一、基本原理
原理
1
包被，封闭
2
反应
加入待测抗体或 抗原和酶标抗原 或抗 与未结合的分离
4
底物显色
定性或定量的分析
1.ELISA检测抗原的方法
+
①双抗体夹心法测 抗原
E
E
E E
E E
E
E
E
-
1、已知抗体包 被于载体表面
1、已知抗体包 被于载体表面
+
②竞争法测抗原
④捕获法
原理：
抗人IgM抗体包被
捕获待测标本中IgM类抗体
加入特异性抗原和酶标记特 异性抗原的抗体 底物显色
酶免疫检测仪基本原理
酶联免疫检测仪的基本工作原理：分光光度 计法 其主要结构和光电比色仪相似

酶免疫检测仪基本原理

光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成 一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该 单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标 本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待 测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应 的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数 转换等信号处理后送入微处理器进行数据处 理和计算,最后由显示器和打印机显示结果.
-
E
E
E
3、加酶作用 的底物不显色 或显色弱
E
E
E
2、加待检物 抗原与酶标抗 原竞争与抗体 结合
2、加待测物 和酶标抗原， 酶标抗原与抗 体结合
E
E
3、加酶作用 的底物显色
2.ELISA检测抗体的方法
+
①间接法测抗体
-
E
E
E
E E
E E
E E
②双抗原夹心法
类似双抗体夹心法
③竞争法
类似检测抗原的竞争法

ELISA测定一般要求测试液的最终体积在 250ul以下，用一般的光电比色计无法完成测 试。
酶免疫检测仪基本原理



酶标仪和普通的光电比色计有以下几点差异: 1.盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用 塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对 抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体. 2.由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能 垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液 和微孔板的,光束既可从上到下,也可以从下到上穿 过比色液. 3.酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示 吸光度.
酶免疫检测原理
组员：龚希 韩翌 罗勋 李婧 李慧
常用酶标仪及洗板机
全波长酶标仪Multiskan Spectrum Bio-Rad 680
BIO-RAD 1575 伯乐洗板机
美国贝克曼库尔特有限公司 MW96
酶免疫技术的原理及特点
原理： 酶免疫技术是利用酶催化底物反应的生物放大作用， 提高特异性抗原－抗体免疫学反应检测敏感性的一种 标记免疫技术。 结合了抗原抗体反应的特异性和酶高效催化反应的专 一性。 特点： 灵敏度高、特异性强、准确性好 酶标记试剂能够较长时间保持稳定 操作简便、对环境没有污染。 易与其它技术偶联 衍生出适用范围更广的新方法。