第一章化验的基本要求1、严格执行化验标准。

2、了解有关原理，熟悉操作的主要步骤及注意事项。

并预先写好化验报告中的部分内容，以便化验时及时、准确地进行记录。

3.使用不熟悉其性能的仪器和试剂之前，应查阅有关书籍或请教他人。

4.保持化验室清洁、安静，使实验台整洁，仪器安置有序，注意节约和安全。

5.化验完毕后，实事求是地填写化验结果和数据。

6.积极开发新的检测项目和方法。

7.开发新的检测指标进行回收率的验证（样品和标准品对检）。

8.定期开展误差较正（送检、互检、自检）。

9.使用国际制单位。

一、制样1、样品的缩分：用四分法分样将样品倒在清洁、光滑、平坦的光面硬纸上，充分混匀后将样品摊成平面正方形，然后以两条对角线为界分成四个三角形，取出其中两个对角三角形的样品，剩下的样品再按上述方法反复缩分，直到最后剩下的两个对顶三角形的样品接近200g为止。

2、样品的处理将粒状样品用样品粉碎机粉碎，装入样品袋等待检验。

3、样品标示标示样品名称、日期、批号、采样人等。

二、留样：制备好样品需留样，以备复验。

留样时间一般原料30-60天，半成品或成品30天，化验指标有疑问留样60天。

饲料水分的测定1、适用范围标准适用于测定配合饲料和单一饲料中水分含量，但用作饲料的奶制品、动物和植物油脂、矿物质除外。

2、原理试样在105±2℃烘箱内，在大气压下烘干，直至恒重、散失的重量为水分。

4、测定步骤洁净称样皿，在105±2℃烘箱中烘1h取出，在干燥器中冷却30min，称准至0.0002g，再烘干30min，同样冷却，称重，直至两次重量之差小于0.0005g为恒重（W1)。

用已恒重称样皿称取样品2-5g（W），在105±2℃烘箱中烘3h（以温度到达105℃开始计时），取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min称重。

再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之重量差小于0.002g(W2）。

5、测定结果的计算5.1计算公式(W1+W)-W2(水分)%= ────×100W式中W──烘干前样品重g；W2──105℃烘干后试样及称样皿重g；W1──已恒重的称样皿重g。

5.2重复性每个试样，应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，两个平行样测定值相差不得超过0.2%，否则重做。

6、注意事项：6.1饲料及水份大于4%的原料称样为2g左右，水份小于4%的样品称样为3-5g。

6.2油脂水份测定可烘2小时取出称量计算水份。

6.3磷酸氢钙采用50℃烘干4小时来测定水份含量。

6.4高水份玉米等要少粉碎样快称样减少制样水份遗失。

粗灰分的测定1、本标准适用于配合饲料、浓缩料及各种单一饲料中粗灰分的测定。

2、原理试料在550℃灼烧后所得残渣，用质量百分率来表示。

残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。

4、试样的选取和制备取具有代表性试样，粉碎至40目。

用四分法缩减至200g，装于密封容器。

防止试样的成分变化或变质。

5、测定步骤将干净坩埚放入高温炉，在550±20℃下灼烧30min。

取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器冷却30min，称其质量。

再重复灼烧、冷却、称量，直至两次质量之差小于0.0005g为恒质。

在已恒质的坩埚中称取2-5g试料(灰分质量0.05g以上)，准确至0.0002g，在电炉上小心炭化，在炭化过程中，应将试料在较低温度状态加热灼烧至无烟，尔后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉，于550±20℃下灼烧3h。

取出，在空气中冷却1min，放入干燥器中冷却30min，称取质量。

再同样灼烧1h，冷却，称量，直至两次质量之差小于0.001g为恒质。

6、分析结果计算计算公式：M2-M0粗灰分(%)= ───×100M1式中：M0──为恒重空坩埚质量，g；M1──为灼烧前试样的质量，g；M2──为炭化后坩埚加灰分的质量，g。

