家兔离体小肠平滑肌生理特性
,实验目的,
1(通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。

2(学习动物离体组织器官灌流的实验方法。

,实验原理,
消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。

平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。

在一定时间内，离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。

本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中，观察当模拟内环境因素发生变化时，离体小肠平滑肌运动的变化。

该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性，被称为生物学检定法。

,器械与材料,
兔(大白鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。

缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1?10000)、乙酰胆碱(1?100000)、0.5mg/ml 阿托品、
0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。

1,CaCl2、心得安、阿托品、自己准备可影响消化的药物。

,方法与步骤,
1(恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽，浸漫度务必超过2支加热管。

然后在药液管及预液管加适量台氏液，二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台氏液，使预液管预温的台氏液通向药液管。

恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约40?(此温度是水浴槽中加热管旁的水温，与药液管内的温度相差2,3?)，为了药液管内的温度得到准确控制，须采用外加温度计调整。

最后打开供氧开关，即可产生空气气泡供氧，微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出，不能过快以免液面振动而影响记录。

肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管，用弹簧夹控制出液量。

2(水浴里的水恒温38?，营养管内充满台氏液。

要不断供应空气或O2，通过可调节供气旋钮控制气流速度，使气泡一个一个地进入台氏液中。

3(用铁锤击兔或大白鼠的头部，昏迷后，立即剖开腹腔，取出十二指肠至结肠间的肠段，剪成约3,4cm 小段，放入室温台氏液内轻轻冲洗，以除去肠的内容物。

边洗边通入空气或O2，把肠段夹入另一盛有新鲜台氏液的培养皿内，继续通气备用。

4(将肌肉张力换能器(10g)固定于铁架台上，张力换能器输入端与系统的第1
通道中相连，进入计算机生物信号采集处理系统，选择“新建实验”中“张力”模块的生理特性实验项目并对控制面板参数进行设置。

5(营养管内的溶液保持37?，然后取出一小段肠，用缝针将肠的一端穿线结扎(只结扎半边肠腔)。

肠的一端结扎线系于带夹的固定支架底端S 形小钩上，将支架放入营养管内并固定于管边缘。

肠的另一端则连于张力换能器的应力臂上。

使肠段完全浸浴在台氏液中，并立即通气。

让肠段稳定20min，便可以描记其活动曲线。

6(实验项目
(1)观察、记录38?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。

(2)观察、记录25?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。

(3)待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38?后，加1:10000肾上腺素1,2滴于中央
标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。

在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38?台氏液冲洗三次。

(4)待肠段活动恢复正常后，再加1:10000乙酰胆碱1,2滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。

作用出现后同上法冲洗肠段。

(5)向中央标本槽内加入1 mol?L-1NaOH溶液1,2滴，观察肠段收缩曲线的改变。

作用出现后同上法冲洗肠段。

(6)向中央标本槽内加入1 mol?L-1HCl溶液1,2滴，观察肠段收缩曲线的改变。

待作用出现后同上法冲洗肠段。

(7)向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液2,3滴或1%BaCl2 2—3 滴，观察肠段收缩曲线的改变。

(8)0.01%磷酸组织胺1—2 滴, 观察肠段收缩曲线的改变。

待作用出现后同上法冲洗肠段。

(9)参照以上方法，这里可以加入自己设计提出的药物，观察肠段收缩曲线的改变。

(10)在换上新鲜台氏液，肠段恢复节律收缩的基础上，加入乙酰胆碱3滴，使引起明显效应，再加入0.5mg/ml 阿托品3—4 滴，观察加入阿托品后肠段运动的变化。

进行这项试验后，需要多次冲洗，肠段才慢慢恢复活动。

,实验结果,
剪贴实验记录曲线，并做好标记、注释。

分析各种因素对小肠运动的影响，并简要说明其机制。

,注意事项,
1(每次加药前，必须在预液管内准备好更换用的38?台氏液。

2(药液管内台氏液的量必需没过肠段，并保持药液管恒温为38?，以免影响肠平滑肌的收缩功能以及对药物的反应不稳定。

3(各药液加入的量为参考数据，效果不明显可补加，但不可一次过多，以免引起不可逆反应。

4(通气管的气泡逸出速度不可太快，以单个气泡陆续出现为宜。

否则会影响肠段运动的曲线记录。

5(每项实验效果明显后，立即更换新鲜台氏液，一般应冲洗2,3次，待肠段恢复正常活动后再进行下一项目。

实验结果图:。