血脂四项测定培训课件
加入物
血清(ul) 标准液(ul) 蒸馏水(ul) 工作液(ml)
空白管(B)
50 3.0
标准管(S)
50 3.0
测定管(U)
50 3.0
2、比色 :混匀各管,室温放置3 min,用分光光度计比色,
波长630nm,光径1.0cm,以空白管调零,记录各管的吸光度
值。
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实验原理---TG测定(甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法)
甘油三酯+H2O 脂蛋白脂酶 甘油+脂肪酸 甘油+ATP 甘油激酶 3-磷酸甘油+ADP
3-磷酸甘油+O2 3-磷酸甘油氧化酶 磷酸二羟丙酮+H202 2H202+EHSPT+4-AAP 过氧化物酶 醌亚胺+4H2O
粥样硬化、原发性高脂血症等疾病诊断的临床
意义。 2020/2/7
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实验原理---总胆固醇测定(胆固醇氧化酶-过氧 化物酶法)
胆固醇酯+H2O
胆固醇酯酶
胆固醇+脂肪酸
胆固醇+1/202 +H2O 胆固醇氧化酶 △4-胆甾烯-3-酮+H2022020/2/75
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主要试剂
总胆固醇测定试剂
试剂1: Na2HPO4﹒12H2O、 KH2PO4、 苯酚、 胆酸 钠,NaN3; 试剂2:MOPSO、NaOH、 NaN3、 MgCL2﹒6H2O、 4-氨基安替比林、EDTANa2、BSA、CE、CO、 POD、 液体活性剂Ⅰ。
值。
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HDL-C测定处步,请骤联系网站或本人删除。
1、将试剂1与试剂2按10:1比例混匀为工作液。
2、按表格加样。
加入物(ml)
空白管(B)
标准管(S) 测定管(U)
血清 标准液 蒸馏水
0.02
0.02
-
0.02 -
加入低密度脂蛋白胆固醇的抑制剂,将低密度和极低密 度部分隐蔽起来,直接测定高密度部分的胆固醇含量, 显色反应原理同总胆固醇,在510nm波长处测定吸光度值,计
算 其含量。
实验原理---LDL-C测定
LDL-C能与磷钨酸-镁和聚乙二醇复合剂作用产生沉淀,用分散 剂可使沉淀颗粒细小均一,在630nm处测定其吸光度值,计算 其含量。
2H202+4-氨基安替比林+酚 过氧化物酶 醌亚胺+4H2O
样品中游离及脂化的胆固醇,经过上述反应产生醌亚胺,在 505nm波长处测定其吸光度值,计算其含量。
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实验原理---HDL-C测定
HDL-C测定试剂
试剂1: 磷酸盐缓冲剂、 LDL-C抑制剂、DHBS ; 试剂2:胆固醇酯酶、胆 固醇氧化酶、过氧化物酶、 4-APP。
LDL-C测定试剂 试剂: 磷钨酸、氢氧化钠。
器材:
分光光度计、半自动生化分析仪、恒温水浴箱、微量进样器、移液管等。
待测标本:血清
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TG测定试剂
试剂1: PIPES、 CAPOS、BSA、 MgCl2、甘油激酶、3磷酸甘油氧化酶、过氧 化物酶、显色剂Ⅰ、显 色剂Ⅱ、NaN3; 试剂2: PIPES、 CAPOS、BSA、GYK、 4-APP、显色剂Ⅱ、 NaN3。
6
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工作液
2.0
2.0
2.0
3、比色 :混匀各管,置37℃水浴10 min,用分光光度计比色,
波长510nm,光径1.0cm,以空白管调零,记录各管的吸光度
值。
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LDL-C测定处步,骤请联系网站或本人删除。
1、按表格加样。
总胆固醇测定处,步请骤联系网站或本人删除。
1、将试剂1与试剂2按1:1比例混匀为工作液。
2、按表格加样。
加入物(ml)
空白管(B)
标准管(S) 测定管(U)
血清 标准液 蒸馏水
0.02
0.02
-
0.02 -
工作液
2.0
2.0
2.0
3、比色 :混匀各管,置37℃水浴10 min,用分光光度计比色,
波长505nm,光径1.0cm,以空白管调零,记录各管的吸光度
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【目的要求】
❖ 掌握:TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的基本 原理。
❖ 熟悉:TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的操作 过程。
❖ 了解:TC、HDL-C、LDL-C、TG测定对动脉
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❖ 血浆中所含脂类统称为血脂,血脂含量可以反 映体内脂类代谢的情况。检测血脂时,常在饭 后12-14小时采血。
❖ 我国血脂异常防治建议和美国国家胆固醇教育 计划成人治疗计划Ⅲ (NCEP-ATP Ⅲ)都要求 临床常规血脂测定中应至少测定TC、TG、 HDL-C及LDL-C这四项。有条件的实验室可测 定apoAI、apoB及Lp(a)。
各管的吸光度值。
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本文❖档所计提算供的:信按息下仅供列处参公,考请之式联用计系,算网不站能或作本为科人学删除依据。,请勿模仿;如有不当之
T处G,请测联定系网步站骤或本人删除。
1、按表格加样。
加入物(ml)
空白管(B) 标准管(S) 测定管(U)
试剂R1 血清 标准液 蒸馏水
0.8 -
0.01
0.8 -
0.01 -
0.8 0.01
-
充分混匀,37℃水浴5min
试剂R2
0.2
0.2
0.2
充分混匀,37℃水浴5min
2、上机,仪器设置:37℃,波长546nm,以空白管调零,记录