黄芪多糖提取工艺
农技服务,2012,29( 8) : 962 - 963
责任编辑 冯卫 责任校对 胡先祥
黄芪多糖提取工艺研究
高宛莉,杜瑞卿
( 河南南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳 473061)
摘要 为黄芪多糖的进一步开发利用打下基础,选取黄芪多糖的提取时间、提取温度和料液比 3 个因素进行了单因素试验。结果表明: 温度、提取时间和料液比 3 个单因素的最佳条件分别为 90℃ 、60 min 和 1∶8。其温度、提取时间和料液体积的最佳组合条件有待进一步 研究。 关键词 黄芪; 多糖; 提取工艺 中图分类号 TS244 文献标识码 A 文章编号 1004 - 8421( 2012) 08 - 962 - 02
One-way ANOVA of Extracting Procedure parameters of Astragalus Polysaccharide GAO Wan-Li et al ( College of Life Science and Tchnology Nanyang Normal University,Nanyang,He’nan 473061) Abstract One-way ANOVA experiment on extracting time,extracting temperature and the ratio of solid to solution were conducted,in order to find the response of astragalus polysaccharide’s yield to these factors. Parameters were analyzed by regression equation,and optimized with response surface methodology. It showed that at the temperature of 100℃ ,on the condition of the 1 ∶ 8 ratio of solid to solution,the sugars reached the maximum concentration in 60 min. However,at the same temperature,for the 60 min extraction,the sugar concentration reached the maximum on the 1∶6 ratio. Still on the 1∶6 ratio,the sugar concentration reached the maximum at the temperature of 100℃ in 60 min. The optimized joints of these three parameters were basically consistent. Key words Radix Astragali; Polysaccharide; Suger yield
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黄芪( Radix Astragali) 为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪 的干燥根,又称戴糁、芰草、百木、黄耆,是中药补气药中最为 常用且功效显著的一味药物,含有多种对人体有益的生物成 分与微量元素。黄芪多糖( Astragalus polysaccharide,APS) 是 中药黄芪的主要成分,近年研究发现其具有免疫调节、抗氧 化、保护心肌、促进骨髓造血干细胞增殖和调节血糖等多方 面的药理作用[1 -2],是很有价值的免疫增强剂。对久病患者 能加快身体康复; 黄芪多糖有抗心律失常的作用,对病毒性 心肌炎疗效独特; 可对抗化疗毒副反应,加快肝损伤患者的 恢复。近 年 来,黄 芪 多 糖 显 著 的 抗 癌 作 用 更 受 到 广 泛 关 注[3 -5]。因此,对黄芪多糖的提取过程控制与优化有着重要 的经济效益。笔者参照有关文献[6 -8]选取提取温度、提取时 间、料液比 3 个因素,通过单因素实验,对黄芪多糖的水提取 过程工艺条件进行研究,以期找到最佳条件,为黄芪多糖的 进一步开发利用打下基础。 1 材料与方法 1. 1 试验材料 1. 1. 1 黄芪。购自河南省医药公司,为蒙古黄芪。 1. 1. 2 仪器与试剂。TU-1901 双光束紫外可见分光光度计, 北京普析通用仪器有限责任公司。RE-52 旋转蒸发器,上海 亚荣生化仪器厂。D( + ) 一葡萄糖,Sigma 公司。其他试剂 均为国产分析纯。 1. 2 试验设计 经初步实验选定提取温度、提取时间、料液 比作为主要影响因素,以提取液中多糖含量为指标进行单因 素实验。 1. 2. 1 提取时间。分别称取 4 份各 30 g 黄芪粉碎物于圆底 烧瓶中,各加入 240 ml 蒸馏水,摇匀后分别于 100℃ 水浴加 热各 20 min、40 min、60 min、80 min、100 min、120 min,取出冷 却,4 000 r / min 离心 10 min,取上清液测定多糖含量。
基金项目 南阳师范学院青年科研资助项目( QN2012042) 。 作者简介 高宛莉( 1978 - ) ,女,河南南阳人,实验师。 收稿日期 2012-07-03
1. 2. 2 料液比。分别称取 4 份各 30 g 黄芪粉碎物置于圆底 烧瓶中,按照黄芪质量( g) ∶ 蒸馏水的体积( v) 分别为 1 ∶ 2、 1∶4、1∶6、1∶8、1∶10、1∶12,分别加入 60 ml、120 ml、180 ml、240 ml、300 ml、360 ml 蒸馏水,摇匀后,100℃ 水浴加热 60 min。 4 000 r / min 离心 10 min,取上清液测定多糖含量。 1. 2. 3 提取温度。分别称取 4 份各 30 g 黄芪粉碎物置于圆 底烧瓶中,各加入 180 ml 蒸馏水,摇匀后水浴加热,处理温度 分别为 30℃ 、50℃ 、70℃ 、90℃ ,110℃ 、130℃ ,60 min 后取出, 4 000 r / min 离心 10 min,取上清液测定多糖含量。 1. 3 多糖含量测定方法 多糖含量测定采用苯酚一硫酸 法[9]。标准曲线的绘制: 精确称取 D( + ) - 葡萄糖 20 mg, 用重蒸水定容至 100 ml 作为标准液。将标准液分别稀释成 浓度为 30 μg / ml、60 μg / ml、90 μg / ml、150 μg / ml、180 μg / ml 的溶液,各取 0. 3 ml 置于 10 ml 试管中,加入 50 g / L 重蒸苯 酚溶液 0. 6 ml 混合后,迅速加入 3 ml 98% 浓硫酸,混匀,室 温静置 30 min。用直径 10 mm 石英比色皿测定 489 nm 处吸 光度,用重蒸水进行空白对照实验。在与标准曲线绘制相同 条件下测定多糖样品含量。 2 结果与分析 2. 1 提取时间对黄芪多糖浓度的影响 从表 1 看出,提取 时间在 20 ~ 60 min,多糖浓度随着提取时间的增加而增大; 提取时间在 60 ~ 120 min 内,多糖浓度随着提取时间的增加 而减小。提取时间为 60 min 时多糖浓度最大,达 7. 2 μg / ml。 2. 2 提取温度对黄芪多糖浓度的影响 从表 1 看出,提取 温度在 30 ~ 90℃ ,多糖浓度随着提取温度的增大而增大; 提 取时间在 90 ~ 130℃ ,多糖浓度随着提取温度的增加而减小。 提取温度为 90℃ 时多糖浓度最大,达 8. 5 μg / ml。 2. 3 料液比对黄芪多糖浓度的影响 从表 1 看出,多糖含 量随水用量的增加而增大,但水用量超过一定值后,再增加 水的用量,多 糖 浓 度 随 水 用 量 增 加 而 增 加 的 幅 度 不 大。同 时,水用量过大给多糖溶液浓缩带来工作量加大,因此用水 量不宜过大。最佳料液比应为料液比的 1∶8。