肉眼判断是否 >10% 肿瘤组织
Step 4 报告的解读
Step 2 DNA的抽提
DNA样本制备 DNA 纯化
DNA 定量
Step立PCR反应体 系
组织及细胞学标本的处理-需要临床科室的协助与配合
• 组织学标本
➢固定要及时，离体后即时处理 （15-30分钟内)
➢固定液：10% 中性缓冲福尔马林 （终浓度 4%）；固定液的量一般 为组织体积的10-15倍中.国原发性肺癌诊疗规范2016版
病理肿瘤细胞含量评估对于 EGFR突变结果影响较大，检测 流程如果没有该步骤，会造成 较多的假阴性。
血液检测的价值与优势
作为无法获取组织标本 的补充，无创取样后的 检测结果指导临床用药
Vari S, et al. Expert Opin Drug Discov 2013; 8(11):1381-1397.
多部权威指南强调治疗前的EGFR突变检测
ASCO2015指南： 考虑用EGFR TKI进行一线治疗的非小细胞肺癌患 者应该进行肿瘤EGFR突变检测来确定适合一线使 用EGFR TKI还是一线使用化疗药物治疗。
ESMO2015指南： •进行个体化治疗决定前应有足够的组织材料进 行组织学诊断和分子检测 •在疾病进展时应考虑重新检测 •应当系统分析EGFR突变状态——在晚期非小细 胞肺癌患者组织中进行标准检测A].
NCCN2016指南： 对晚期非鳞NSCLC及不吸烟/小标本鳞癌的治疗 强调了治疗前必须检测EGFR/ALK，并指出 “多 重/下一代测序项目应该包含这2个靶点的检测”
非小细胞肺癌EGFR基因突变检测
实用文档
主要内容
➢ EGFR检测的背景及意义 ➢ EGFR检测的标本类型 ➢ EGFR检测的临床开展及成功关键
实用文档
肺癌精准医学是精确诊断与靶向治疗的结合
精确诊断
靶向治疗
分子靶点 EGFR ALK
Met
FGFR1 HER-2 RET/ROS融合基因
RAS/MAPK通路
+
质量控制
+
+
-
对于组织和胸水都取不到的患者，血液样本是一个很好的补充
Pirker R et al. J Thorac Oncol 2010;5:1706–1713; Savic S et al. Br J Cancer 2008; 98:154–160; Rekhtman N et al. J Thorac Oncol 2011;6:451–458; Tanaka T et al. Cancer Sci 2007;98:246–252;
中国原发性肺癌诊疗规范（2016版） 在推荐所有NSCLC患者的肿瘤组织都应进行EGFR 基因突变检测基础上，补充了如果肿瘤标本不可评 估可使用从血液（血浆）标本中获得的ctDNA进行 实评用文估档.
EGFR基因突变和EGFR靶向治疗
中国肺腺癌驱动基因突变图谱
NSCLC中药物疗效相关的EGFR突变
83% vs 36% 58% vs 15% 61% vs 22% 67% vs 23%
中位PFS 9.8 vs 6.4 月 8.4 vs 6.7 月 9.6 vs 6.6月 10.8 vs 5.4 月 13.1 vs 4.6 月 9.7 vs 5.2 月 11.1 vs 6.9 月 11.0 vs5.6 月
突变类型
所占比例 对EGFR-TKI敏感性
19 del; L858R
~90%
敏感
G719X; L861Q; S768I ~7%
亚敏感
T790M alone; 20 ins
~3%
不敏感
实用文档
NCCN Guidelines Version 3.2016 Non-Small Cell Lung Cancer Mok et al., 2008;Kim et al., 2008;Hirsch et al., 2006
组织/细胞学检测是目前的金标准
目前的低送检率源于：
1. 医生观念 2. 经济因素 3. 约20%患者无组织标本
目前国内送检以组织和细胞学标本为主， 组织/细胞学检测仍是目前的金标准
From AZ 2015 internal data
组织检测基本流程
Step 1 标本病理质控
H&E 染色 & 确定肿瘤组织
阿法替尼
克唑替尼, AP 26113, ASP 3026
Trametinib(GSK1120212)， Pimastertib，Refametinib, TAK733……
BEZ235, XL-765……
Nivolumab,MPDL3280A
Ganetespib
实用文档
Li TH, et al. J Clin Oncol 2013; 31:1039-1049.
EGFR检测样本来源
组织活检 （肿瘤蜡片）
细胞学标本 （恶性胸水）
血液标本 （ctDNA）
目前检测金标准
侵入性
+
样本品质和 肿瘤细胞含量可能比
组织样本较低
+
当无法获取组织或 细胞学样本的晚期转 移患者，作为有效补
充
DNA 片段化/ 假阴性较多， 需要高敏感度技术
-
每个病人 都适用
-
-
+
动态检测
-
-
病理评估和质控对于基因检测至关重要-
为什么EGFR检测要在 病理科开展？
标本接收
组织处理、蜡块和 H&E染色切片制作
病理质量控制
质量达标
EGFR 基因突变 检测
质量不达标
无EGFR 基因 突变检测
蜡块
标记肿瘤细胞比例高的区域 刮取标记以内的区域
未染色切片
H&E 染色切片
肿瘤细胞含量评估对于EGFR结果判读影响
八项随机研究奠定了TKI在EGFR基因突 变阳性患者中一线治疗的地位
研究 IPASS First-SIGNAL WJTOG 3405 NEJGSG002 OPTIMAL EURTAC LUX-LUNG 3 LUX-LUNG 6
RR 71.2% vs 47.3% 84.6% vs 37.5% 62.1% vs 32.2% 73.7% vs 30.7%
PI3K/PTEN/AKT PD-1/PDL-1 HSP 90 …..
药物
吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼、阿法 替尼、CO-1686, AZD9291
克唑替尼、Alectinib
Tivantinib(ARQ197), Onartuzumab(MetMab) Cabozantinib(XL184)
Nintedanib, XL999