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第二章 微生物菌种选育.


担子菌就是人们常说的菇类(mushroom)微生物。
担子菌资源的利用正引起人们的重视,如多糖、 橡胶物质和抗癌药物的研发。
6、藻类(alga)
• 藻类中隶属原核微生物的蓝绿藻是最早的光合放氧生物, 对地球表面从无氧的大气环境变为有氧环境起了巨大的作 用。有不少蓝藻(如鱼腥藻)可以直接固定大气中的氮, 以提高土壤肥力,使作物增产。还有的蓝藻为人们的食品, 如著名的发菜和普通念珠藻(地木耳)、螺旋藻等。 • 用藻类将CO2转变为石油,培养单胞藻或其他藻类而获得 石油,可占细胞干重的5%~50%,合成的油与重油相同, 加工后可转变成汽油、煤油和其他产品。
2、酵母菌
——毕赤酵母属(Pichia)
此菌分解糖的能力弱,不产生酒精。能氧化酒精, 能耐高或较高浓度酒精。常使酒类和酱油产生白 花,形成浮膜,为酿造工业中的有害菌,如粉状 毕赤氏酵母。 但其中的甲醇毕赤酵母却应用在基因工程菌中, 用以表达基因工程蛋白。
3、工业上常用的霉菌
——曲霉属(Aspergillus)
• • • • • • 1、细菌 2、酵母菌 3、霉菌 4、放线菌 5、担子菌 6、藻类
1、细菌类
2、酵母菌
——酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
酿酒酵母的应用: 传统的发酵行业,如啤酒、白酒、果酒、酒精、药用酵母片以及制 造面包等,所以又称为酿酒酵母
近年来,提取核酸、麦角固醇、细胞色素C、凝血质和辅酶A等。由 于酵母菌体内的维生素、蛋白质含量较高,食用安全,所以啤酒酵 母作为一种单细胞蛋白(SCP)可作食用、药用和饲料用酵母。它的转 化酶可用于转化蔗糖,制造酒心巧克力。在维生素的微生物法测定 中,啤酒酵母常被用于测定生物素、泛酸、硫胺素、肌醇等的含量。
是单产高的营养缺陷型突变菌株或调节突变菌株或野生菌株,最 好还是抗噬菌体能力强的菌株
菌种纯粹,不易变异退化,以保证稳定性
菌种不是病原菌,不产生任何有害的生物活性物质和毒素(包括 抗生素、激素、毒素等),以保证安全
类型:包括细菌、酵母菌、霉菌和放线菌等类群,还有担子菌及藻类等
一、工业发酵常见的微生物种类
采用涂布法和影印平 板法,取分离的单菌 落进行鉴定和小型发 酵试验
本章主要内容
• 第一节 微生物发酵工业的菌种类型及来源 • 第二节 微生物发酵高产菌种选育
自然选育 诱变育种 杂交育种 原生质体融合 基因工程育种
• 第三节 菌种的退化和菌种保藏
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1、诱变育种
• 定义:诱变育种是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的 微生物细胞群,促使其突变率大幅提高,然后采用简便、 快速和高效的筛选方法,从中挑选少数符合育种目标的突 变株用于生产和研究。诱变育种除能提高产量外,还可达 到改善产品质量、扩大品种和简化生产工艺的目的,该方 法简单、快速、收效显著仍被广泛采用。 • 原理:染色体畸变和基因突变两大类。 • 诱变剂:能够提高生物突变频率,扩大变异幅度的物质。 包括物理、化学诱变剂及生物诱变因子。 物理诱变剂:射线如紫外线、X-射线、γ-射线、快中子。 使用最方便且安全的是紫外线。 化学诱变剂:碱基类似物、与碱基反应的物质。使用最多、 最有效的是烷化剂。 生物诱变剂:噬菌体、转座子。
