薄层色谱法对饮料中色素的测定
实验目的
掌握薄层色谱法对饮料中色素的测定的方法。

实验原理
薄层色谱法又称薄板层析法。

薄层色谱使用涂敷有支持介质硅胶或氧化铝的平
板为支撑体,流动相的移动是依靠毛细作用。

将试样点在层析板的一端,并将该端浸入作为流动相的溶剂(常称之为展开剂中,试样点随着溶剂向上移动。

由于不同物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质也随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,这就使得那些分配系数只有微小差别的物质,在移动速度上产生明显的差别,从而使各组分分离。

通常用比移值R 来标记和比较各斑点的位置,其定义是溶质移动速度与展开剂(流动相的移动速度之比:
实验仪器及药品
1柠檬黄样品
2带有色素的饮料芬达(橙味
3无水乙醇
4层析缸
5玻璃毛细管(直径约 1 mm
6薄层色谱板
实验条件
实验步骤
0.预备:将层析板置于烘箱中,于105℃活化30 min 后,保存于干燥器中备用。

洗
净展开缸,晾干待用
1.点样:
1在离层析板的底端 2 cm 处用铅笔轻画一条线,作为原点线,在顶端2 cm 处也
同样画一条线,作为前沿线。

2用管口平整的毛细管分别吸取少量各色素溶液及饮料,点样
3毛细管垂直地轻轻接触到层析板的原点线上点样,斑点直径约为2~3 mm,间隔约1 cm。

2.层析:
1在层析缸中加入展开剂约30 mL(在缸中液层约厚 1 cm,盖上层析缸盖。

待展
开剂蒸气在层析缸内达到饱和(约15 min
2将点好样的层析板斜搁或近垂直地搁在层析缸中,点有薹样堂一鬻浸于展开剂,点有试样的一端浸于展开剂内。

3.当展开剂上升到前沿线时,取出层析板,晾干,观察有色斑点。

4.观察现象,计算比移值R : f
实验条件
实验数据与现象
黄色带与柠檬黄样品达到同一高度,另有浅黄色低于该高度。

饮料中含有柠檬
黄和另一种未知色素。

备注:由于时间关系,未测定比移值
问题与讨论
(1点样时,原点太大对实验有何影响?
答:展开时会造成各种组分交叉或拖尾。

(2层析缸中展开剂的液面高度若超过原点线,对薄层色谱分析有什么影响?
答:会使原点到层析点之间距离的数据不精准,比移值偏小。

(3若样品本身不能显色,可用什么方法确定各组分在薄层色谱板的位置?答:可以在紫外灯照射下观察。