实验五牛黄解毒片中黄芩苷的含量测定
一、目的要求
1. 掌握中药制剂中黄芩苷的含量测定方法。

2. 掌握高效液相色谱仪的使用方法。

二、基本原理
利用高效液相色谱法分离牛黄解毒片中黄芩苷，在λman315 nm处进行检测。

为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随行外标一点法定量。

三、仪器与试药
1. 高效液相色谱仪、超声波提取器、分析天平。

2. 甲醇（色谱纯）、磷酸（AR）、双蒸水、乙醇（AR）。

3. 黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）。

4. 牛黄解毒片（市售品）。

四、操作步骤
1. 对照溶液制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成1mL中含30μｇ的溶液，即得。

2.供试品溶液制备取本品20片，（包衣片除去包衣），精密称定，研细，混匀，取约1ｇ，精密称定，加70%乙醇30mL，超声处理20分钟，放冷，滤过，滤液置50mL量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，溶液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。

3. 测定法
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸（45∶55∶0.2）为流动相；检测波长为315nm。

测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

五、思考题
1. HPLC中常用的定量方法有几种？外标一点法有何特点？
2. 牛黄解毒片中黄芩苷的含量测定还可用哪些方法？。