叶黄素酯压片糖果
—叶黄素二棕榈酸酯的测定
1. 方法提要
采用高效液相色谱对类胡萝卜素组成进行分离与测定，再以分光光度计对总酯含量进行测定，从而计算出类胡萝卜素各组份的含量。

2. 类胡萝卜素组成的测定
2.1.仪器
高效液相色谱：UV检测器；
液相色谱处理机：化学工作站；
色谱柱：4.6mm×250mm×5μm的氰基柱；
进样器：50μl。

2.2.试剂和溶液
正己烷：色谱纯；
二氯甲烷：色谱纯；
N，N-二异丙基乙胺：色谱纯；
异丙醇：色谱纯。

2.3.液相色谱条件
检测波长：450nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温；进样量：20μl；
流动相：正己烷：二氯甲烷=88：12（V/V），加1‰N，N-二异丙基乙胺，3‰异丙醇。

上述色谱条件是典型的，可根据不同仪器特点，对给定的参数作适当的调整，以期获得最佳效果。

采用面积归一化法对叶黄素与玉米黄质组成定量。

2.4.步骤
2.4.1.样品溶液的制备
取100mg样品，加入到100ml圆底烧瓶中，加入30ml异丙醇，再加入2ml氢氧化钾甲醇溶液（0.4g/ml）,在55度水浴中反应30min，在黑暗条件下放置约30min，待样品冷却取1ml用流动相稀释至10ml，过滤，进样。

2.4.2.计算
类胡萝卜素组成X
:
K
A
K
= ×100
X
K
∑A
i
式中：A
—组分k的峰面积
K
—所有组分峰面积之和
∑A
i
3. 类胡萝卜各组份含量的测定
3.1.试剂和溶液
正己烷（AR）；
3.2.仪器
UV-Vis分光光度计；
棕色容量瓶：100ml；
棕色容量瓶：50ml；
移液枪：100-1000 μl；
超声发生器。

3.3.步骤
3.3.1.测定
根据产品含量准确称取样品0.03g（准确值0.0002g）于100ml棕色容量瓶中，用正己烷溶解并定容于100 ml棕色容量瓶中，（初始溶解体积100ml）。

用移液枪移取溶解于50ml棕色容量瓶中，正己烷定容。

稀释倍数为d。

以正己烷为空白，采用分光光度计于445nm测定其吸光度A。

（为了保证较高的准确度，控制溶液的体积使吸光度在0.25和0.75之间）
3.3.2.计算
总酯含量T（%）：
)d×V
(A－A
T=
1394×m
式中：
A—样品的吸光度；
—空白的吸光度；
A
m—样品的质量，g；
V—样品的初始溶解体积，ml；
d—样品的稀释倍数；
1394—吸光系数。

4. 计算：
4.1.叶黄素二棕榈酸酯以质量百分数表示的含量P
1
(%):
P
1=X
1
×T
式中：
P
1
—叶黄素的含量，%；
X
1
—叶黄素液相色谱归一化含量，%；
T—总酯含量，%。

5. 允许差
叶黄素二棕榈酸酯两次平等测定结果之差应不大于1.0%，取其算数平均值作为测定结果。