一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
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三 PCR反应体系的组成
在常规的PCR反应中，体系通常有模板， 引物，缓冲液，脱氧核苷酸，DNA聚合酶， Mg+和K+等成分组成。
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一、PCR的定义：
PCR（polymerase chain reaction) ： 聚合酶链式反应，又称体外DNA扩增技 术。是近年来发展起来的一种体外扩增 特异DNA片段的新技术。
上述 3 步为一个循环，每经过一个循 环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形 成的链又可成为新一轮循环的模板，重复 以上3步，根据需要的量，经过25～40个循 环，DNA可扩增106 ～ 109 倍。 在PCR反应中，每一个循环都以前一循环 完成后的所有产物为模板，因此，扩增产 物是以指数方式增长的（2n）。
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PCR技术在医学检验中 应用
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主要内容： 1.PCR的定义； 2.PCR的基本原理； 3.
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PCR技术：1985年由美国的Kary Mullis 首创，可以将微量目的DNA片段扩 增一百万倍以上。
优点：敏感度高、特异性强、产率高、重复 性好以及快速简便等，广泛应用于微生物学、 考古学、法医学及体育等领域，并已普及到 许多普通实验室，大大简化了传统的分子克 隆技术，从而比较容易地对目的基因进行分 析、鉴定。
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扩增的特异性取决于引物与模板DNA的 特 异 性 结 合 ， 一 个 典 型 的 PCR 反 应 包 括 ， “变性-退火-延伸”的多个循环,其一般反应 过程为： 1. 变性 (Denaturation)：
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二、PCR的原理：
用于扩增位于两段已知序列之间的DNA 片段，类似于天然DNA的复制过程。
以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别 与模板5′末端和3′末端互补的寡核苷酸片 段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半 保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新 的DNA合成，重复这一过程，即可使目的 DNA片段得到扩增。
将体系加热至(95℃， 30″)使模板DNA 互补双链间的氢键断而解离成为两条单链 DNA，以便他与引物结合，为下轮反应做准 备。
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2. 退火 (复性) (Annealling): 将体系温度突然将温度降至（55 ℃左
3. 延伸 (Extension):
将反应体系温度升至DNA聚合酶的最佳 扩增温度（72 ℃），与模板DNA结合的引
物在DNA聚合酶的作用下，以 dNTP作为反 应原料，以引物的 3′ 端开始，按碱基配对与 半保留复制原理，合成一条与模板DNA链互 补的新DNA链。
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右）后寡核苷酸引物与模板DNA单链上的 互补序列杂交（按碱基互补配对原则结合）。 同时，体系中的部分DNA聚合酶被激活， 一旦引物与模板杂交，DNA聚合酶就结合 到杂交序列上使引物开始沿着模板DNA延 伸。这一步对扩增产物特异性有重要的决定 作用；
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PCR 的基本反应步骤
变性
95˚C
பைடு நூலகம்
延伸 72˚C
25-40个循环
退火
55˚C
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