2、手指皮肤消毒前后微生物的检查 ——络合碘对细菌的作用（示教）
（1）取琼脂平板1个，将底面分成两等份，注明A/B。 （2）用无菌棉签蘸生理盐水，在左手食指头上涂擦。用该指
头在平板A处琼脂表面涂抹，作为消毒前的对照。 （3）用棉签蘸络合碘消毒左手食指。待络合碘干后，依上法
在平板B处琼脂表面涂抹。 （4）置平板于37℃培养18～24h。
2．2个平板均置37℃培养18～24h，观察结果。
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二、理化因素对微生物的影响
（一）消毒灭菌的常用术语:
1、消毒（disinfection）：杀灭物体上或环境中的病原微生 物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 消毒剂（disinfectant）：用以消毒的药品
第2页：记录、分析紫外线杀菌试验的结果。
5、无菌操作(aseptic technique)： 防止细菌及其他微生物进入人体或其他物品的操作技术。
（二） 消毒灭菌的方法 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
干热灭菌法
热力灭菌法 湿热灭菌法
物理方法
辐射杀菌法
紫外线 电离辐射 微波
滤过除菌法
干燥和低温抑菌法等
化学方法
常用的化学消毒剂：乙醇、含碘消毒剂、过氧乙酸、过氧化氢、高 锰酸钾、新洁尔灭等。
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【结果】
平板A处琼脂表面有细菌生长，B处不长细菌或出现 极少的菌落。说明一定浓度的络合碘能杀灭细菌。
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3、抗生素敏感试验（示教）
一种抗生素只对一定种类的生物细胞有拮抗作用，这种作用范 围称抗菌谱。
抗生素的抗菌机制 影响细胞壁的合成； 损伤或破坏细胞膜的结构； 干扰细胞碳水化合物的代谢； 抑制核酸或蛋白质的合成，这些作用都有一定的选择性。
注意事项：
紫外线可损伤皮肤、眼睛，使用时应注意防护。
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三、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应
细菌的新陈代谢
合成代谢 合成代谢产物
热原质 毒素与侵袭性酶 色素 抗生素 细菌素 维生素
分解代谢
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细菌的分解代谢产物和生化反应（示教）
细菌对糖、蛋白质的分解能力的不同，因而 代谢产物各异，利用生物化学方法鉴别不同细菌称 为细菌的生化反应。
2、灭菌（sterilization） ：杀灭物体上所有微生物的方 法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微 生物和非病原微生物。
3、防腐（antisepsis）
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防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 防腐剂（antiseptic）：用以防腐的药物。
4、无菌（asepsis）： 不存在活菌的意思，多是灭菌的结果。
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（a）挑取菌落 （b）转种肉汤 （c）比浊 （d）涂布平板上 （e）放置药敏纸片 （f）量取抑菌圈大小
纸片琼脂扩散法试验程序
观察纸片周围有无抑菌圈，并量出抑菌圈直径大小，得 出待测菌对所试抗生素的敏感性。
4、紫外线杀菌实验 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 （1）原理：
糖发酵试验：
乳糖酶 乳糖
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乳酸
葡萄糖发酵试验：
细菌
葡萄糖
丙酮酸
各种酸类
脱氢酶
甲酸
H2 + CO2
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吲哚试验（Indole test):
色氨酸酶
色氨酸
氨基苯甲醛
玫瑰吲哚
甲基红试验(Methy red test):
细菌 葡萄糖
脱羧 丙酮酸
紫外线
DNA T - T二聚体
波长240～ 300nm，265～ 266nm最强
干扰DNA复制与转录 变异或死亡
（2）特 点
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① 穿透力较弱； ② 仅能杀死细菌的繁殖体，不能杀死细菌的芽胞。
（3）临床应用
仅用于实验室、传染病房、手术室的空气或不耐热物品的表 面消毒。
深蓝
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IMViC试验 大肠杆菌：++ - 产气杆菌：-- + +
作 业 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
实验名称：细菌的新陈代谢和消毒灭菌
第1页：实验内容 一、微生物的分布及理化因素对微生物的影响
1、空气中微生物的检查（示教） 2、手指皮肤消毒前后微生物的检查（示教） 3、紫外线杀菌试验（自做，2人/组） 4、抗生素敏感试验（示教） 二、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应（示教）
乙酰甲基甲醇 （中性）
pH≥5.4 pH≤4.5
桔黄色: 阴性 红 色: 阳性 NhomakorabeaVP试验：
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细菌 葡萄糖
丙酮酸
脱羧
氧化 乙酰甲基甲醇
含胍基化合物
二乙酰
红色的化合物( VP试验阳性)
枸橼酸盐利用试验（Citrate utilizatio)：
枸橼酸盐 铵盐
碳酸盐 氨
溴麝香草酚蓝(淡绿) 碱性
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一、微生物的分布
微生物分布非常广泛。
通过对外界微生物的检查，了解微生物在自然界 中的分布，从而树立“有菌观点”，认识“无菌 操作” 对于微生物学及医学实践的重要性。
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空气中微生物的检查
实验操作步骤： 1．取琼脂平板2个，一个启开皿盖，培养基面向上，放在实验 桌上，30min后盖好皿盖。另1个平板，不启开盖作为对照。
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实验名称：细菌的新陈代谢和消毒灭菌
实验内容：
一、微生物的分布及理化因素对微生物的影响 1、空气中微生物的检查（示教） 2、手指皮肤消毒前后微生物的检查（示教） 3、紫外线杀菌试验（自做，2人/组） 4、抗生素敏感试验（示教）
二、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应（示教）
1、高压蒸汽灭菌法
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103.4kPa（1.05kg/cm2) （121.3℃ ，维持15～20min ）
灭菌效果最好，可杀灭包括细菌芽胞
在内的所用微生物。
常用于一般培养基、生理盐水、手术敷 料等耐高温、耐湿物品的灭菌。
高压蒸汽灭菌器
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