2000年分子生物学专业博士研究生理论课程笔试试题1．进行PCR扩增可使用哪些类型的DNA聚合酶，各有哪些特征？2．有哪些类型的载体可用于构建DNA文库，各有哪些特征？3．在通过生物化学方法分离到某种哺乳动物的一种蛋白活性因子后，若要在E.coli中大量表达该蛋白质，试问如何分离得到编码该蛋白质的基因？4．从原核生物中获得一个新的杀虫基因后，将该基因转移到某一植物，如何检测该转基因植株是否产生该杀虫基因所编码的蛋白质？5．2000年，国际人类基因组合作计划和美国孟山都公司分别宣布，完成了人类和水稻基因组的工作草图（working draft），这两个工作草图的基本含义（如测序完成的大致情况）是什么？6．有人将生物全基因组序列比作“天书”，以你所熟悉的生物为例，谈谈你将如何破译这部“天书”？7．何为“GMO”，目前国际，国内关于“GMO”有何争议？有人认为“公众与新闻媒体的无知”是引起GMO争议的主要原因之一，对此请予以评论。

8．论述染色质结构与状态的变化与基因表达的关系。

9．Crick提出的“中心法则”（central dogma）的意义是什么？至今，分子生物学的发展对“中心法则”有哪些修订和补充？10．何谓“后基因组学”？依托哪些基本的分子生物学理论和原理？2000年分子生物学博士学位理论考试试题1．近年来，国际上关于转基因农作物环境释放和遗传工程食品存在很大的争议，这些争议所关心的主要问题是什么？你对此有何评议？2．试述比较基因组学（comparative genomics）的主要内容及其理论和实际意义。

3．试述功能基因组学（functional genomics）的基本内容。

4．简述从基因组中分离的启动子和终止子，确定基因转录起始位点和终止位点的方法和策略。

5．仅从转录和翻译水平上阐明原核生物与真核生物之间的差别。

6．说明真核生物基因组内重复序列的分子机理。

7．说明两种利用PCR技术实现基因点突变的方法及原理。

8．何谓“gene knock-out”法？原理是什么？2001年分子生物学专业博士笔试试题1．简述人类和拟南芥基因组研究的进展。

2．简述国际上转基因作物的研究和产业化进展，以及有什么争议。

3．简述蛋白质组的概念和蛋白质组研究的目的意义和基本方法。

4．对于用BAC载体克隆到的100Kb基因组片段，如果要测定该片段核苷酸序列，应采用哪些步骤和方法。

5．什么是Southern, Northern, Western杂交，有何用途？6．若欲从哺乳动物中克隆一个编码蛋白质生长因子的基因，并使之在E.coli中表达，说明主工步骤，并简要说明可能遇到的问题及解决的办法（已知该蛋白质生长因子的N-末端氨基酸序列）。

7．什么是RAPD 和AFLP，各有什么用途？8．论述Forward genetics和Reverse genetics进行基因遗传分析的方法与原理。

9．保证染色体稳定遗传的三个顺式作用位点是什么？说明它们的结构与功能。

10. 何谓Parent Imprint ? 说明这一现象的形成原因和生物学意义。

2001年分子生物学专业博士笔试试题1．什么是Southern, Northern, Western杂交，有何用途？2．已知一个BAC克隆，想要测此BAC序列，你将采用哪些步骤和方法？3．已知一个哺乳动物的生长因子，想要分离该基因并在E.coli中表达，设计实验步骤。

4．如何理解蛋白质与蛋白质相互作用，蛋白质与核酸相互作用？5．说明至少三种在转基因育种中用到的分子生物学原理？6．真核生物转录因子的结构特点及功能？7．中心法则的主要含义？中心发则的发展？8．列出三种已测序的真核生物全基因组测序结果（基因组大小，基因数目）。

9．生物信息学的主要内容及主要分析方法？10. 全基因组测序对破译该生物这部天书有何意义？11．何为DNA芯片，蛋白质芯片（芯片内容，制作方法，检测）2002年第二次博士生《生物技术与遗传改良》笔试题1．DNA作为遗传物质的发现过程及实验证据。

2．DNA结构的阐明于上世纪中叶获诺贝尔奖。

请说出该奖项的基本内容（即其所阐明的DNA 基本结构）、获奖人、获奖年份。

试述该发现对生命科学的发展和以重组DNA为基础的现代生物技术产业形成的意义。

3．近年在基因工程技术研究中的一个重要进展是“同源重组”技术（英文常用的术语有：homologous replacement, homologous recombination, gene targeting等）。

请描述此技术的基本内容，评价其技术上的优越性及应用前景。

4．说明比较基因组的研究方法及近年来主要进展。

5．举例说明真核生物RNA选择性的剪接对基因表达调控的作用。

6．Transcriptional Factor的主要特点是什么？提出一个克隆 Transcriptional Factor 并研究其功能的技术路线。

7．说明生物体在长期进化过程中形成保证遗传稳定性的机制。

8．肽核酸是一种以肽为骨架的DNA类似物，是由手性不对称的中性肽骨架置换脱氧核糖核酸骨架而成，试述其潜在的生物学意义。

9．你试图在一种细胞系中敲除某一基因，你可以用到那些方法。

10. 如果你认为已经获得了一个新的基因，你该如何去证实它？2002年下半年博士生理论考试1.证明DNA是遗传物质的实验证据。

2.20世纪中叶DNA双螺旋结构的提出获得了诺贝尔奖，该奖项的内容（DNA双螺旋结构理论的内容）、获奖人、获奖时间；试述该理论对现代分子生物学和生物技术产业化发展的重大意义。

