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生化实验室注意事项

实验室要求
1、实验室安全须知
●实验室规定在进行任何实验操作时都应尽可能穿着实验服(白大褂),若因违反此
规定而导致的衣物损伤甚至于人身伤害应自己负责。

涉及挥发性、刺激性及有毒试剂的操作必须在通风橱内进行,对违反此规定者任何人都有权指出并追究责任。

注意不要戴着手套接触电脑键盘、鼠标、照明开关、电梯开关等公共区域。

●实验室的安全问题关系到每个人的切身利益。

实验室危害源按大小区分如下:放
射线、病毒 >>氯仿> EB / acrylamide >臭氧。

●特别需要关注的是氯仿,会导致肝肿大、肝硬化,如果瓶子的内塞不盖,会不知
不觉中挥发,不知不觉中实验室所有人都吸入了氯仿。

新开瓶的氯仿要在上面加上0.5 cm厚的离子水,防止氯仿挥发。

●EB在Ames test中显示有致突变活性,但实际上不能穿越表皮,因此即便沾在手
上也危害甚微。

如果浓度比较高,可以用次氯酸钠等氧化剂擦手。

●臭氧会导致肺气肿和肺纤维化,因此要尽量缩短开石英紫外灯的时间(只有石英
灯管才会发生臭氧),并尽量避免吸入臭氧;
●向下水道倒废液,要注意将危害大的物质做适当处理:如考马斯亮兰染色液应该
加入次氯酸钠将色素破坏后确认达到中和。

●实验室所有成员都应熟悉实验室内水、电开关的分布,在遇到紧急情况的时候应
立刻关闭相应的开关。

还应该熟悉大楼的各种应急措施,包括灭火器的位置及报告火情的警铃按钮
●火情紧急对策。

任何时候若发现火情,应立即呼叫救援。

若是由电器产生的火情
应立即关闭总电源。

若火情不大,可立即到走廊取灭火器进行扑救。

若火情已不能由灭火器扑灭,迅速按下走廊墙壁上的红色火情警铃并拨119报火警
●任何时间内最后离开实验室者都应检查水、电后锁门方能离开
2、实验记录
●实验数据的记录:所有实验应标明实验目的、方法、结果和结论。

实验结果、图
表等均应在笔记中标注清楚。

和导师讨论后要记录讨论的时间和内容以及达成的共识。

铭记――好记性不如烂笔头。

●实验记录本需要妥善保存,所记录的东西应该让后面查阅的人能够看懂,不要使
用自己的“暗语”和“记号”。

实验样品记录应和保存的样品相对应,并清楚标注样品名称,保存日期,载体信息等,方便日后查询。

●本实验室成员独自开发过改良过的的实验protocol,当不厌其烦地进行整理,放
在服务器的实验室工具箱中,以便其他人共享。

●所有成员在本组讨论会(Seminar)上作的演示文稿均存放在计算机
3、实验室工作细则
●实验室的任何东西都有它最应该放的地方。

切记,哪里拿的放回哪里。

●实验室区域划分:实验室分公用区域和个人实验区域。

个人使用区主要为指定的
实验桌和试剂架,指定的坐位,指定的4℃和-20℃使用区,冷库使用区;公用区域包括大小摇床、大小离心机、PCR仪、称量区、动物箱、破菌机、成像系统、核酸电泳区和蛋白质电泳区、灭菌室、RNA实验区等。

所有公用区需要保持清洁和空闲,不能因为个人样品不收拾而影响别人的正常使用。

●任何时候都应保持实验台的清洁。

实验区负责人每日负责清理实验台,可自由处
置违反规定而遗留在实验台上的任何物品并有权追究责任。

●器皿洗涤:个人使用的玻璃和塑料器皿,需要各自及时负责清洗、烘干,及时收
回;洗涤时如使用洗涤剂(如接触培养基的器皿等),则用流水刷洗15次,然后用去离子水刷洗2次;如果是盛有一般化学试剂的器皿洗涤时用流水冲洗7次,然后用去离子水冲洗2次。

●酶要尽量节省用量,还应小心使用,避免污染。

由于酶在常温容易失活,因此不
管是PCR还是限制内切酶、T4DNA连接酶在使用时应尽量减少其在常温或冰上的时间,即当各种缓冲溶液和DNA等全部混合后才从冰箱取出酶进行移取,完毕尽快将酶放回冰箱(-20℃)。

