子,将稀释后的孢子悬浮液涂于琼脂平板表面,在显微镜下挑取分生孢子置于P DA 培养基平板上,再经过分离培养获取该病原菌的纯系病原。

112　病原菌侵染条件试验11211　侵染途径　果实表面用清水洗净,再用011%次氯酸钠消毒,然后用自来水冲洗数次。

风干后,用病原菌孢子悬浮液(孢子浓度为1×106个/m l )按下列方法接种:(1)针刺法,用消毒的针在孢子悬浮液里浸蘸数秒,然后在果实上针刺接种,为保证供试果实发病均匀一致,每果接种10针,接种深度基本一致,以刺破果实表皮为度;6(2)喷雾法,将孢子悬浮液均匀地喷在果实表面上;(3)浸泡法,将果实在配制好的孢子悬浮液中浸泡5m in;(4)涂抹法,将孢子悬浮液均匀地涂抹果实表面。

接种后套袋保湿24h,将果实置于20～25℃的光照培养箱中。

每个处理30个果,重复3次,7d后观察发病情况,统计发病率。

11212　温度　用病原菌的孢子悬浮液进行针刺法接种,接后套袋并在每袋中加湿棉球保湿,分别置于5、10、15、20、25、30和35℃的光照培养箱中,每个处理30个果,重复3次。

逐日观察发病情况,统计发病率和潜育期。

11213　保湿时间　用病原菌的孢子悬浮液进行针刺接种,设保湿时间分别为6、12、18、24、36、48h,毕后移去塑料袋,将果实置于20～25℃的光照培养箱中。

每个处理30个果,重复3次,7d后观察发病情况,统计发病率。

113　病原菌致病力试验11311　病原菌致病症状的动态变化　用病原菌的孢子悬浮液进行针刺法接种,接后置于25℃的光照培养箱中,保湿48h,逐日观察发病情况。

11312　不同菌龄病原菌的致病力　将培养5、8、12、15和20d的菌株,分别编号为5、8、12、15和20dp,制成孢子悬浮液进行针刺法接种,接后置于25℃的光照培养箱中,保湿48h,分别在4、7、10d后观察发病情况,统计发病率。

2　结果与分析211　侵染途径对病原菌侵入的影响试验结果表明,接种方法对病原菌侵入有很大的影响。

针刺法接种后,发病率高达100%,而浸泡、喷雾和涂抹法接种后果实均不发病,由此表明,柑桔青霉菌是通过伤口侵染的。

212　温度对病原菌侵入的影响表1　温度对病原菌侵入的影响温度(℃)5101520253035病果数0372528208发病率(%)01010231383139313661726167潜育期(h)-5424861218 由表1可知,温度对病原菌的萌发、侵入以及扩展影响较大,20～25℃时最适合发病,发病率达8313%～9313%,潜育期仅为6～8h;当温度为10℃时,潜育期达54h,且发病率仅为10%;而当温度低于5℃时,果实不发病。

213　保湿时间对病原菌侵入的影响图1　保湿时间对病原菌侵入的影响 由图1可以看出,保湿时间对病原菌的侵入也有较大影响,当保湿时间较长时,发病率较高,而保湿时间较短时,发病率较低。

保湿时间6h,发病率仅为7%,保湿48h,发病率高达9215%。

214　病原菌致病症状的动态变化表2　病原菌致病症状的动态变化时间(d)123456789101112病斑直径(mm)121524163215441660157510771278167915801580158015主要症状水渍状斑白色菌丝青色霉层全果腐烂 表2显示,发病1～2d果皮软化,呈水渍状,色泽比健果果皮略淡,以手指轻压易破裂;3～4d 病斑中央开始长出白色菌丝;5～9d迅速扩展为白色圆形霉斑,接着又从霉斑中部长出青色粉状物,即病原菌分生孢子;10d后全果腐烂。

病原菌在初期生长速度较慢,4～5d后生长速度加快,病斑迅速扩展。

215　不同菌龄病原菌的致病力7　图2　不同菌龄Pen icillium ita licum W eh mer 的致病力 图2表明,不同菌龄的Penicillium ita licum W e 2hmer 对柑桔的致病力也有差异。

培养8d 和12d 的菌株致病力较强,培养16d 的次之,培养5d 和20d 的致病力较差,接种10d 后的发病率分别为8615%、6215%、4515%、3815%和713%。

3　讨论311　柑桔青霉病是由Penicillium italicum W ehmer所致,该病原菌不仅致病力强,且条件适宜时潜育期短。

最适的发病温度和保湿时间组合为20～25℃、24～48h,在常温和较长时间的封闭储藏条件下就可以侵入至发病,这可能是导致发病率高的主要原因。

312　培养时间不同的病原菌致病力有明显的差异,当超过一守时限后,培养时间越长,致病力越弱以至消失,这可能与其分生孢子寿命有关[2]。

参考文献[1]谢永红、瓯毅,等1Fludi oxonil 对柑桔果实贮藏病害的抑制效果[J ].西南园艺,2004,32(1):1～2[2]罗永兰、张志元,等1柑桔青霉病菌的寿命与窖、库消毒剂的筛选[J ].浙江柑桔,2000,17(4):16～17[3]方中达1植病研究法[M ]1北京:中国农业科学出版社,1998[4]徐秉良1苹果链格孢菌侵染条件及致病性研究[J ].甘肃农业大学学报,1997(1):43～47[5]沈素文1史建荣,等1菌龄与温度对小麦纹枯病菌致病力的影响[J ]1江苏农业科学,1997,6(1):35～36[6]魏景超1真菌鉴定手册[M ]1上海:上海科学技术出版社,1979多效唑对板栗生长与产量的影响刘腾火　涂宏英　童以松(长汀县农业局经作站,366300)摘　要　5年生板栗结果树在花穗米粒大小时喷施2000×10-6多效唑,可显著增加雌花数,提高板栗产量;在6月初喷施1000×10-6、1500×10-6多效唑,可明显抑制板栗新梢生长,抑制顶端优势,促进中、下部芽萌发,增加枝梢数量,促进花芽形成。

关键词　多效唑;板栗;产量;枝梢生长;花芽形成 收稿日期:2004-08-20 长汀县现有板栗6618hm 2,主要品种是处暑红、九家种、油光栗、魁栗、焦扎、短扎等。

全县板栗投产面积4200h m 2,年产量2800t,667kg/h m 2,单位面积产量低,效益差。

究其原因,主要是板栗为顶端优势极强的树种,初结果树所形成的枝条不充实,结果枝营养积累少,造成雄花枝多雌花枝少。

为提高板栗产量和品质,增加经济效益,2001—2003年进行了喷施多效唑的试验,探讨应用多效唑的最适时期与适宜浓度,旨在为生产上应用提供依据。

1　材料与方法多效唑为15%可湿性粉剂,由湖南冷水大乘资氮集团有限公司生产。

试验地设在古城镇青山村经作站板栗良种示范8。