• 研究抗菌药物在体内吸收、分布和清除的动 力学过程——药代动力学(PK)。
• 研究体内药物浓度与药物抗菌效果关系—— 药效动力学(PD)
体外试验与体内情况有什么不同？
体外： 药物浓度 固定不变
Cmax
AUC
T1/2 β
体内： 药物浓度 随时间改变
细菌MIC位于什么水平临床治疗有效？
体外试验与体内情况的关联（PK/PD参数）
浓度
Cmax/MIC
Cmax Cmax / MIC
AUC/MIC T>MIC
AUC / MIC
AUC
MIC
MIC
T> MIC
时间
各类抗菌药物PK/PD参数
浓度依赖性
对致病菌的杀菌作用 取决于峰浓度
时间依赖性
与时间有关，但抗菌活性持 续时间较长
抗菌作用与 同细菌接触时间密切相关
时间依赖且 PAE或T1/2较长
氨基糖苷类、氟喹诺酮类、 酮内酯类、两性霉素B、 daptomycin、甲硝唑
Cmax/MIC >10
多数β -内酰胺类、 林可霉素类
恶唑烷酮类、氟胞嘧啶
T>MIC
>50%
链阳霉素、四环素、 碳青霉烯类、糖肽类、 大环内酯类、唑类抗真菌药
AUC/MIC >125
药敏试验中抗菌药物的选择
• 自1998年以来卫生部将CLSI制定的药敏标 准定为我国的部颁标准。依照（CLSI）所 制定的药敏试验执行标准作为选药指南
CLSI—the Clinical and Laboratory Sdandards Instituste
• M02-A11纸片扩散法（2012） • M07-A09 稀释法（2012） • M11-A07厌氧菌稀释法（2007）
• M100-S23每年更新一次
– 药敏测定方法 – 与方法相对应的判断标准折点 – 专家系统（天然耐药、获得性耐药） – 质控指南
是由于某些细菌/抗菌药物组合，尚不存 在或罕见耐药菌株。如金黄色葡萄球菌， 肺炎链球菌对利奈唑烷，万古霉素出现耐 药 –应证实细菌鉴定和药敏试验结果 –保藏菌株 –递交到参考实验室证实其结果
药敏试验结果报告
• 处方注释报告
严重的肠球菌感染如：心内膜炎，通常需要氨
苄西林、青霉素或万古霉素（敏感株）加上一种 氨基糖甙类联合治疗，除非证实对庆大和链霉素 高水平耐药
流感嗜血杆菌
药敏试验结果的报告
• 特殊情况下的药敏试验及结果报告
• 特殊细菌
• 特殊情况下的药敏试验及结果报告
• 特殊部位
• 对分离于脑脊液中的细菌，下列抗菌药物 不作为选择药物进行常规报告，因为用这 些药物治疗某些细菌引起的脑脊液感染可 能无效，这些药物包括：
仅通过口服途径给药的
Ⅰ和Ⅱ代头孢菌素(头孢呋辛钠除外)
– 温度：35℃ ±2 ℃ – 气体：空气， 5%CO2（ 溶血性链球菌、
肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等） – 时间： 16-18小时，20-24小时
药敏试验最低限度的质控建议
纸片扩散法 与MIC法质控 菌株不同
药敏试验结果判读
• 必须使用推荐的体外药敏试验方法 • 根据CLSI所公布的最新判断标准进行
需用最大剂量静脉给 药治疗（如肾功能正 常成人每4h静脉给 药至少300万单位
药敏试验结果的报告
• 报告方式
– 药敏试验结果以敏感、中介和耐药表示 – 有些细菌对某种抗菌药物没有或罕见有耐
药菌株，如β-溶血性链球菌对万古霉素， 当这些细菌检测的MIC高于敏感临界值或 抑菌圈直径小于敏感临界值时，则应报告 为非敏感。出现这种情况应证实细菌鉴定 和药敏试验结果，随后将菌株保存并递交 到参考实验室。
– 进一步阐明
• 非肠杆菌科细菌—新增 • 葡萄球菌—新增 • 肠球菌—新增
• M100-S23 page 176-179
药敏试验及 CLSI标准更新
安徽省立医院检验科 马筱玲
药敏试验一般知识
药敏试验
• 药敏试验定义：使用体外方法测定抗菌药 物抑制病原微生物生长的效力。
• 主要目的：预测体内抗菌效果 • 评价参数：MIC(最低抑菌浓度) ——在体
外能够抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度。
抗菌药物在体内的情况
• 不同给药方式，药物浓度不同（药物的吸收） • 不同组织，药物浓度不同（药物的分布） • 不同时间，药物浓度不同（药物的清除）
克林霉素
大环内酯类
四环素类
氟喹诺酮类
特殊情况下的药敏试验及结果报告
特殊部位
下列药物一般不适宜治疗尿道感染： – 阿齐霉素 – 氯霉素 – 克拉霉素 – 克林霉素 – 红霉素
CLSI M100-S17 (M2-DD, M7-MIC) 37
药敏试验结果报告
• 罕见耐药菌株的处理和报告 • 如果解释标准中仅给出“S”的标准，那
结果判断 • 解释标准取决于特定的给药方案和感
染部位（必须与临床医师交流）
肺炎链球菌对青霉素敏感性
肺炎链球菌对青霉素敏感性
青霉素注射剂 （非脑膜炎）
青霉素注射剂 （非脑膜炎）
口服青霉素
敏感 中介 耐药 注释
≤2 ≤0.06 ≤0.06
4
≥8
-
≥0.12
0.12-1 ≥2
S:肾功能正常成人每 4h静脉给药至少200 万单位，每天至少 1200万单位
• 链球菌属： 5%脱纤维羊血（马血、兔血） MH琼脂
• 淋病奈瑟球菌：GC培养基＋1％特定的生 长添加剂
• 脑膜炎奈瑟菌： 5%脱纤维绵羊血
药敏试验条件
• 菌悬液制备
– 肠杆菌科、假单胞菌属、不动杆菌属等： 生长法或直接菌落悬液法
– 葡萄球菌属、肠球菌属、苛氧菌：直接 菌落悬液法
药敏试验条件
• 孵育（温度、气体、时间）
• M100每年修订，M02,M07每三年更新一次
近年来CLSI重要的变化
• 增加天然耐药 • 判断折点（更新、删除） • 检测方法改变 • 增加新的抗菌药物 • 删除某些药物 • 增加给药方案来自2011年增加天然耐药附表
2013细菌的固有耐药附录B
• 肠杆菌科表格
– 删除了克氏枸橼酸杆菌对阿莫西林/克拉维酸、 氨苄西林/苏巴坦R
– 针对每一菌群所选择的药物具有确切临床疗效 （天然耐药不做药敏试验）
– 测定的药物具有可靠的体外试验方法和结果 – 测定药物具有代表性或指示性。 – CLSI推荐药物的取舍可根据本单位抗菌药物种
类确定
药敏试验条件（如葡萄球菌）
药敏试验条件
• 肠杆菌科细菌、非发酵菌、葡萄球菌、肠 球菌属等：Mueller-Hinton（MH）琼脂