7、允许差粗灰分含量在5%以上，允许相对偏差为1%；粗灰分含量在5%以下，允许相对偏差为5%。

8、注意事项：灰份小于3%的试样称样量为4-5g。

饲料钙测定方法:EDTA容量法1、适用范围本标准适用于配合饲料和单一饲料。

2、原理钙离子在碱性溶液中与EDTA结合，置换出钙黄指示剂，而使溶液变成纯蓝色以指示终点。

用三乙醇胺和盐酸羟胺消除其他金属离子的干扰，可快速测定钙含量。

4、试剂4.1 20%氢氧化钠溶液。

4.2 三乙醇胺：分析纯，1:1水溶液。

乙二胺：分析纯，1:1水溶液4.3 钙黄指示剂0.1g钙黄绿素与0.1g 甲基麝香草酚兰与0.03g 百里香酚酞与5g氯化钾混匀研细，贮存于磨口瓶中。

4.4 盐酸羟胺：分析纯。

4.5 孔雀石绿指示剂(指示剂级)：0.1g溶于100ml蒸馏水中。

4.65、测定步骤5.1 测定粗灰分后继续进行，在盛有灰坩埚中加入盐酸溶液(1:3)10ml和浓硝酸数滴，放在电炉上小心煮沸。

数分钟将此溶液转入100ml容量瓶，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

5.2 试样的测试准确移取试样5ml,于三角瓶中加蒸馏水50ml,10g/l淀粉溶液10ml，三乙醇胺2ml ，乙二胺1ml，每加完一种实际要充分摇匀，然后加1滴孔雀石绿指示剂,摇匀，滴加氢氧化钠(20%)溶液10ml，加入0.1g盐酸羟胺摇匀溶解后，,再加钙黄指示剂少许显墨绿色，在黑暗背景下，立即用乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定至溶液绿色荧光消失，呈紫红色为滴定终点，同时做试剂空白试验。

6、测定结果计算计算公式: ( V-V0)×N×V1Ca%=────────W1×V2×1000式中：W1──样重，g；V──滴定试样耗标准液体积，ml；V0──空白消耗EDTA的体积，ml；N──EDTA标准液浓度，mol/L；V1──试样分解液总体积，ml；V2──移取试样分解液的体积，ml；7.注意事项：钙粉、石膏粉、贝壳粉可适用此法，称样0.7-0.8g在100 ml烧杯中，加15ml盐酸加热溶解，定容200ml，以下方法相同。

饲料中水溶性氯化物的测定方法1、适用范围本标准适用于各种配合饲料，浓缩饲料和单一饲料。

2、方法原理用硝酸银标准溶液滴定，生成沉淀，从而根据消耗硝酸银的体积求出氯化物的含量。

稍过量的硝酸银与铬酸根离子生成砖红色沉淀，指示终点到来。

3、试剂3.1硝酸银标准溶液：0.01mol/l,1.75g硝酸银溶于1000亳升水中。

3.2 10%铬酸钾指示剂。

4、测定步骤称5克样品，准确到0.001g,准确加蒸馏水200ml,搅拌15min，静置15min，准确移取上层清液10ml于三角瓶中，加蒸馏水50ml，10%铬酸钾指示剂1ml，用0.01M硝酸银标准溶液滴定至呈现砖红色，且1min不褪色为终点。

5、测定结果的计算计算公式：(V-V0)×C×58.45NaCl%=──────────*100W1W1：样重C：滴定溶液标准浓度V：消耗滴定溶液体积V0：空白体积58.45—NaCl的摩尔质量6、注意事项：6.1本法可测食盐含量，但称样量应不大于0.2g，定容要准确。

6.2本法测定结果稍偏高，终点颜色不能太深。

6.3浓缩料、鱼粉称样2-3g，全价料称样为5g左右。

饲料总磷量测定方法方法一：饲料及一般饲料原料中总磷的测定1、适用范围本标准适用于配合饲料和单一饲料。

不适用于测定磷酸盐中磷的测定。

2、原理先将试样中有机物破坏,使磷游离出来,在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色(NH4)3PO4、NH4VO3·16M0O3,在波长420nm下进行比色测定。

