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2、血浆的综合利用
（4）补体系统蛋白： 补体系统：机体主要防御体系之一，在许 多生物学反应中，如吞噬、调理、趋化和 细胞溶解等，均起重要作用。 补体在自身免疫性疾病及循环免疫复合物 性疾病中，起着损伤机体的作用。 （5）蛋白酶抑制物类：主要有1-抗胰蛋 白酶、 1抗糜蛋白酶（ 1X）、 间胰酶 抑制物、抗凝血酶III等。
（2）氨基酸的分离方法
沉淀法： 溶解度差异分离：依据不同氨基酸在水中或 其他溶剂中的进行分离 特殊试剂沉淀：如用邻二甲苯-4-磺酸与亮氨 酸形成不溶性盐沉淀，再用氨水分解，使 亮氨酸游离出来。 吸附法：利用吸附剂根据氨基酸吸附力的 差异进行氨基酸分离的方法。苯丙氨酸、 酪氨酸、色氨酸的分离就是利用活性碳对 其吸附的原理。
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4、核酸类药物的分离纯化方法
（1）核酸类药物生产方法： ① 提取法：生产DNA和RNA的主要技术是， 先提取核酸和蛋白质复合物，再解离核 酸与蛋白质，然后分离RNA与DNA。 ② 发酵法：主要用于生产单核苷酸。
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（2）白细胞浓缩液： ① 制法：用单采粒细胞技术自供血者血循环 中采集。用过滤法或离心法得到的细胞存 活率均较低。改进的连续离心法可将粒细 胞得率提高一倍。 ② 用途：输注白细胞疗法，一般在肿瘤病人 经细胞药物治疗后，处于骨髓细胞抑制期 间遭受感染且各种抗菌素治疗无效情况下 采用，疗效显著。
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2、血浆的综合利用
血浆蛋白成分： ① 主要成分：Alb和IgG， ② 含量中等的成分：有IgA、IgM、纤维蛋 白原（Fg）、补体C3、转铁蛋白（Tr）、 巨球蛋白（2M）、触珠蛋白（Hp）、 1抗胰蛋白酶（ 1AT），血色素结合 蛋白（HpX）和1-AGP等十种。 ③ 小量和微量成份：百余种的蛋白质和多 肽。
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1、生物药物原料的选择、预处理与保存方法
（2）原料的预处理与保存：
① 动物原料采集后要立即处理，去除结缔组 织、脂肪组织等，并迅速冷冻贮存。
② 植物原料确定后，要择时采集并就地去除 不用的的部分，有用部分保鲜处理，
③ 收集微生物时要及时将菌细胞与培养液分 开，进行保鲜处理。
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3、蛋白质类药物的分离纯化方法
（1）沉淀法： 盐析法、有机溶剂沉淀法、 等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法（如 抗原—抗体）等。 （2）按分子大小分离的方法： 有超滤法和 透析法（即膜分离法）、凝胶层析法、超 速离心法等。其中膜分离法可用于生物大 分子的浓缩、分级和脱盐。
5、糖类药物的分离纯化方法
（1）提取方法
① 非降解法：适用于从含一种粘多糖的动物组 织中提取粘多糖，提取采用的溶剂是水或盐 溶液。 ② 降解法：适用于从组织中提取结合比较牢固 的粘多糖。例： 软骨中硫酸软骨素分离提取：碱处理法。 蛋白多糖提取：酶处理法
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6、脂类药物的分离纯化方法
（1）提取方法： ① 存在方式：脂类自然状态下是以结合形 式存在的。非极性脂是与其他脂质分子 或蛋白分子的疏水区相结合的。 ② 提取原则：选择适当的溶剂破坏结合键， 将脂质溶解出来。 ③ 常用的溶剂：为组合溶剂，醇是其中的 主要成分，此外还有氯仿、甲醇、水等。
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1、生物药物原料的选择、预处理与保存方法 （3）原料的保存方法主要有： ① 冷冻法：该法适用于所有生物原料。常 用-40℃速冻。 ② 有机溶剂脱水法：常用的有机溶剂是丙 酮。该法适用于原料少而价值高、有机 溶剂对活性物质没有破坏作用的原料， 如脑垂体等。 ③ 防腐剂保鲜：常用乙醇、苯酚等。该法 适用于液体原料，如发酵液、提取液等。
第二章 生物制备概述
贡成良
一、生物药物的提取
生物药物的提取与分离方法因为原材料、药 物的种类和性质不同而有很大差异。 1) 生物药物原料的选择、预处理与保存方法； 2) 生物药物的提取； ① 蛋白质类药物的分离纯化方法； ② 核酸类药物的分离纯化； ③ 糖类药物的分离纯化方法； ④ 脂类药物的分离纯化方法； ⑤ 氨基酸类药物的分离纯化方法。
5、糖类药物的分离纯化方法
（2）分离方法 ① 乙醇沉淀法：是从提取液中沉淀多糖最 简易方法，也适用于分级分离。4~5倍 体积的乙醇可以使任何结缔组织中的粘 多糖完全沉淀。 ② 离子交换层析法：粘多糖的聚阴离子能 够很快地被阴离子交换剂吸附和分离， 如Dowex I-X2离子交换树脂、DEAE-离 子交换纤维素等。洗脱可用NaCl溶液进 行梯度洗脱。
