大便常规和隐血试验标准操作规程
、目的
用于规范大便常规和隐血试验的操作。
二、适用范围适用于大便常规和隐血试验的检测。
三、支持性文件
《全国临床检验操作规程》(第三版)、《临床检验基础》(第三版)、《隐血试验操作说明书》
四、大便标本采集
1、采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别,如一般检验留取新鲜指头大小(约5g)即可,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检,标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒,便于检查后焚毁。
血吸虫毛蝴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。
细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其它化学药品。
2、检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但均须立即镜检。
3、检查阿米巴滋养体,应于排便后立即检查。
冬季需采取保温措施,迅速送检。
4、不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。
若标本中混入尿液,可使柔弱的原虫致死。
用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时,可因尿液中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果错误的增高。
粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等,因腐生性原虫、真菌抱子、植物种子、花粉易混淆实验结果。
5、盛粪便标本的容器必须有盖,有明显标记。
粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分,若无病理成分,可多部位取材。
采取标本后,应在一小时内完成检查,否则可因9H及消化酶等影响,而使粪便中细胞成分破坏分解。
6、检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数,应收集24h粪便送验。
7、隐血试验,应嘱患者收集标本前3 日禁食动物性食物。
连续检查3 天,
并选取外表及内层粪便。
收集标本后须迅速进行检查,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。
8、细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。
五、常规检验
1、颜色
可根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色。
灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疽、胆汁减少或缺乏。
绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。
红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。
柏油样便见于上消化道出血等。
酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。
米泔水样见于霍乱。
2、性状
可报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。
正常时为有形软便。
[1]球形硬便:便秘时可见。
[2]粘液稀便:见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
[3]粘液脓性血便:多见于细菌痢疾。
[4]酱色粘液(可带脓)便:多见于阿米巴痢疾。
[5]稀汁样便: 可见于急性肠胃炎, 大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。
[6]米泔样便并有大量肠粘膜脱落,见于霍乱、副霍乱等。
[7]扁平带状便:可能因直肠或肛门狭窄所致。
3、寄生虫虫体蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辨。
钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。
服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。
驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。
4、直接涂片镜检
[1]洁净玻片上加等渗盐水1—2 滴,选择粪便的不正常部分,或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。
[2]最好取大玻片,制成涂片后,应覆以盖片。
涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
[3]在涂片中如发现疑似包囊,则在该涂片上加 1 滴碘液,在高倍下仔细鉴别,如仍不能决定时,可取全量粪便浓缩法检查。
[4]虫卵的报告方式:未找到者注明“未找到虫卵”,找到一种报告一种,找到几种报告几种,并在该虫卵后面注明数量若干,以低倍视野计算。
[5]应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并应注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。
若大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
[6]细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。
[7] 夏科—雷登(Charcot —Leyden)结晶:为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶,大小不一。
常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染粪便中最易检出。
过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。
[8]细菌:占粪便净重的I /3(4000亿/g干粪),正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌,占80%;而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10%;芽胞茵(如梭状菌)和酵母菌为常住菌,但总量不超过10%。
正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致,除涂片染色找细菌外,应采用不同培养基培养鉴定。
六、隐血试验上消化道有少量出血时,红细胞被消化而分解破坏,由于显微镜下不能发现,故称为隐血。
1、原理(匹拉米洞半定量检查法)隐血试验是利用匹拉米洞半当作呈色指示剂,在酸及H2O2 的作用下,与血红蛋白反应,产生紫蓝T紫红的颜色,据此来进行判读及阳性结果半定量。
2、【储存条件及有效期】
储存条件:本试剂盒应避光贮存在相对湿度不大于80%,无腐蚀性气体和通风良好的5C ~30C室内。
有效期:原包装未开封试剂的有效期为24个月,在有效期内德已开封试剂应在开封后 3 个月内使用完,每次使用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
3、【样本要求】粪便检体收集后应尽快进行检测,以免因检体长时间放置
导致隐血反
应的敏感性降低。
4、【检体的收集与准备】
从采集盒(瓶)中取样或将测试卡及取样木棒交给病人自行取样,取样时
直接打开测试卡正面的盖子,并利用取样木棒挖取不同部位的粪便检体10-50mg (相当于火柴头大小)涂抹在测试卡A窗或B窗的方格内(切勿超出方格之外),然后合上盖子。
若是病人自行取样应尽快将测试卡交回医检师处或检验室,以进行常规试验。
(注:病人绝对不能自行打开测试卡背面印有“ Development Window”的圭寸盖)
5、【检验方法】
1)、将测试卡背面朝上,并打开印有“ Development Window ”的封
2 )、在方格内左右两侧各滴一滴显色剂 A ,待试剂完全渗透之后,再各
滴一滴显示剂B。
3 )、当加入显色剂 B 后,于2min 内判读完毕。
6、【检验结果的解释】
1)、当加入显色剂 B 后,立即产生紫蓝色,报告为(4 + )。
2)、当加入显色剂 B 后,10s 内产生紫蓝色,报告为(3+ )。
3)、当加入显色剂 B 后,1min 内产生紫红色,报告为(2 + )。
4)、当加入显色剂B后,1~2min内才逐渐产生紫红色,报告为(1 + )
5)、当加入显色剂B 后,于判读时间内无任何紫蓝或紫红的颜色反应,报告为阴性(-)。
※ 敏感性:不小于50g(Hb)/g(stool)
7、【检验方法的局限性】本试剂盒仅作为对粪便隐血检测的初检及筛查试剂使用,不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜和X 线检查。
8、【产品性能指标】
1)、批内差:检验限度中阳性测试结果的批内差应不大于 3 张。
2)、批间差:检验限度中阳性测试结果的批间差应不大于 3 张。
9、【注意事项】
1 )、本试剂盒仅用于体外诊断,不作其他临床用途。
2)、在粪便标本的采集、运送过程中和使用试剂进行检测时,操作人员应注意做好个人防护,避免人体接触,以防止可能产生的污染和自身感染。
3)、对无任何明显症状但却怀疑可能有少量出血的病人,建议应连续取3 天粪便标本,每天从标本的不同部位取材做两次实验,3 天之内,共做6 次隐血检查。
4)、检验前2 天内建议应禁食动物血、脏器及含叶绿素类食物;铁剂、中药、维生素 C 等药品,以尽量避免出现假阳性结果。
5)、本试剂盒不能与氧化剂共同存放,应避免阳光直射及高、低温和潮湿的贮存环境。
6)、冬天室温过低时反应可能较迟缓,应适当延长观察时间。
7)、本试剂应由专业人员使用,每次使用后请拧紧试剂瓶盖,以免挥发。
8)、使用前应详细阅读使用说明书,在有效期内使用。
9)、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
10)、生产批号、有效期见外包装。
10、【参考文献】
便隐血(OB试剂(匹拉米洞半定量检查法)使用说明书。
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