滴加氨水至黄色后再多加 4 mL 。定容、摇匀，测吸光度。
四、数据记录
0 1 编 号 (Fe) / mg L1 0.000 1.00 2
2.00
×.×××
3
3.00
×.×××
4
4.00
×.×××
5
5.00
×.×××
6
未知
×.×××
吸光度（A）
×.×××
×.×××
五、标准曲线（图） 六、从标准曲线上查得的 (Fe) mg L1
50 1 mg L 七、原试液的 (Fe) 查得 5
八、思考题
T 方式
“0%”键
（4）调透射比为 100% 将手柄向操作者方向拉出一档（听到“咔嚓”一 声），此时参比（0 号）溶液进入光路。 按一下“100% T”键， 此时仪器显示“BLA” 表示仪器正在自动校 正，校正完毕后显示 “100.0”。
100.0 BLA
100% T
（5）重复（验证）（3）、（4）两步，直至透 射比为 0.000 和 100% 不变。 按“MODE”键至“ABSORBANCE”灯亮（ 时转换到测吸光度功能上）。
分光光度计的使用
• 原理：分光光度法是利用物质对某种波长 的光具有选择性吸收的特性建立起来的鉴 别物质或测定其含量的一项技术。
• 当一束单色光通过溶液时，一部分被吸收， 一部分则透过溶液。设入射光强度为Io。， 透射光强度为It，，则透光度T=It／Io
• 吸光度(A)或光密度(O．D)或称消光度(E)则 可表示为A=-lgT。根据Lambert—Beer定 律，吸光度与溶液的浓度成正比，与光束 通过溶液的距离(即光程)成正比，用数学表 达式表示为： A=KLC
放入吸收池架（透光面向着透光窗一侧）。 放置顺序为：
2号 透 光 窗
1号
0号 遮光 黑体 通过手柄将池架推投射比为 0.000
至投射比（T）灯亮
按 MODE 键
按一下“0%”键，此时仪器自动校正后显示 “0.000”。 （有的分光光度计没有黑体，需要在打开试样 室盖（起黑体的作用）的情况下调 T = 0.000）
0 1 编 号 (Fe) / mg L1 0.000 1.00 吸光度（A）
×.××× ×.×××
2
2.00
×.×××
3
3.00
×.×××
4
4.00
×.×××
5
5.00
×.×××
6
未知
×.×××
绘制标准曲线：
吸 光 度 (A)
● ●
●
●
根据未知溶液（6 号 溶液）的吸光度从标准 曲线上查得试液浓度。
（1）选择波长
拧动此旋钮
至所需波长
（2）将测试溶液装入吸收池（操作如下）
手拿毛玻璃面，
先用待装液漂洗 3 遍，
装入量为吸收池高度的 3 / 4，
毛面 透光面 容 量 的 3/4
用镜头纸擦净透光面，
所有关于吸收池的操作 均在实验台面之上的空 间进行，这样可保证一 旦吸收池滑落时掉在台 面上，不至于摔破。 不要将纸团成球， 不要来回擦， 而要向同一方向擦。
将手柄向操作者方向再拉出一档（听到“咔嚓” 一声），此时被测（1 号）溶液进入光路。 此时仪器所显示的数值即为 1 号被测溶液的吸光 度值（记录下来）。
0.186 - 0.000
再拉出一档，仪器所显示的数值为 2 号溶液的吸 光度值。 将 1、2 号吸收池换装入 3 、4 号溶液（黑体 和 0 号参比溶液不动），然后同法测定各溶液的 吸光度、并一一记录下来，记录格式如下表。
光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度,稳定。
可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)
单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。
棱镜:玻璃350～3200nm, 石英185～4000nm
光栅:波长范围宽, 色散均匀,分辨性能好, 使用方便
式中C代表该物质的浓度，L代表光程，一般以cm表 示，K为摩尔消光系数，即当溶液浓度为lmol／l， 光程为1cm时所测得的一定波长下的吸光度。
分光光度法的主要部件框架
通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.
波长可调, 故选择性好, 准确度高.
光源 单色器 吸收池 检测系统
稳压电源
（1）分光光度计的主要部件
V试液/mL VNH4Cl / mL
0 0.00
0.00 4
1
2
3
4
5
6
1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 0.00
0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 5.00 4 4 4 4 4 4 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00
V磺基水杨酸/mL 2.00
●
(Fe) / mg L1
原试液含铁质量浓度 = 查得的浓度 × 稀释倍数
50 1 查得 mg L 5
实验报告格式
一、实验目的
„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„
二、实验原理
„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„
三、实验步骤
编 号 V标准液/mL
吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。
可见光区：光学玻璃池
紫外区：石英池
检测器：利用光电效应，将光能转换成 电流信号。
光电池，光电管，光电倍增管
指示器：
低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
（2）分光光度计的类型
722型分光光度计结构方框图
光 源
分光 系统
吸收池
检测系统
分光光度计的使用