常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。

LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。

SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。

使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。

SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。

麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。

NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。

TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。

溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。

溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。

溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。

高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。

如果需要，可加热至65℃溶解。

定容终体积至100ml.CTAB沉淀液1%（w/v）CTAB50mmol/L Tris.Cl, pH 8.010mmol/L EDTA, pH8.0PBS缓冲液：十二水磷酸氢二钠15g磷酸二氢钾1g氯化钠40g氯化钾1g定容至5000ml, 调pH至7.2。

ELISA包被液：碳酸钠 1.59g碳酸氢钠 2.93g定容至1000ml，调pH至9.6。

ELISA洗涤液(0.01M PBST)：5000ml PBS中加2.5ml吐温-20显色液（底物溶液-邻苯二胺溶液）：pH5.0 磷酸盐-柠檬酸缓冲液：0.1 M 柠檬酸（19.2 g/L）24.3 ml、0.2 M Na2HPO4 (28.4 g/L) 25.7 ml、临用时取上述溶液10 ml, 加邻苯二胺（OPD）4 mg，溶解后加入30％H2O2 15 µl；终止液：2 M H2SO4TE缓冲液(pH8.0)：Tris·HCl(pH8.0) 10mmol/LEDTA(pH8.0) 1mmol/L高压灭菌。

10% SDS：10g十二烷基硫酸钠溶于90ml水中，加热至68℃溶解，加几滴浓盐酸调pH至7.2，定容至100ml，过滤除菌。

50×TAE缓冲液Tris 242 g冰醋酸57.1 ml0.5 mol/L EDTA(pH8.0) 100 ml用水定容至1000 ml，用时稀释50倍。

5×TBE缓冲液：Tris碱* 54g硼酸27.5ml0.5mol/L EDTA(pH8.0) 20ml加水定容至1000ml，0.5×使用。

6×DNA上样缓冲液：0.25%溴酚蓝*0.25%二甲苯青FF*30%甘油甲醛凝胶加样缓冲液(DEPC处理水配制)：50%甘油1mmol/L EDTA(pH8.0)0.25溴酚蓝*0.25二甲苯青FF*适量溴化乙锭*20×SSC：氯化钠175.3g柠檬酸钠88.2g蒸馏水900ml溶解后用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌保存。

预杂交液：6×SSC5×Denhardt试剂0.5% SDS100ug/ml经变性并断裂成片段的鲑精DNA5×甲醛凝胶电泳缓冲液：0.1mol/L MOPS(pH7.0)*40mmol/L乙酸钠5mmol/L EDTA(pH8.0)*甲醛变性凝胶配方：加入0.7 g琼脂糖到49.7 ml DEPC-H2O中，用煮沸法溶解琼脂糖，待溶液冷却至55℃同时加入7 ml 10×MOPS（0.2 mol/L MOPS pH7.0, 20 m mol/L 乙酸钠，10 m mol/L EDTA pH8.0）电泳缓冲液和13.3 ml甲醛，摇匀，制板待用。

0.5 mol/L磷酸缓冲液（PH 7.2）134 g Na2HPO4, 4 ml 85% H3PO4,用水定容至1L。

探针标记中的逆转录终止液1×TEN40 m mol/L Tris-Cl (PH 7.5),1 m mol/L EDTA (PH 8.0),150 m mol/L NaCl。

洗膜液Ⅰ2×SSC，0.1％（m/V）SDS洗膜液Ⅱ0.1×SSC，0.1％（m/V）SDSSDS-PAGE 电泳分析所用的试剂：30%丙烯酰胺：29g丙烯酰胺和1g N ，N ’亚甲基双丙烯酰胺，加入60ml ddH2O，完全溶解后定容至100ml，过滤，置棕色瓶中备用。

Tris-甘氨酸电泳缓冲液：Tris 3.00g，甘氨酸14.4g，SDS 1g，调pH至8.3，用水定容至1L。

12%分离胶：ddH2O 3.3ml，30%丙烯酰胺4ml，Tris-HCl（pH8.8）2.5ml，10%SDS 0.1ml，10%过硫酸铵0.1ml，TEMED 0.006ml。

5%浓缩胶：ddH2O 1.4ml，30%丙烯酰胺0.33ml，Tris-HCl（pH6.6）0.25ml，10%SDS0.02ml，10%过硫酸铵0.02ml，TEMED 0.002ml。

