【操作步骤】 革兰染液染色
初染 媒染 脱色 复染
冲洗
冲洗
冲洗
结晶紫 1’ 1’
冲洗
碘液 1’
95% 乙醇 30”
复红
滤纸干燥
油镜观察
革兰染色
甲 菌
＋ ＋ 紫色（ G ） 紫色（ G ）
初染
媒染
脱色
革兰氏染色步骤示意图 乙醇 稀释复红 结晶紫 碘液
乙 菌 红色（G-）
复染
革兰染色步骤示意图
【结果】
实验内容
油镜的使用与保护 细菌染色标本观察 （革兰染色法） 细菌基本形态观察 （球菌、杆菌、螺形菌） 细菌特殊结构观察 （荚膜、鞭毛、芽胞）

一、普通光学显微镜的使用
显微镜的构造图 油镜头的辨认 油镜的使用方法 显微镜的维护
一、油镜的使用与保护 1.原理
2.方法
四，细菌的三种基本形态
鞭毛
变形杆菌鞭毛×1000
细菌荚膜示意图
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
荚膜的观察：
负染色
三，细菌标本染色检查法
细菌染色
活菌染色
死菌染色
正染色
负染色
普通染色
特殊染色
简单染色法
复杂染色法
芽孢染色法
荚膜染色法
细胞壁染色法
抗酸染色
革兰氏染色
革兰染色法
由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。

【菌种】大肠杆菌+葡萄球菌
5—8cm
金属柄约14.5cm
绝缘柄 约7.5cm
安装环(针)的螺口(约8mm)
细菌涂片的制备
菌液采取法
细菌涂片的制备
菌液采取法
【操作步骤】
一、细菌涂片的制备
一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片 干燥 固定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘
得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。


【试剂】生理盐水、革兰染液
【其他材料】酒精灯、接种环、玻片、吸水纸、显微镜等 【方法】1、细菌涂片标本的制片 2、革兰染液染色 3、油镜下观察结果

操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）
Aseptic area 10-20cm
外焰 内焰
焰芯
细菌涂片的制备
器具：接种环（上）和接种针（下）
2—5mm 柄约22cm
显微镜下的杆菌
弧菌
霍乱弧菌
Figure 3 - Gram stain of Gram – Cholera cells
五，细菌的特殊结构观察
芽胞示教片：破伤风杆菌。 鞭毛示教片：变形杆菌。 荚膜示教片：肺炎双球菌。
产芽孢细菌的种类 芽胞
芽孢 菌体 （营养细胞）
破伤风梭菌×1000
球菌：葡萄球菌。
杆菌：大肠杆菌。
螺形菌：霍乱弧菌。
细菌的三种基本形态示意图
⊕
葡萄球菌：
Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells.
杆菌(bacillus)
Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cells

细菌被染成紫色者，称为革兰阳性菌； 而细菌染成红色者，称为革兰阴性菌；
阳性菌——紫色
阴性菌——红色
实验报告
简要写出革兰染色原理、操作步骤， 绘制革兰染色镜下细菌图 绘制细菌的基本形态及其特殊结构图