3.3.2 移植
表二：营养液的配制
物质的量
母液体积（ml）
5 mM 2.5 mM
2.0 mM 2.0 mM 50 microM 70 microM 14 microM 0.5 microM 1 microM 0.2 microM 10 microM 0.01 microM
1000 1000
配 1L 营养液所需母液体 积(ml)
1 培养基配制和种子处理
1.1 培养基的配制
1.1.1 培养基母液配制,如表一： 表一：MS 培养基母液配制（单位：mg）
母液
编号 种类
大
量
1
元
素
2
微 量
元
素
铁
3
盐
成分
规定量
KNO3 NH4NO3 MgSO4·7H2O KH2PO4 CaCl2·2H2O
1900 1650 370 170 440
MnSO4·4H2O ZnSO4·7H2O H3BO3 KI
放入营养液中，轻轻的用镊子拨动根部，可将根部上粘连的琼脂清洗干净，这样移植前幼苗
的处理便算是完成了。
母液 元素成分
种类
大
KNO3
量 元
KH2PO4(ph6.5)
素 MgSO4
Ca(NO3)2
Fe-EDTA
H3BO3
微 MnCl2
量 元 CuSO4
素
ZnSO4
Na2MoO4
NaCl
CoCl2(ph6.5)
50
25
500
10
烟酸
0.5
50
25
肌醇（另配） 100
50
5000
500
10
1.1.2 MS 培养基的配制方法
为了使植株能够很好的在培养基上成长，选用 2.4%蔗糖，0.8%的琼脂（有利于在不伤
根的情况下取出植株并进行移植）在培养基配制过程中先将蒸馏水，母液，琼脂混合，加蒸
馏水至所需要的体积，然后高温加热并搅拌使琼脂完全溶解，溶液呈透明状时加入所需蔗糖，
3.3.3 移植后植株生长条件的控制
幼苗移植后将花盆用塑料薄膜覆盖，然后置于 21℃温度、（6300±300）lx 的光照强度
下，在前 4—6 天内，每隔 2 天浇一次营养液（保持土质湿润）并且继续用塑料薄膜覆盖，
当植株的叶子出现明显伸长，茎开始发育时，便可以取掉塑料薄膜。此后，若培养室空气干
燥，可以每隔一天浇营养液一次，具体视情况而定，但前提是保证土壤湿润。当去掉塑料薄
参考资料：
曹仪植主编，拟南芥，高等教育出版社 刘守伟，刘士勇.拟南芥室内培养技术研究[J].山西大学学报（自然科学版）（2009）SI 0146 03
2 幼苗在培养基中的生长
春化完毕后，将培养基转入培养箱（室）中，培养条件为：温度 21℃，光照强度
5500lx±300lx 光照时间 12h。其正常的生长状况一般为：
生长天数
1—2 天
3--4 天
5—8 天
8—12 天
12—14 天
生长状况
生根
2 片叶子
4 片叶子
6 片叶子
8 片叶子
当生长到 8 片叶子时，将培养皿稍稍倾斜，这样有利于根的伸长，利于以后幼苗的移植，
当植珠生长 3 周时间时，便能进行移植了。
3 幼苗的移植
3.1 土壤混合物的配制
对于栽培拟南芥的介质要求有良好的排水性，因此一般利用混合的沙子，蛭石等惰性 介质，保持良好的排水，防止过湿引起真菌和昆虫幼虫的滋生，常用的混合物有泥炭土，蛭 石，珍珠岩，其比例为泥炭土：蛭石：珍珠岩=1:1:1，将混合物混合均匀后，分装入小花盆 中，为了使介质有更好的排水性和通气性，混合物在花盆中的高度有 3-4cm 便可，并且在配 制混合物的过程中要保持珍珠岩完整和土质膨松。
3.2 营养液的配制见表二 3.3 移植的具体方法
如何把幼苗由培养基完整的移植到土壤混合物并且使幼苗健壮成长，是拟南芥能否种植
成功的关键，该过程主要包括幼苗的处理，移植和移植后幼苗生长条件的控制。
3.3.1 幼苗的处理
用镊子小心的除去幼苗根附近的琼脂，将幼苗从培养基中取出，在此过程要注意保护幼
苗的根部。可在移幼苗前预备一培养皿，向其中加入约 1/3 的营养液，把拿出么幼苗小心的
膜后，为使植株更好的生长和诱导开花可将光照时间延长至 14-16h。当植株出现花芽时， 一定要保证水分的供应，促进果实的发育。当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每 周浇一次水便可，以利于种子的成熟。
4 种子的收集和保存
4.1 种子的收集
拟南芥种子处在长角果中，当逐渐成熟时，长角果由绿变黄，最后成褐色。就实验室种 子收获来说，主要是及时收获种子，不至于使种子成熟而退化。此外要避免种系混杂的采集， 使种质得以保存。当长角果变黄时，可以开始单个采集长角果，但此时种子中含有较多的生 长抑制剂。因而，当长角果变褐时及时采集，可得到成熟又易发芽的种子。收获的种子应立 即脱粒、清洁、干燥。
过厚或过薄。过薄，点种子后水分蒸发快，培养基有可能干涸；过厚，种子发芽后，有可能 使叶子浸入平板中，影响幼苗后期发育并且过厚平板易开裂。
