课堂提问：
检测和鉴定细菌的标准方法是什么？
分离培养
染色镜检
生理生化反应
传统的微生物学鉴定方法
药物敏感实验
过程烦琐
费时费力
质量控制难
传统的微生物学鉴定方法
易发生主观片面错误
微生物学技术方法快速、准确、简易和自动化?
计算机学 化学
微电子学
渗交 透叉
微生物学
分子生物学 物理学
自动化检测系统
第一节 全自动微生物鉴定仪器
淀粉水解实验
微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必 须靠产生的胞外酶将大分子物质分解成小分子物质才能被 微生物吸收利用。胞外酶主要是水解酶，通过加水裂解大 分子物质为较小的化合物，使其能被运输到细胞内。
Microbact生化鉴定试剂盒（18-24h出结果， 约200种细菌。）
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统
API 细菌鉴定系统 （生物梅里埃）
鉴定产品包括试剂条和数据库，试剂条通常包 含20个微量生化试验。 目前系列提供的16个产品鉴 定范围涵盖几乎所有的细菌群，超过550个不同的 种。
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统 API 细菌鉴定系统 （生物梅里埃）
ATB Expression 细菌鉴定智能系统
原理 选择识别力最强的发酵试验、同化试验、抑制试验、
酶试验和其他传统的生化反应，经过优化，组成由32 个反应联合的专一鉴定试剂条。采用8进位制细菌数 码分类法，整个鉴定条10-11位数的生物数码，与标 准数据库分类单位比较，得到相似系统和鉴定值，并 计算模式频率T值(T index)，T值越接近1代表该细菌 与典型菌株反应模式越接近。
[目的与要求]
（1）熟悉微生物自动化仪器检测原理；
（2）熟Байду номын сангаас全自动微生物鉴定仪检测原理；
（3）熟悉微生物总数测定仪检测原理；
（4）熟悉全自动大肠杆菌快速测定仪检测原理。
[难点与重点] 难点：微生物自动化仪器检测原理； 全自动微生物 鉴定仪检测原理； 微生物总数测定仪检测原理； 全 自动大肠杆菌快速测定仪检测原理。 重点：全自动微生物鉴定仪检测原理；微生物总数 测定仪检测原理
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统 ATB Expression是自动化微生物鉴定和药敏分
析系统，它是从API系统发展而来，由法国生物-梅里埃研制生产。以API试剂条为基础，测试品 种齐全，共有750种反应，电脑数据库不断地完 善和补充，鉴定能力强，可鉴定近700多种细菌。
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统
（一）系统原理 1．微生物数值编码鉴定技术 ������ 细菌的编码鉴定法采用21项生化指标， 每3项一 组，共7组。每组3项生化试验，阳性结果数值分别记 为1、2、4，反应阴性者记为0，尔后，分别将各组数 值相加，依次组成一组7位数值的编码，即代表所鉴 定的菌株的相应菌名。查《革兰氏阴性杆菌新编码鉴 定手册》中的检索表，找出这7位数码相对应的菌名。
糖（醇）类发酵实验
溴甲酚紫［P H 5.2 （黄色）-6 . 8 （紫 色）]
﹣
﹢
﹣﹢
甲基红 pH4 .4 （红色pH6 . 2 （黄色）
V.P. 实验
甲基红实验（MR实验）
甲基红试验是检测由 葡萄糖产生的有机酸。 当细菌代谢糖产生酸 时，培养基变酸，培 养基中甲基红指示剂 由橘黄色变为红色。 VP试验是测定某些细 菌利用葡萄糖产生非 酸性或中性末端产物 的能力
﹢﹣
柠檬酸盐利用试验：有的细菌如产气杆菌， 能利用柠檬酸钠为碳源，能在柠檬酸盐培养 基上生长，并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐， 使培养基变为碱性。此时培养基中的溴麝香 草酚蓝（变色范围pH6.0(黄)～7.6(蓝) ）指 示剂由绿色变为深蓝色。
吲哚实验 ﹣﹢
对二甲基氨基苯甲醛
硫化氢产生试验
某些细菌能分解含 硫的氨基酸(胱氨酸、 半胱氨酸等)，产生 硫化氢，与乙酸铅 试纸条反应，产生 黑色物质。
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统
用于细菌的快速鉴定，细菌的鉴定是细菌分类的实 验过程，即将未知细菌按分类原则放入某系统中的适 当位置与已知细菌比较，如果相同就采用已知细菌的 名称；不同则按命名原则，确定一个新的名称。
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统
第一节 全自动微生物鉴定仪器
一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统 （一）系统原理
2．微生物快速生化反应技术 ������ 通过实验总结不同的细菌与不同物质反应规律，设计独 特的培养基通过与未知细菌反应，根据反应结果鉴定出细菌。
将操作繁琐、解释冗长的传统方法微量化和标 准化，将生化试验试剂条和数据库结合起来，使鉴 定工作变得容易、快速和安全。这一创新得益于数 值鉴定法的发展。
API 细菌鉴定系统
ATCC成立于1925年， 是世界上最大的生物资 源中心，由美国14家生 化、医学类行业协会组 成的理事会负责管理， 是一家全球性、非盈利 生物标准品资源中心。 ATCC向全球发布其获 取、鉴定、保存及开发 的生物标准品，推动科 学研究的验证、应用及 进步。
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质 的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。以 此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代 谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之 为细菌的生理生化反应。
API鉴定原理
常见的生理生化反应包括：
（1）糖（醇）类发酵实验； （2） 甲基红试验（M.R试验）； （3）Voges-Proskauer试验（伏-普试验，V.P. 试验）； （4）靛基质试验（吲哚实验）； （5）硫化氢产生试验（三糖铁实验）； （6）明胶液化实验； （7）柠檬酸盐利用试验； （8）淀粉水解实验 （9）尿酶； （10）氧化酶； （11）赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶； （12）半乳糖酶；（13）触酶实验（过氧化氢酶）