天然干扰素分类
1. 根据来源、基因序列和氨基酸组成分类 I 型干扰素： IFNα、IFNβ、IFN τ、IFN ω
来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能 ：抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调节(较弱） 其中IFN-α为多基因产物，有23种以) 来源：活化的T细胞和NK细胞产生 功能：免疫调节 提高单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力 增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性 抑制TH2细胞形成，下调体液免疫应答 趋化作用 抗病毒和抗肿瘤作用（次要） 2. 根据动物来源确定分类，例如人干扰素（HuIFN），小鼠干扰素 （MuIFN）。
对淋巴细胞的作用：干扰素对淋巴细胞的作用较为复杂，可受剂量和时间等因素的影 响而产生不同的效应。在抗原致敏之前使用大剂量干扰素或将干扰素与抗原同时投入 会产生明显的免疫抑制作用；而低剂量干扰素或在抗原致敏之后加入干扰素则能产生 免疫增强的效果。在适宜的条件下，IFNγ对B细胞和CD8+T细胞的分化有促进作用， 但不能促进其增殖。IFNγ能增强TH1细胞的活性，增强细胞免疫功能；但对TH2细胞的 增殖有抑制作用，因此抑制体液免疫功能。IFNγ不仅抑制TH2细胞产生IL-4，而且抑制 IL-4对B细胞的作用，特别是抑制B细胞生成IgE。 对其它细胞的作用：IFNγ对其他细胞也有广泛影响：①刺激中性粒细胞，增强其吞噬 能力；②活化NK细胞，增强其细胞毒作用；③使某些正常不表达MHCⅡ类分子的细胞 （如血管内皮细胞、某些上皮细胞和结缔组织细胞）表达MHCⅡ类分子，发挥抗原递 呈作用；④使静脉内皮细胞对中性粒细胞的粘附能力更强，且可分化为高内皮静脉， 吸引循环的淋巴细胞。
1.3干扰素的生物学活性
正常情况下组织或血清中不含干扰素，只有在某些特定因素的作 用下才能诱使细胞产生干扰素。
1.3.1广谱抗病毒活性机制
Ⅰ型干扰素具有广谱的抗病毒活性，对多种病毒如DNA病毒和RNA病 毒均有抑制作用；但这种效应不是直接的，而是通过对宿主细胞的作 用引起的。 ①对干扰素敏感的细胞表面存在于干扰素受体，核内有“抗病毒蛋白” 基因，受干扰素作用后该基因活化，产生的抗病毒蛋白可阻止病毒 mRNA翻译，并促进病毒mRNA降解。 ②干扰素能提高细胞表面MHCⅠ类分子的表达水平，受到病毒感染的细 胞表面MHCⅠ类分子的增加有助于向Tc细胞递呈抗原，引起靶细胞 的溶解。 ③干扰素可增强NK细胞对病毒感染的杀伤能力。
干扰素是一种细胞因子，它是机体感染病毒时，宿主细胞 通过抗病毒应答反应，而产生的一组结构类似、功能相近 的低分子糖蛋白。英文名称为Interferon，简称IFN。 发现：干扰素是1957年英国科学家Isaccs等发现的。他们把灭 活的流感病毒作用于小鸡细胞，结果发现这些细胞产生了 一种可溶性物质，这种物质能抑制流感病毒，并且能干扰 其它病毒的繁殖，因此，他们将这种物质称为“干扰素”。 以后科学家们进一步发现，机体对入侵的异种核酸（包括 病毒）都产生干扰素以进行防御。当机体细胞受到病毒感 染时，机体细胞产生干扰素，干扰病毒复制，它是机体抗 病毒感染的防御系统。

1.5.干扰素生产工艺路线（1）
体外诱生干扰素制备工艺： Sendai病毒诱导人白细胞 1989年：IFNα-n3/Alferon，批准上市 产量低：1g IFNα，需要 3亿ml人血白细胞 来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵 潜在的血源性病毒污染的可能性
干扰素生产工艺路线（2）


1.4 重组干扰素的临床应用
广谱抗病毒活性（rhuIFNα） 慢性乙型、丙型、丁型肝炎；疱疹、病毒性角 膜炎。 直接抗肿瘤活性（rhuIFNα） 毛细胞和慢性髓样白血病、 Kaposi肉瘤、非霍 奇金淋巴瘤。 免疫调节活性——治疗慢性肉芽肿瘤 （rhuIFNγ） 多发性硬化症 rhuIFNβ
病毒复制
抑制病 毒复制 IFN-诱导蛋白
诱导刺激 胞核
信号转导 胞核
IFN-a
抗肿瘤作用机制
Ⅰ型干扰素能抑制细胞的DNA合成，减慢细胞 的有丝分裂速度；这种抑制作用有明显的选择 性，对肿瘤细胞的作用比对正常细胞的作用强 500～1000倍。另外，Ⅱ型干扰素也可通过增 强机体免疫机制、加强免疫监督功能来实现其 抗肿瘤效应。

上市重组干扰素: α2a、α2b、α1b、 β1b，γ
1992年我国第一个基因工程药物IFN-α1b获得 国家一类新药证书。

研发中的重组干扰素：IFN ω，临床阶段
1.2干扰素的理化性质
143-166aa； MW:18-40 ku； pI: 6.5-7.5； 乙醚、氯仿敏感 容易吸附玻璃、淀粉、醋酸 纤维膜、琼脂和塑料等介质。
人源转化细胞系培养生产工艺： 1999年：IFN α-n1/Wellferon, 批准用于临床。 优点：首次实现大规模商业化生产。 缺点： 活性低，退出临床应用。
干扰素生产工艺路线（3）
基因工程大肠杆菌发酵生产工艺: 上市产品：重组人干扰素rhuIFN 1986，rhuIFNα-2a， rhuIFNα-2b； 1990，rhuIFNγ-1b；1993，rhuIFNβ-1b； 2001－2002： PEG化IFN，PEG-Intron, Pegasys 表达产物：无糖基化，N-met，无活性包涵体 工艺特点：发酵过程，随后变性、复性过程。
免疫调节活性机制
免疫调节作用表现在对宿主免疫细胞活性的影响，如对巨噬细胞、T细胞、B细胞和NK细 胞等均有一定作用。

对巨噬细胞的作用：IFNγ可使巨噬细胞表面MHCⅡ类分子的表达增加，增强其抗原递 呈能力；此外还能增强巨噬细胞表面表达Fc受体，促进巨噬细胞吞噬免疫复合物、抗 体包被的病原体和肿瘤细胞。
第十五章 重组人干扰素生产工艺
主要内容

干扰素概述 基因工程假单胞杆菌的构建与保藏 干扰素的发酵工艺过程 干扰素的分离纯化工艺过程
1 .干扰素概述


干扰素的种类 干扰素的理化性质 干扰素的生物学活性 干扰素的临床应用 干扰素的生产工艺路线
1.1 干扰素的种类

概念： （interferon，IFN）