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2、生物药物的提取
（1）破碎方法 ① 磨切法：使用的设备有组织捣碎机、胶 体磨、匀浆器、匀质机、球磨机、乳钵 等； ② 压力法：有加压和减压两种； ③ 反复冻融法：设备简便，活性保持好， 用时较长； ④ 超声波振荡破碎法：该法破碎效果较好， 对活性有损失； ⑤ 自溶法或酶解法：用得较少。
1、人血液制品： ① 全血制品 ② 血液成分制品 红细胞 白细胞 血小板 血浆 ③ 血浆成分制品 ④ 体液细胞内成分制品等。
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（一）人体来源药物的特点与研究意义
(1)红细胞制剂：
① 压积红细胞 ② 少含白细胞的压积红细胞 ③ 冰冻贮藏红细胞 用途：凡在需要提高血液携氧能力和补充血 红蛋白，而又不需要补充维持血容量的场 合
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6、脂类药物的分离纯化方法
（2）纯化方法：
① 沉淀法：由于不同脂质在丙酮中溶解度不同， 故常用它进行沉淀； ② 吸附层析法：常用吸附剂有硅胶、氧化铝等。 它是通过极性和离子力等把各种化合物结合 到固体吸附剂上。洗脱一般用极性逐渐增大 的洗脱液来进行，非极性的先流出； ③ 离子交换层析法：脂质分子的存在有非解离、 两性离子和酸式解离三种状态，根据它们在 一定pH条件下解离情况，选择适当的离子交 换剂可将它们提纯，如TEAE-纤维素对分离 脂肪酸和胆汁酸等特别有效。
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2、血浆的综合利用
血浆基本情况 项目
血浆占人体体重的量 含量（%） 8 50 92
血浆占全血的量 血浆中水分占血浆的量 6~7 血浆中蛋白质占血浆的量 白蛋白+IgG占血浆总蛋白的量 65 IgA+IgM+Fg+Tr+1AT+Hpx+ 1AG占血浆总蛋白 25 的量 10 其它百余种微量蛋白成分占血浆总蛋白的量
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（4）新鲜冰冻血浆（FFP） ① 制法：FFP产品规定自采血到血浆冰冻 的时间不超过8小时，在-30℃以下保存。 ② 优越性：有效地保存血浆中各种生物活 性成分的功能。 ③ 用途：FFP可在许多临床疾病中使用， 包括先天性或获得性凝血因子缺乏症、 免疫球蛋白缺乏症等。
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（2）氨基酸的分离方法
离子交换法： 氨基酸是两性电解质，在一定pH条件下， 不同氨基酸带电性质及解离状态是不同 的，因此在离子交换剂上被吸附的强度 不同。 常用的离子交换剂为强酸型阳离子交换 树脂，洗脱主要用pH梯度洗脱。
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4、人类来源的其它原料的利用
① 人胎盘的应用：人胎盘丙种球蛋白、人胎 盘白蛋白、人胎盘RNA酶抑制剂、绒膜促 性激素（HCG）和绒膜促乳激素（HCS） 等。 ② 人尿的综合利用： 男性尿液：制备尿激酶、激肽释放酶、尿 抑胃素、蛋白酶抑制剂、睡眠因子、集落 刺激因子（CSF）和表皮生长因子（EGF） 等。 妊娠妇女与绝经期妇女的尿液：制备HCG 等。
（一）人体来源药物的特点与研究意义
2、研究意义 ① 资源的有限性：人体来源是有限的； ② 意义：从药学角度研究清楚人体来源的结 构和功能，对于利用现代生物技术生产药 物具有重大意义，如胰岛素的生产。
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（一）人体来源药物的特点与研究意义 （二）人体来源药物的种类与用途
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3、人体液细胞中的活性物质
① 人体液细胞：包括红细胞、白细胞、 淋巴细胞、血小板、成纤维细胞等。 ② 细胞内的生物活性物质：用人体液 细胞生产的活性物质主要有干扰素、 白细胞介素、SOD等少数几个品种。
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二、 人体来源的药物
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（一）人体来源药物的特点与研究意义 1、人体来源的生物药物特点
① 安全性好 ② 效价高，疗效可靠 ③ 稳定性好：冻干试剂，10℃以下可保存 2年以上。
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（3）血小板制剂： ① 制法：血小板的分离和使用在国外已经 比较普遍，中国尚未推广使用。 ② 用途：血小板制剂的适应病症为白血病、 淋巴瘤及其他肿瘤因治疗而导致的骨髓 抑制症状。 ③ 注意：人体输注血小板往往会产生抗体， 还会引起短期的粒细胞减少。
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