DNA连接酶
质粒
D
DNA连接酶
限制性内切酶
接受目的基因的生物
3、以下有关基因工程的叙述，正确的是
（
）
A、基因工程是细胞水平上的生物工程
B 、基因工程的产物对人类都是有益的
C、基因工程产生的变异属于人工诱变
D、基因工程育种的优点之一是目的性强
4、下列关于限制酶的说法不正确的是
（
）
A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布
和
（二）基因工程的基本工具：
限制性内切酶
来源：主要从
中分离
功能：能够识别 双链 DNA 分子 的某种特定
中特定部位的两个核苷酸之间的
错位切
切割方式 平 切
， 并使每一条链 断开。
切割后的 DNA 末端
末端 : 在识别序列中心轴线两侧将 DNA两条链分别 切开
DNA 连接酶 （分子缝合针）
末端：在识别序列中心轴线处切开
较项目 不 形成磷酸二酯键 同 的方式 点 是否需要模板
相 同点
DNA聚合酶
DNA连接酶
只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核
是在两个 DNA片段之间形成磷酸二
酸片段上，形成磷酸二酯键
酯键，不能连接单个脱氧核苷酸。
以一条 DNA链为模板，形成一条与模板 链互补的 DNA链
是将 DNA双链上的两个缺口同时连 接起来，因 DNA连接酶不需要模板
3.限制酶在 DNA 的任何部位都能将 DNA 切开吗？
任何一种限制酶都只识别和切断特定的核苷酸序列，这是由限制酶的性质所决定的。 五、随堂检测：
1、下列关于 DNA连接酶的叙述中，正确的是
（
A. DNA 连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键
B. DNA 连接酶连接的是黏性末端两条链主 链上的磷酸和脱氧核糖
C、质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制
D、细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的
（ ）6．科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是
A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性
B．有利于检测目的基因否导入受体细胞
C．增加质粒分子的相对分子质量
D
．便于与外源基因连接
2011 年秋学期高二生物教学案（选修三） （01）
一、课题： DNA 重组技术的基本工具
编写 ：徐洪敏
二、教学目标：
1.DNA 重组技术所需三种基本工具的作用； 2. 基因工程载体需要具备的条件
三、知识预习和导学
（一）、基因工程的概念：又叫
。
①操作环境
（体内、体外） ；②操作对象
③操作水平
④目的：定向改变生物的遗传性状，创造出人类需要的新的
限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别
DNA子中的 GAATTC顺序，切点在 G和 A 之间，这是应
用了酶的
A．酶的高效性 B．酶的专一性 C．酶的多样性 D ．酶的催化活性受外界条件影响
（ ） 2．以下说法正确的是
A．所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列
B．质粒是基因工程中惟一的运载体
C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
（ ） 7．下图是基因工程主要技术环节的一个基本步
骤，这一步需用到的工具是
A．DNA连接酶和解旋酶
B ．DNA聚合酶和限制性核酸内切酶
C．限制性核酸内切酶和 DNA连接酶
D．DNA聚合酶和 RNA聚合酶
（
） 8．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割
DNA 分子上特定的核苷酸碱基序列。下
图为四种限制酶 BamHI，EcoRI ，Hind Ⅲ 以及 Bgl Ⅱ 的辨识序列。 箭头表示每一种限制酶的特定
①两者均为酶，它们的化学本质都是蛋白质。具有酶的基本属性和特点。
③两者都能形成磷酸二酯键
④两者均参与 DNA的复制、逆转录等过程。
2.限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是 6 个碱基还是 4 个碱基，都可以找到一条中心轴线（图
1-1），中
轴线两侧的双链 DNA 上的碱基是反向对称重复排列的。
种类
小型的
。
末端连接
能够
的
衍生物 动植物病毒 运载体使用的目的：①作为运载工具，将目的基因转运到宿主细胞中去。
②是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 四、重难热归纳 1、注意：比较与 DNA有关的酶 （ 1）DNA水解酶：能够将 DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基 （ 2）DNA解旋酶：能够将 DNA或 DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的 氢键。适当的高温（如 94℃）也可使 DNA解旋。
C. DNA 连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖
D. 同一种 DNA连接酶可以切出不同的黏性末端 2、下表关于基因工程中有关基因操作的工具及对应的内容，正确的组合是
()
分子手术刀
分子缝合针
分子运输车
பைடு நூலகம்
） 。
A
限制性内切酶
B
DNA连接酶
DNA连接酶 限制性内切酶
提供目的基因的生物 质粒
C
限制性内切酶
B． RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录
C．一种 DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因
D．胃蛋白酶的最适 PH为 2 左右
（
） 5. 下列关于质粒的叙述，正确的是
A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B、质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状
DNA分子
B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C．不同的限制酶切割 DNA的切点不同
D ．限制酶可用来提取目的基因
5．不属于质粒被选为基因运载体的理由是
（
）
A．能复制
B
．有多个限制酶切点
C．具有标记基因
D ．它是环状 DNA
2011 年秋学期高二生物（选修三）练习（ 01）
（ ）1．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用
功能：将切下来的
拼接成新的 DNA 分子
T4 DNA 连接酶：既能“缝合”双链 DNA 片段互补的
种类
也能“缝合”双链 DNA 的
末端
末端，
运载体 （分子运输车）
E·coli DNA 连接酶：只能将双链片段互补的
能在宿主细胞中
条件： 有一个至多个
，
有特殊的
，便于筛选。
常用的是
。是一种独立于细菌拟核外，
D．基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复
（ ） 3．依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是
A．切断 a 处的酶为限制核酸性内切酶
B．连接 a 处的酶为 DNA连接酶
C．切断 b 处的酶为解旋酶
D．切断 b 处的为限制性内切酶
（
） 4．下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是
A． DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接