土样的采集方法
使预被分解的物质成为唯一的碳源或氮源 pH7.0~7.5适于细菌和放线菌,pH4.5 ~6适于霉 菌和酵母 40℃利于放线菌孢子萌发,却不利于细菌生长 限制通入氧气使厌氧菌数量增加
采用平板划线法和稀 通过压力(高温、高压、抗生素)使非目的的 释法,以时间为变量, 类群比例减少 进行纯种分离
主要涉及种: 黑根霉、华根霉、 米根霉
3、工业上常用的霉菌
——毛霉属(Mucor)
毛霉的主要用途: 腐乳、酱油、豆豉,转化甾族化合物
4、放线菌
• 是一类G+菌、单细胞、丝状多核分支的、以孢子形式繁 殖的、陆生性很强的原核微生物。
显微镜下的放线菌
放线菌菌落形态
用于生产抗生素的放线菌
5、担子菌(basidiomycetes)
从一些发酵制品中分离目的菌株,如酒醪中 分离淀粉酶或糖化酶的产生菌,从酱油中分 离蛋白酶产生菌,从噬菌体污染的发酵液中 分离抗噬菌体的发酵菌株等。
三、菌种微生物的选择性分离
• 菌株的分离和筛选分为以下几步:
采 样 富 集 分 离 筛 选
各种生境下的土壤是 微生物菌种最全面的 来源 人为控制条件使所期 待的目的菌种占据优 势
本章主要内容
• 第一节 微生物发酵工业的菌种类型及来源 • 第二节 微生物发酵高产菌种选育 • 第三节 菌种的退化和菌种保藏
概述发酵工程菌
来源:自然界(如土壤、 水和空气,以土壤最多) 特点: 培养基原料廉价 发展趋势:野生菌→诱发基因 突变的变异菌→基因重组的定 向育种和代谢控制育种
生长条件易于控制,生长迅速,产量高,酶活高
酱豆
曲霉的主要用途: 食用色素 生产糖化饲料 有机酸、酶制剂是做酱、酿酒、制醋的主要菌种 主要涉及种: 米曲霉、酱油曲霉、黑曲霉
3、工业上常用的霉菌
——青霉属(Penicillium)
青霉的主要用途: 青霉素 葡萄糖酸
3、工业上常用的霉菌
——根霉属(Rhizopus)
根霉的主要用途:
米酒、黄酒
淀粉糖化菌 有机酸 甾体转化
2、酵母菌
——假丝酵母(Candida)
热带假丝酵母
白色假丝酵母
几种酵母的菌落形态
用途:假丝酵母的蛋白质和维生素B含量都比啤酒酵母高。它能以尿素 和硝酸盐作氮源,在培养基中不加其它因子即可生长。它能利用造纸 工业中的亚硫酸废液,也能利用糖蜜、马铃薯淀粉和木材水解液等。 因此能利用假丝酵母来处理工业和农副产品加工业的废弃物,生产可 食用的蛋白质,在综合利用中很有价值。此属中有的菌能转化50%的 糖成为甘油。 假丝酵母也是脂肪酶的生产菌种,在工业上可用于绢纺原料的脱脂。
左图:蓝宝石能源公司 (Sapphire Energy)计 划于2014年在美国-墨西 哥边境以北靠近新墨西 哥的哥伦布小镇建造一 座300英亩的藻场,进行 大规模示范并制造藻油 (algae oils)。
二、工业微生物的来源
各菌种保藏机构 和大型发酵工厂 的菌种保藏室
工业微生物菌种
自然界如土壤、 水、动植物体是 微生物菌种的广 泛来源。在特定 的生境下可以分 离到有特殊能力 的微生物菌株
第二章 微生物菌种选育
• 优良的菌种是发酵工业的基础和关键,是 显著改善和提高产品种类、产量以及质量 的先决条件。 • 菌种选育,就是要利用微生物的遗传变异 的特性,采用各种手段,改变菌种的遗传 性状,使其符合工业生产的需要。
本章主要内容
• 第一节 微生物发酵工业的菌种类型及来源 • 第二节 微生物发酵高产菌种选育 • 第三节 菌种的退化和菌种保藏
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