考马斯亮蓝染色液：乙醇450ml，冰醋酸100ml，ddH2O 450ml，考马斯亮蓝R-250 2.5g。

脱色液（1L）：乙醇450ml，冰醋酸100ml，ddH2O 450ml。

2×上样缓冲液：100mmol/L Tris-HCl（pH6.8），200mmol/L 二硫苏糖醇（DTT），4% SDS，0.2%溴酚蓝，20%甘油。

蛋白纯化所需的缓冲液：Buffer B(pH 8.0)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-ClBuffer C(pH 6.3)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-ClBuffer D(pH 5.9)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-ClBuffer E(pH 4.5)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-Cl电洗脱缓冲液：SDS 0.1-0.5gTris-Base 3g甘氨酸18.8g定容至1000ml蛋白提取缓冲液：Tris-HCl，pH6.8 50mmol/LSDS 4.5%-疏基乙醇尿素7.5% 9mol/L电转移缓冲液：Tris-Base 3.00g，甘氨酸14.4g，SDS 1g，甲醇200ml，调pH至8.3，用水定容至1L。

Western blot所用试剂：1×PBS(pH7.4)：NaCl 8 g，KCl 0.2 g，KH2PO4 0.24 g，Na2HPO4 1.44g，用蒸馏水溶解至1 L1×PBST：5L 1×PBS 中加入2.5ml Tween-20封闭液：100ml PBS缓冲液中加入5克脱脂奶粉植物基本培养基溶液大量元素（1L）七水硫酸镁370mg 磷酸二氢钾170mg 硝酸钾1900mg 硝酸氨1650mg 二水氯化钙440mg 微量元素（1L)硼酸 6.2mg 一水硫酸锰15.6mg 七水硫酸锌8.6mg 二水钼酸钠0.25mg 五水硫酸铜0.025mg 六水氯化钴0.025mg 碘化钾0.83mg 七水硫酸亚铁27.8mg 乙二铵二乙酸二钠37.3mg 有机(1L)盐酸硫胺素0.5mg 盐酸吡哆辛0.5mg 烟酸0.05mg 肌醇100mg MSs培养基10×大量100ml 100×微量10ml 100×铁盐10ml 500×B5有机2ml 6-BA 1mg 蔗糖30g 琼脂0.8% 调PH5.8并加水定容至1LMsr（1L）10×大量元素100ml 100×微量元素10ml 100×Fe盐10ml 500×B5有机2ml 蔗糖3g 葡萄糖7g 琼脂0.8% PH5.8加水定容至1L水稻转化用培养基培养基成分NB(基本培养基) (刘巧泉等,1998) N6大量元素营养液、EDTA-Fe营养液、B5微量元素营养液、B5维生素营养液Nbi(愈伤诱导和继代培养基) NB、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L脯氨酸、0.3g/L水解酪蛋白、30g/L 蔗糖、2mg/L 2,4-D、2.6g/L植物胶，pH5.8高渗培养基Nbi、47g/L山梨醇、47g/L甘露醇，pH5.8NBs(筛选培养基) NB、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L脯氨酸、0.3g/L水解酪蛋白、30g/L蔗糖、2mg/L 2,4-D、40mg/L Hyg(第二次筛选用量为50mg/L)、2.6g/L植物胶，pH5.8MS(再生培养基) MS大量元素营养液、EDTA-Fe营养液、MS微量元素营养液、B5维生素营养液、2g/L水解酪蛋白、30g/L 蔗糖、30g/L 山梨醇、2.0mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、30mg/L Hyg、3.0g/L植物胶，pH5.8NBr(再生培养基) NB、2g/L水解酪蛋白、30g/L 蔗糖、30g/L 山梨醇、2.0mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、30mg/L Hyg、3.0g/L植物胶，pH5.81/2MS(生根培养基) 1/2(MS大量元素营养液+EDTA-Fe营养液+ MS微量元素营养液)、B5维生素营养液、3g/L 蔗糖、7g/L 葡萄糖、40mg/L Hyg、2.6g/L植物胶，pH5.8水稻转化用激素和化合物的配制(1) 2,4-D(1mg/ml)：称取100mg 2,4-D置于小烧杯内，加少量无水乙醇使之完全溶解后，将水缓慢加入不停搅拌的2,4-D酒精溶液中，不可出现沉淀，定容至100ml，过滤除菌。