配制固体培养基操作规程
操作顺序
操作内容
操作要求
1
填写培养基成分单
按所用培养基配方及其配制量，准确计算出各种成分母液及琼脂、蔗糖的用量，并按大、微、铁、有、调、琼、糖、pH的顺序，填写在“配制培养基成分单”上。
2
水锅加热
在做培养基专用的不锈钢锅内，加进约为欲配培养基量的70-80%的蒸馏水或软化水（澄清后的凉开水），放在电炉上加热。
19
高压锅排水
打开排水阀，放尽锅内存水，以减少积垢。
说明
一、制定本操作规程的目的是：（1）防止发生差错，提高培养基质量；（2）使配制过程井然有序，省时、省力、节省能源，提高工作效率。
二、制定本操作规程所依据的条件是：（1）一人操作，一次配制8升培养基；（2）用2000W的电炉为水锅加热；（3）所用高压锅是“立式电热压力消毒器”（工作压力：137Kpa），并配有3-6KV的稳压电源控制器，因此，当上述条件有变化时，就应对相关操作顺序和操作要求作必要的调整或变动。
3
高压锅加水
关闭高压锅排水阀，加软化水至安全水位线。
4
称取琼脂、蔗糖
称取前，剪碎干胶条状琼脂，破碎蔗糖结块，须按1%以上的精度准确称量。
5
摆放培养瓶
按预定分装瓶数，将洗净、晾（烘）干的培养瓶，在桌上摆放整齐。
6
量取和混溶母液
把贮存各种所需母液的试剂瓶，按培养基成分单所列顺序摆放整齐，再按配方用量顺序量取各成分母液，并混溶于烧杯中。
12
分装培养基
按不同组培目的所需的每瓶培养基用量，将培养基均匀分装于摆好的培养瓶内。然后在瓶口盖上消毒好的棉塞或封口膜。
13
高压锅加热
关闭进水口及放气阀，打开排气阀，通电加热。
14
培养基（瓶）封口
棉塞上加盖牛皮纸（或直接用封口膜），并用棉线扎紧封口。
15
培养基（瓶）装锅
瓶口向上，略向中心倾斜，瓶口不可贴于锅壁（防止冷凝水进入瓶内）。码放均匀，上方加盖三层牛皮纸吸湿，装锅不可过满，以加盖后不堵塞安全阀和放气阀的孔口为度。
7
加琼脂
当水锅温度达90℃左右时，加进称量好的琼脂，继续加热，不断匀速搅拌，严防糊锅。
8
加蔗糖
待琼脂完全溶化后，撒入蔗糖，不停地搅拌。
9
加母液混溶液
蔗糖溶化后，断电停止加热，边搅拌、边徐徐倒入母液混溶液。
10
加水定容
加蒸馏水（或软化水）至标示欲配培养基量的锅壁记号。
11
调pH值
用精密pH试纸，与比色卡比较：偏酸，滴入1mol/L的NaOH液；偏碱，滴入1mol/L的HCl液，少量多次进行调节，直至合乎
封盖时应按顺时针顺序拧紧固定螺栓。在高压灭菌锅控制面板上选择温度121℃，时间为20分钟，按确认键开始灭菌。
17
培养基（瓶）出锅
当灭菌结束后，高压灭菌锅自动断电，打开锅盖，取出培养基（瓶）。
18
培养基（瓶）存放
将出锅的培养基（瓶）整齐平放于接种室的存放架上，并明确标示其培养对象（种类、品种）、培养目的（诱导、继代、生根）或其它特定用途以及配制日期。