●Agarose凝胶电泳的缓冲溶液如果使用超过三次以上就会影响电泳效果,应该及时
更换;如果需要从凝胶中回收DNA,则应使用新鲜的缓冲溶液。

●带盖的离心管、试剂瓶等在进行高压灭菌时,需将盖子拧松或者在瓶口插一片纸。

●移液器应按量程要求小心使用,千万不要拧过量程范围,使用完毕将其调回最大
量程,并将其挂在移液器架上,注意吉尔森(Gilson)和Eppendorf有各自的枪架,
不要混放。

一旦移液器受到污染,应及时清理;注意不得将移液器颠倒放置。


品移取时应注意减少交叉污染。

●实验室各种仪器的使用应遵守仪器操作流程,任何因个人操作不当而引起的仪器
故障应主动承担责任,及时报告并联系检修。

●废液回收:尽可能减少酚氯仿抽提时酚氯仿的用量,废液要回收。

其他需要回收
的废液:乙酸乙脂、吡啶、乙醚,及其他不溶于水的有机溶剂。

●实验服只能在实验区穿,不能穿出实验区,也不得穿入生活区。

4、药品的使用、存放及购买。

●任何试剂接近用完时,或有特殊试剂需求时,必须先向实验室负责试剂定购的人
员提出,必要时向实验室负责人商量定购事宜。

订购药品前应先查询药品记录本,确定实验室内没有后再买。

●药品用完后应放回原处。

药品或试剂使用时一定要确认已开启瓶完全用完后再开
启新瓶。

用完一瓶或购进药品应在药品记录本上登记
●所有配制的溶液都应贴有标签。

标签必须写明4个要素:试剂名称、浓度(及pH)、
配制人名、日期。

如果高温灭菌过,也请注明。

严格禁止使用个人编号。

只要是
使用时间在一天以上,就要具体写清楚这4个要素。

强烈建议所使用的试剂一定
要自己配。

●试剂称量须知:从冰箱中取出来的固体试剂必须在室温放置一段时间,等试剂的
温度和室温相当后方能打开盖子称量;称毫克级试剂时,一次性往Eppendrof管
中取出适当的量,称重后就按重量进行计算该加入溶剂的量。

称量纸使用后即丢
弃,称量匙应洗涤后放回原处。

为避免药品交叉污染,尽量减少称量匙的使用;
如需要,则用洗净、干燥的称量匙移取药品,不同的药品需用不同的称量匙,取
出多余的药品不得放回原药品瓶(可另用干净容器盛放)。

5、有培养基的平板、斜面、摇瓶的存放及标记。

●铺好的平板可在超净台内保留不超过24小时,及时收至4℃保存,必须标有明确
的标记(培养基、配制者姓名、配制日期)。

任何人发现超净台内有污染的平板,
都应立即丢弃。

培养基的灭菌温度:121℃,25min,如果其中含有葡萄糖等热敏
性物质,则为115℃,20min。

●已经培养好的平板、摇瓶若还有需要应在冰箱中存放,必须如上所示明确标记。

摇瓶在冰箱内存放不得超过2周,而平板不得超过一个月。

冰箱负责人有权将过期的摇瓶和平板弃去。

6、器材的使用。

●使用仪器前需了解使用方法和注意事项,经相关负责人培训,使用后登记使用情
况,出现问题及时通知管理人员。

●实验仪器和插线板禁止随意搬动,确因需要挪动的,用后请放回原处。

●仪器使用前后均要清理干净。

●PCR须知:定期用50%的酒精擦PCR上的样品孔,看好时间做实验,为了仪器寿
命,不能让PCR仪4℃保温过夜。

●冰箱、冷库使用须知:一般在各自划定的区域内使用-20℃冰箱时,将自己的盒
子取出后再挑选,切勿长时间开着冰箱门影响别人样品质量。

定期整理各自使用的冰箱区域,腾出试管架子。

●精密移液器的正确用法:不得在酒精灯上操作,不要习惯性空打(会造成磨损)。

●离心机使用时:高速离心机用后需将转子取出倒置。

最重要的是,不管什么离心
机,一定要将离心管进行平衡,不然离心机轴心会在一次不经意的不平衡后,发生永久性偏轴损伤。

●带可调控性电源(电压和电流)仪器使用时,需将电压或电流调至零点方可以关
电源。

这样的仪器有:离心机、显微镜、电泳仪等。

●电泳仪和台式离心机需将电压调至最小后再关闭电源,这是为了让仪器长寿。

●脱色摇床,培养摇床不用时要关闭(电机有使用寿命),不用的器皿、管子及时
拿出。

7、其他
●对于实验室的集体活动之一的Lab meeting,每个成员必须准时出席,
●Seminar是实验室最重要的学术活动,每个成员必须最大限度加以重视,努力提高
演讲水平。

Ppt文件要存档;
●实验室提倡大家多参加各种学术会议,并要积极提问题。

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