此法测得为总含磷量，包括动物难以吸收的植酸磷。

4、试剂4.1盐酸：化学纯，1:.3水溶液。

4.2硝酸：化学纯。

4.3钒钼酸铵显色试剂。

称取偏钒酸铵，分析纯1.25g，加200 ml水，加硝酸250ml。

另取钼酸铵25g，加蒸馏水400ml溶解之,在冷却条件下将此溶液倒入上溶液，且加蒸馏水调成1000ml。

避光保存，如生成沉淀则不能使用。

4.4磷标准液将磷酸二氢钾在105℃干燥1h，在干燥器中冷却后称取0.2195g 溶解于水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释径直至刻度，摇匀，即为50mg/ml的磷标准液。

5、磷标准曲线绘制与计算公式的推断：5.1分别移取0，1.0，5.0，10.0，15.0，20.0毫升标准溶液于6个已加10亳升钒钼酸铵显色剂的50毫升容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，过10分钟在420nm波长下测定吸光度y（以0亳升标准为空白）。

以磷含量为横坐标,吸光值为纵坐标,列出直线回归方程(y= a+bx)。

以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标。

与前面测钙相同，在100ml容量瓶中移取2ml（如果是鱼粉就取2ml或磷含量高的也取2ml）到50ml容量瓶中加10ml钒钼酸铵,用蒸馏水稀释至刻度，在420nm波长下,用分光光度计测定。

用磷计算公式来计算。

7、重复性每个试样称取两个平行样进行测定，以其计算均值为结果。

含磷量在0.5%以上，允许相对偏差为3%，含磷量在0.5%以下，允许相对偏差为10%。

8、注意事项：8.1天冷时显色反应慢，应放置温度较高的地方20分钟再比色。

8.2标准曲线随温度有变化，长期使用应作校正。

8.3本法不适于氢钙的磷测定，因浓度大，曲线易变形。

8.4控制吸样体积，使吸光度在0.3-1.00之间。

方法二：磷酸氢钙枸溶磷的测定1、方法原理：用中性柠檬酸铵溶液溶解和提取试样中的磷酸根，然后用重量法测定磷含量，当含量大于9%时，确认该样品是磷酸氢钙。

试剂：2.1 柠檬酸（GB/T9855）2.2 无水乙醇（GB/T678）2.3 氨水(GB/T631)2.4喹钼磷酮沉淀剂：①溶解70g钼酸钠于150ml水中；②溶解60g柠檬酸于150ml（水和85mlHNO3的混合液中）。

③搅拌下将溶液1倒入2中。

④加5ml喹啉于35mlHNO3和100ml水的混合液中。

⑤将溶液4加入溶液3中摇匀放置24小时过滤、滤液中加入280ml丙酮，用水稀释至1000ml。

2.5、中性柠檬酸铵溶液：溶解74克柠檬酸于300ml水中，加69ml氨水，在酸度计上用氨水调节PH值为7.0，用比重计测其比重为1.09（20℃）（将溶液贮存于密闭瓶中，如长期使用，用前校正其酸度）。

3、分析步骤：准确称取0.8克试样，置于200ml容量瓶中，加入100ml中性柠檬酸铵溶液，将容量瓶置于65℃±1℃的水浴中保温1小时，不时打开瓶塞，每隔15分钟摇动一次，每次摇动约30秒，取出容量瓶，冷却至室温，加水至刻度，摇匀，干过滤，弃去初滤液30ml，吸取20ml滤液于250ml烧杯中，加水70ml，加1+1硝酸10ml，在水浴中加热至75℃（烧杯中温度），加喹钼磷酮沉淀剂50ml，保温30秒后，取出冷却至室温，用180℃恒重的4号莎芯坩埚过滤，并洗涤至中性，将坩埚放在180℃烘箱中灼烧45分钟取出冷却后称重。