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亮氨酸氨基肽酶检测

L-亮氨酸-p-硝基苯胺被标本中的LAP分解,游离出 L-亮氨酸-p-硝基胺,在405nm处检测吸光度变化率, 测得LAP活性值。
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亮氨酸氨基肽酶
【试剂】
▪ Tris缓冲液
100 mmol/L
▪ L-亮氨酸-p-硝基苯胺
2mmol/L
【操作参数】
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
▪ 主波长
405nm
▪ 副波长
505nm
▪ 温度
37℃
▪ 分析类型
速率法
▪ 样本/试剂
10/300
▪ 延迟时间/检测时间 3/2
▪ 在检测时间内读取两次不同时间的吸光度用其差值进行计 算。
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亮氨酸氨基肽酶
LAP是一种蛋白酶,LAP广泛分布于人体各组织,以 肝、胆、肾、小肠以及子宫肌层内含量最多。肝内外胆淤 时,LAP活力显著增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病 情进展而持续增高。对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。
【检测方法】
一般采用L-Leucine-p-nitroanilide作为底物通过 LAP水解,通过检测P-nitroaniline来测定LAP的活性, 此方法在六十年代即为推荐方法。 【原理】
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