1.2 种子处理 1.2.1 种子消毒处理
在培养基中点样前，必须对对钟子进行消毒，防止感菌，具体方法为：利用 1%Naclo 浸泡 10min，离心后，倒掉 Naclo，然后用无菌蒸馏水洗涤 5-6 遍，时间间隔为 1min，注意 的是 Naclo 浓度不易过高和种子处理时间不易过长，有可能伤害种子。
4.2 种子的干燥和贮存
贮存过程中影响种子寿命的主要是温度和含水量。温度越高，含水量越多，则种子寿命 越短。因此刚采集的种子必须要经过干燥才能保存。最安全的种子干燥的方法是将采集的种 子置于干燥环境下，在室温条件下放置 2-3 周便可。
种子的贮存可根据贮存的目的不同，分为短期、中期、长期贮藏。一般短、中期贮藏是 将种子贮存在 4℃，而长期贮藏是保持在-20℃温度下。当取用长期贮藏的种子前，先将贮 存种子的容器预热到室温，或者将其置于 37℃水浴 10min，以尽量使冰害降至最低。为了 及时了解贮存过程合适与否，一般对种子定期进行生活力测定，而种子发芽率是测定其生活 力的最佳选择。
22.3 8.6 6.2 0.83
Na2MoO4·2H2O 0.025
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
Na2EDTA
37.3
FeSO4·4H2O 27.8
扩大倍数
10 10 10 10 10 100 100 100 100 100 100 100 100 100
称取量
拟南芥实验室的常用种植方法
刘金亮
（西北师范大学，生命科学学院，730070）
摘要：拟南芥由于其生活周期短，种植和生长不受季节限制，并且为自花受粉植 物而作为实验最常用的模式植物，因此拟南芥如何能够在实验室较好较快地生长 便成为实验成败的关键，由于拟南芥存在多种生态性，各实验室均有各自适合栽 培种植的方法如在土壤，石英砂，琼脂等均可种植，但土壤种植种子萌发率低， 生长过程中受其它方面影响大，故本方法重点介绍利用琼脂无菌培养基培养幼苗 和移植相结合的方法，来快速种植拟南芥，该过程主要包括种子的处理，琼脂无 菌培养基上种子的培养和幼苗的移植以及成熟后种子的保存。 关键词：培养基配制；种子处理；种植；移植 Abstract:The Arabidopsis is used as a model plant because its life cycle is short and the growth is not season limited as well as self-pollination.As for those reasons,it is important to make the Arabidopsis growing well and rapidly in laboratory.Our experiment will success or not depending on the Arabidoopsis growth.There are many methods to crop Arabidoopsis in different Labs such as plant crops on the soil , quartz sand,agar and so on.But the plants grow slowly on the soil and are influenced by many elements.To solve this,we adopt the method using the agar culture medium raise seedling and then transplant.This process mainly includes seed treatment,seed culture on agar culture and transplant. Key words：Culture dispensing; seed treatment; plant; transplant
19000 16500 3700 1700 4400 2230 860 620 83 2.5 2.5 2.5 3730 2780
母液体积 配 1L 培养基 （ml） 吸取量（ml）
1000
100
1000
10
1000
10
甘氨酸
2.0
4 维 盐酸硫胺素 0.5 生
素 盐酸吡哆素 0.5
5补充蒸馏水，使总体积保持不变。溶解完成后，调节溶液
PH，使 PH 为 5.8(1MKOH)，然后在琼脂凝固之前将药品分装，与实验中所用的培养皿，枪头，
枪盒，蒸馏水等利用高压蒸气灭菌。
1.1.3 倒平板
将灭菌后的药品及培养皿于无菌室中倒平板，平板厚度一般占培养皿厚度的 1/3，不易