分子生物学课件第18讲
University
2,第二阶段的基因表达 3,晚期基因表达
分子生物学课件第18讲二、枯草Leabharlann 菌中σ亚基的更迭Nanjing
Universit(y 一)枯草杆菌噬菌体SPO1早、 中晚期基因表达的转换
1,SPO1生活史 (1)早期 (2)中期 (3)晚期
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2,SPO1早、中、晚期基因表达过
2,T7噬菌体RNA聚合酶识别的启
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University 动子(表8-6) (1) T7噬菌体RNA聚合酶识别 的序列 (2) T7噬菌体的弱启动子 (3) T7噬菌体的强启动子
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(三)T Nanjing
7
噬菌体基因表达的调控
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1,早期转录产物I的形成
(1)可能由于基因3.5产物的作 用,这个阶段转录水平下降 (2)只有第III类强启动子才能 起始转录
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三、噬菌体早、晚期基因转录以及
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University 裂解生长和溶原生长的调控
(一)噬菌体基因表达的特点 1,对寄主RNA聚合酶的依赖性 2,有多种调控因子 3,功能相关的基因聚集形成4个 操纵元
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第五节 University 基因表达的时序调控
•时序调控:
•基因转录时序调控的必要性 •基因转录时序调控的方式
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一、噬菌体基因表达特点概述
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University(一)噬菌体基因组构成 1,基因构成 (1)转录和翻译所必需的基因
(2)DNA复制相关基因
(3)噬菌体颗粒结构和装配相 关基因
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2,遗传图谱的特点
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Universi(ty 二)溶菌周期的分期 1,早期感染(early infection) 2,晚期感染(late infection)
(三)噬菌体基因表达的级联式控 制
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1,第一阶段的基因表达 Nanjing
力 • OL1 > OL2 > OL3 • OR1 > OR2 > OR3
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(2)功能
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•可以迅速占领两个早期操 纵元的操作子,关闭早期 操纵元,使噬菌体进入溶 原生长状态
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Nanjing •对其自身的启动子PM有正 University (低浓度时)、负(高浓
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•溶菌生长的晚期,Cro蛋白占据两
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University 个早期操纵元的操作子,关闭其 转录。此时噬菌体已经产生了足 够的与DNA复制有关的蛋白质(O, P)和抗终止因子Q。从而使晚期 基因得以表达
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2,CI蛋白 (1)与操作子结合的亲和
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程中σ亚基的替换(图8-16)
(1)含σ55的RNA聚合酶全酶负责
早期基因的转录
(2)含gp28的RNA聚合酶全酶负责
中期基因的转录
(3)以gp33-gp34为σ亚基的RNA聚 合酶全酶负责晚期基因的转录
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Nanjing (二)枯草杆菌子孢子生成过
度时)两种调控作用 (3)cI基因的突变效应 •不能建立和维持溶原状态
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(四) CII蛋白和CIII蛋白
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University 1,CII蛋白 (1)CII蛋白的特点 A,以寡聚体形式起作用 B,促进启动子PE、PI和PaQ的转 录
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Nanjing •促进从启动子PE (在cro基因
(1)寄主RNA合成体系负责转 录早期基因
(2)重要的早期基因
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2,第Ⅱ组基因的表达 Nanjing
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(1)基因2 (2) 3.5基因产物 (3)T7 噬菌体对寄主RNA合 成体系的接管
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3,第Ⅲ类启动子的转录
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和cII基因之间)转录cI基因 •促进从启动子PI转录整合酶基 因 •促进位于Q基因内部的启动子 PaQ转录,阻遏Q基因的表达
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Nanjing (2)CII蛋白调控的启动子的特点
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•没有典型的-10和-35序列 •有CII蛋白结合位点:位于-35序列 两侧,具有四碱基对正向重复序列 TTGCNNNNNNTTGC
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Nanjing •CY突变体:有一类是由于PE
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启动子中的CII蛋白结合位 点突变,造成CII蛋白不能 结合, 噬菌体不能建立溶 原状态
(三) 噬菌体的阻遏蛋白及其
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作用 University 1,Cro蛋白 (1)与操作子结合的亲和力 •OL3 > OL2 >OL1 • OR3 > OR2 > OR1
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Nanjing (2)功能
University
•溶 菌 生 长 的 初 期 , Cro 蛋 白 先与OR3结合,关闭cI基因的活 性,同时允许两个早期操纵 元的转录
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程中σ亚基的替换
1,枯草杆菌不同生长时期σ亚基 的替换 2,不同σ亚基识别不同的启动子 3,不同σ亚基的作用机制
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二、
Nanjing
T7
噬
菌体
生
长
过
程
中
用
噬
菌
体 University RNA聚合酶代替寄主的RNA聚
合酶
(一)T7 噬菌体概况 1,T7噬菌体的特点 2,T7 噬菌体生长周期
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(1)早期左向操纵子 (2)早期右向操纵子 (3)晚期操纵子 (4)阻遏蛋白操纵子
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(二)噬菌体的早、晚期
Nanjing
University 基因的表达(图6-17) 1,极早期基因 2,迟早期基因 3,晚期基因
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(二)T7 噬菌体的基因
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University 1, T7 噬菌体基因及其产物 (1)早期及晚期基因(图8-19) (2) T7 噬菌体基因的启动子位 置和终止位点(图8-19) (3)T7噬菌体基因mRNA的合成及 转录后处理(图8-20)
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