四、骨
架和 细胞 分裂
1、酵母菌内SPB 和微管动力学 2、酵母菌中肌动蛋白的动力 3、果蝇中MEI-S332蛋白 4、网丙菌属细胞骨架动力，细 胞运动，趋化作用，细胞骨架 动力，细胞动力
网丙菌属中细胞骨架 动力和细胞运动.gif
12
五、 在其 他方 面的 应用
1、在肿瘤发病机制研究 中的应用 2、在信号转导中的应用 3、在生物防治中的应用 4、在生态学中的应用 5、目的基因的功能研究 6、作为报告基因构建基 因工程载体 7、神经生物学等
•⑥增加荧光强度和热稳定性，促进了生色 团的折叠，其荧光特性也得到了改善。 •因为GFP分子质量小，能够在异源细胞中稳 定表达并发射荧光，不需要任何辅助因子参 加，对细胞没有毒性，因而将会得到广泛应 用。随着人们对GFP的基础理论研究的进一 步深入和新型突变体的不断出现，有理由相 信GFP将会绿色荧光蛋白（GFP）
—21世纪的显微镜
绿色萤光蛋白 (green fluorescent protein)
基本介绍
GFP性质
GFP应用
应用前景
3
基本介绍
• 绿色荧光蛋白(green fluor escent protein)，简称GFP， 是一种化学性能稳定的小分 子蛋白质（分子质量为26kD a，由238个氨基酸构成 ） 在蓝色波长范围的光线激发 下，会发出绿色萤光 • 1962年由下村修等人，在维 多利亚多管水母（Aequorea vi 囊运输
三 、 发 育 生 物 学
1、用GFP显示小囊运输 2、用GFP观察TGN运输 3、细胞骨架动力学和胞内运输
1、用GFP观察线虫的神经发育 2、分析果蝇神经发育的不对称性细胞 分裂 3、用GFP观察网丙菌属的形态发生学 4、 GFP在小鼠发育中的标记方法
这是基因枪转化24小时后表达绿色 荧光蛋白的洋葱细胞.可以清楚地看 到细胞骨架和细胞内的物质运输.flv
返回
13
1997年7月日本大阪大学的科研人员 首次培育出能够夜里发光的含有绿色 荧光蛋白的老鼠
左侧的猫由韩国研究人员2007年晚些时 候打造，能够在紫外线下发出红光。某些 情况下，这些荧光蛋白基因可用作一种分 子开关，触发其它细胞活动。
法国实验室诞生的荧光兔“阿尔巴”(Alba)
随着病毒在宿主体内不断扩散，你就可以 通过跟踪发出的绿光来观察病毒的扩散途 径，或者你把它接合到一种蛋白质上并通 过显微镜观察它在细胞内部的移动
• 具对C. elegans进行研究， 它可以作为变化的绿色信 号对线虫不同细胞间的活 动进行示踪观察。沙尔菲 教授的研究证实了作为发 光的遗传标签的GFP在研 究各种生物现象时的巨大 作用。至此，生物医学研 究的一场“绿色革命”揭 开了序幕。 •1994年当沙尔菲教 授得知GFP后，他意 识到可以使用这一工
GFP的应用
1、分子标记 一、生物 技术中的 应用研究 2、药物筛选
绿色荧光蛋白 定位原理.flv
3、融合抗体
4、生物传感器
8
GFP 标 记 的 微 管 c 为 药 物 筛 选 的 GFP
分 子 标 记
药 物 筛 选
融 合 抗 体
线 粒 体 中 表 达 的
GFP
GFP
10
生 物 传 感 器
究 中在 的植 应物 用研
一雌一雄两只转基因猕猴，全身携带绿 色荧光蛋白，在紫外线照射下呈现绿色
返 回
应用前景
• 因为GFP具有以下优点：①荧光稳定；②检 测方便；③无种属特异性，也没有细胞种类 和位置的限制；④GFP对受体细胞基本无毒 害；⑤不受假阳性干扰；⑥不需任何反应底 物和辅助因子；⑦可制成永久标本；⑧灵敏 度高，但仍有一些不足。 • 现在通过以下几个途径改良GFP：①更换GFP 生色团氨基酸；②改变碱基组成； ③除去G FP基因中隐蔽剪接位点；④插入植物内含子； ⑤更换强启动子等突变体GFP；
转到
GFP的性质
• GFP荧光极其稳定, 抗光漂白能力比荧光素 强，GFP融合蛋白的荧光灵敏度远比荧光素 标记的荧光抗体高。 • GFP需要在氧化状态下产生荧光，强还原剂 能使GFP转变为非荧光形式，但一旦重新暴 露在空气或氧气中，GFP荧光便立即得到恢 复。而一些弱还原剂并不影响GFP荧光。中 度氧化剂对GFP荧光影响也不大。 • 由于GFP荧光是生物细胞的自主功能，荧光 的产生不需要任何外源反应底物，因此GFP 作为一种广泛应用的活体报告蛋白，其作用 是任何其它酶类报告蛋白无法比拟的。
2000年10 月2日诞生 于，美国俄 勒冈保健科 学大学的 “安迪” （Andi）
2009年5月27日，日本研究人员宣布培育出 了一种转基因绒猴，这种猴的发根、皮肤和 血液在特定光线照射下都会发出荧光，且该 特性能遗传给下一代。这是世界上第一批可 以复制人类疾病并且会发光的转基因灵长类 动物。
• 1994年，钱永健教授开始研 究并改造GFP，并获得了多项 发现。世界上用的大多数是 他们实验室改造后的变种。 钱永健教授对GFP的研究，对 人们理解GFP及GFP族的化学 荧光特性做出了重要的贡献， 同时得到了红色、黄绿色、 蓝色等多种颜色的荧光蛋白， 大大拓宽了GFP研究的领域。 从而使科学家能够对各种蛋 白和细胞施以不同的颜色， 这使科学家可以在同一时刻 跟踪到多个不同的生物学过 程使之成为极有效的研究动 态生命过程的基因标记工具。