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艾滋病常用实验室检测及临床意义分析课件
HIV病原体诊断
HIV抗体检测 艾滋病病毒抗原检测(P24) HIV核酸检测 病毒分离
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
检测样品
血清、血浆 尿液 抗凝全血(CBC、CD4、VL…) PBMC(外周血淋巴细胞)
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
样品的采集和处理
一、样品的采集 最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血(抗凝
HIV抗体检测的方法
筛查试验(包括初筛和复检):酶联免疫吸附试验( ELISA)、化学发光试验、明胶颗粒凝聚试验(PA)、免疫 渗滤试验、免疫层析试验等
确证试验:免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验、放射免 疫沉淀试验、免疫荧光试验等。
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
艾滋病抗体确证试验
免疫印迹法(WB)为目前最常用的HIV抗体确认方法 ,被公认为判断HIV感染的黄金方法。
HIV RNA
HIV antibodies
检测域
HIV p24 antigen
暴露
天数
窗口期
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感染HIV后病毒载量、CD4与病程变化规律
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艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
中国HIV实验室网络
国家艾滋病参比实验室 艾滋病确认中心实验室 艾滋病确认实验室 艾滋病筛查中心实验室 艾滋病筛查实验室 艾滋病检测点
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HIV抗体检测结果及结论
HIV抗体筛查结果阴性反应可做HIV抗体阴性报告, 筛查试验呈阳性反应,可出具“HIV抗体待复查”报告, 不能出HIV抗体阳性报告。筛查阳性反应或可疑阳性反应 不能作最终报告通知被检测者,对个体诊断来说,只有经 过确证试验,结果阳性才可做HIV抗体阳性报告。
发病期
HIV抗体+
有症状 艾滋病
1年
0.5-2年
感
抗
染
体
成
转
功
阳
窗口期
出 现 症 状
艾滋病感染者 艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
诊
死
断
亡
艾
滋
病
艾滋病患者
急性感染期
1
2
3
4
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KINETICS OF VIRALHMIVA感R染KE后R血S 液DU中R核IN酸G、P抗R原IM和AR抗Y体H动IV态-1变IN化FECTION
艾滋病常用实验室检测 及临床意义分析
广西疾病预防控制中心
2013.4
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
主要内容
HIV抗体检测 CD4检测 病毒载量检测 实验室安全防护
艾滋病常用后的自然发展过程
急性感 染期
HIV抗体-
- 4-8周-
潜伏期
HIV抗体+ 无症状 2-10 年
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HIV抗体检测的目的
诊断
➢ 确定个体HIV感染状况,包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要 进行的体检等。
血液筛查
➢ 防止输血传播HIV,包括献血员筛查和原料血浆筛查。
监测
➢ 了解不同人群HIV感染率及其变化趋势,包括各类高危人群、重点人群 和一般人群。
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(一)抗体检测实验室间传递的样品应为血清或血浆,血 液常规、CD4和病毒载量等要求送抗凝血。样品应置于带 盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号 或受检者姓名、种类和采集时间。
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(二)将试管放入专用带盖的容器内,容器的材料要易于 消毒处理。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎 。如果路程较远或气候炎热,应在2-8℃条件下运送。抗 凝血和抗体检测样品路程短可常温送检。包装内需附有送 检单。 (三)特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以用特快 专递形式投寄,但必须将盛样品的试管包扎好,保证不会 破碎和溢漏。
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三、样品的接收
(一)含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备 的实验室内由经过培训的工作人员打开,用后的包裹应进 行消毒。 (二)核对标本与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。 (三)检查样品的状况,记录有无严重溶血、微生物污染、 血脂过多以及黄疸等情况。 (四)因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光 方法测试。
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血)。 唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用样品的采
集方法如下: (一)采集样品应按临床采血技术规范及检测试剂盒要 求进行。 (二)采集标本时应注意安全,操作应戴双层手套。建 议采用真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液。
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(三)血清样品采集:用注射器抽静脉血3-5ml,室温放置 1-2小时,待血液凝固或用3000rpm离心15分钟,吸出血清备 用。 (四)抗凝血样品采集(免疫功能CD4/CD8测定、血液常规 CBC测定、病毒载量):用加有抗凝剂(K3EDTA)的真空采血 管或试管抽取静脉血,反复轻摇,常温6小时以内送达实验 室检测CD4/CD8或CBC后,再分离血浆和血细胞备用。
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(五)血清或血浆样品应存放于-20℃, 短期内( 1周)进行检测的样品可存放于2-8℃。
(六)用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应 冻存于-20℃以下,进行病毒 RNA检测的样品如长期( 3个月以上)保存应置于-80℃。
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二、样品的运送
中国CDC性艾中心 省、市 省、市 省、市、州、县 省、市、州、县 乡、镇
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HIV实验室条件
人员:经过专门技术培训,取得培训合格证/上岗证; 环境:功能分区,符合生物安全二级要求; 仪器设备:按要求配备,满足检测要求。
实验室必须经过资质认证/验收!
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艾滋病抗体检测试剂使用条件
HIV筛查或确认试剂必须是HIV/1+2混合型,国家卫生 部批准或注册,经过国家医药监督管理局批批检合格,临 床试剂评估优良,并且在有效期内。
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检测要点
1、严格按照试剂说明书操作,不得擅自更改。 2、注意防止交叉污染。 3、严格遵守实验室操作规程。 4、认真做好实验记录。