3.同源重组技术的内容，发展及其应用4.比较基因组研究有哪些技术，其发展如何5.举例说明RNA选择性剪接在基因表达调控中的作用6.Transcription Factor有哪些特点；举一例说如何克隆Transcription Factor并验证其功能7.试述生物在长期进化过程中形成的保持遗传稳定性的机制8.肽核酸的生物学意义9.如果要将基因敲除，应使用哪些技术10.如果有一个新基因，如何研究它的功能2003年博士资格考试生物化学与分子生物学试题1.已知一基因定位于细菌染色体上，如何克隆该基因。

2.列举有关DNA双螺旋结构十个要点。

3.DNA复制、RNA转录及Protein合成的极性及形成这种极性的分子机制。

4.PCR在分子生物学中的应用。

5.真核生物的多级调控机制。

6.基因芯片在表达谱分析及蛋白质组分析中的原理、应用及异同点。

7.BLAST原理、种类及应用。

8.蛋白质高级结构中氨基酸组成、氨基酸排列顺序、构象对其功能的影响。

以Leu, Lys, Glu为例说明之。

2004年博士生资格考试《生物技术与遗传改良》笔试题1.举例说明DNA、RNA、peptide 三种大分子折叠（folding）的功能。

（10分）2.简述Basic transcription和Activation transcription过程中顺、反因子间的互作事件。

（10分）3.基因工程是通过对基因的操作对物种进行改良、生产蛋白活性物质以及基因治疗等直接为人类的生活和健康的服务的技术。

请你谈谈对基因工程的认识，以及基因工程的种类和应用范围。

（8分）4.禽流感(AI) 是正粘病毒科流感病毒属A 型流感病毒(AIV)引起的禽类的烈性传染病。

其基因组由8 条单链(-)RNA 组成, 编码10 种蛋白(PA、PB1、PB2、HA、NA、N P、M1、M2、NS1、NS2)。

如果新分离到一株烈性感染的禽流感，并由你来测定该病毒的基因组序列，请问你将如何实施。

请列出主要的步骤（或方法）。

（12分）5.获得目标基因是许多研究工作的基础。

若从哺乳动物中分离到一个蛋白质生长因子，如欲分离编码该蛋白因子的基因，并使之在大肠杆菌中表达出产物，请设计主要技术步骤。

（10分）6.已知基因序列但不知其功能，试述如何通过生物信息学分析和一系列反向遗传学研究技术（至少列举出5种）验证其功能。

（10分）7.研究蛋白－蛋白互作和DNA－蛋白互作的有哪些方法，简述其原理。

（8分）8.今年在高等动植物和人类基因组研究中，利用和产生了哪些模式生物？以你所熟悉的生物为例，试述模式生物在比较基因组研究中的用途。

（12分）9.有人说高等生物基因组序列的测定是获得了关于生命的奥秘的“天书”，以你所熟悉的生物为例，试述我们将如何破译这部“天书”。

（12分）10.试述RNAi的基本原理和用途。

（8分）2005年华中农业大学博士研究生课程考试试卷1.简述蛋白质磷酸化和去磷酸化的生物学意义，蛋白质磷酸化与糖基化有何关系？2.如果你在研究中发现了一个可能的新蛋白质，你应该通过哪些基础数据来证实其是新的蛋白质或是已知蛋白质？3.简述伴侣蛋白（chaperone）的生物学功能。

4.请比较说明Enhancer和Promoter在结构与功能上的特点。

5.请分别建树复制性转座子，剪贴性转座子，反转录转座子的转座机制及遗传效应。

6.何谓Epigenetic？请简述Epigenetic的分子基础。

7.什么是定点诱变（Site-directed mutagenesis）？简述（或图示）如何实现某一基因的定点、。

8.什么技术可检测某一基因在蛋白质水平上的表达差异？简述其基本原理及试验程序。

9.植物的图位克隆（map-based cloning）一般都需要通过遗传转化来证明候选基因，而人类基因克隆（positional cloning）时为什么不做转化也可确定目标基因？在植物中也可采用人类基因克隆的方法来确定目标基因吗？10.目前，人类,拟南芥，水稻等生物的基因组测序已经完成，图位克隆技术在这些物种的新基因发掘中还有用处吗？为什么?2005年生物技术与遗传改良1.试述功能基因组学研究的策略与技术路线，并具体说明SSH技术在功能基因组研究中的优，缺点，为什么这一技术具有Suppression和subtraction效应。

2.何谓Epigenetic？简述它的研究领域及进展。

3.试述双杂交系统（two-hybrid system）的原理及应用4.何谓体外定向（in vitro directed molecular evolution）分子进化？浅述其应用和意义。

5.何为核算与蛋白质的相互作用，有何生物学意义，举几例说明。

6.何谓蛋白质与蛋白质的相互作用，有何生物学意义，举例说明。

7.在动植物和人类基因表达的研究中，发现“allelic specific expression”现象，描述这种现象并说明其检测原理和方法。

8.Micro-RNA的定义和功能。

9.今年国际上已完成了人类，拟南芥，水稻等高等生物全基因组测序，并根据所测序列对各基因组进行了基因预测和注释。

这些基因预测和注释是如何进行的？在基因预测和注释中遇到些什么问题，采取了什么对策？2006年.6.22 华中农业大学研究生课程考试试卷1.已知某一蛋白质（基因序列已报道）的103位氨基酸残基与功能相关。