3.无机酸沉淀蛋白质 取3支试管，分别加入浓盐酸15滴，浓硫酸10滴， 浓硝酸10滴。小心向三只试管中，眼管壁加入蛋 6 白质溶液6滴，观察两溶液界面处白色环状蛋白 质沉淀的生成。然后摇动试管，蛋白质沉淀应在 过量的盐酸和硫酸中溶解，在含硝酸的试管中蛋 白质沉淀不会溶解。（磷酸不能使蛋白质沉淀， 无机酸沉淀蛋白质的原因可能是蛋白质颗粒脱水 的结果，过量的无机酸可使沉淀在溶解）
（二）蛋白质的不可逆沉淀
1.重金属离子沉淀蛋白质 重金属离子与 蛋白质结合成不溶于水的复合物。 取3支试管，加入蛋白质溶液1mL，再加 3%硝酸银溶液3—4滴、0.5%乙酸铅1-3滴 和硫酸铜3-4滴，振荡试管，有沉淀产生。 放置片刻，倾去上清液，向沉淀中加入少 量的水，沉淀是否溶解？为什么？
2、某些有机酸沉淀蛋白质 取2支试管，各 加入蛋白质溶液0.5mL，分别加入1ml 10% 三氯乙酸溶液和50%磺基水杨酸，振荡试 管，观察沉淀的生成。放置片刻倾出清液， 向沉淀中加入少量水，观察沉淀是项 实验要求各种试剂的浓度和加入量必须相 当准确。 作业 列表说明各实验的颜色变化，说明原因。
思考题: 思考题 1.为什么蛋清可作为重金属中毒的解毒剂 2、在等电点时，蛋白质溶液为什么容易发 生沉淀？ 3.在蛋白质的可逆沉淀反应中，为何要用 蛋白质氯化钠溶液？
谢
谢
三、实验材料与设备： 实验材料与设备
（一）材料 5ml鲜鸡蛋清，用蒸馏水稀释至100ml，搅 拌后用4-8层纱布过滤，新鲜配制。
（二）试剂 5%卵清蛋白溶液或鸡蛋清的水溶液（新鲜鸡蛋 清 ：水=1:9） 蛋白质氯化钠溶液20ml蛋清+200ml蒸馏水+饱和 氯化钠溶液100ml，充分搅拌后以纱布滤去不溶 物（加入氯化钠的目的是溶解球蛋白） 3%硝酸银，5%三氯乙酸溶液，饱和硫酸铵溶液， 10%氢氧化钠溶液，0.5%乙酸铅，浓盐酸，浓硫 酸，浓硝酸，5%磺基水杨酸，0.1%硫酸铜，饱 和硫酸铜，0.1%乙酸，10%乙酸，饱和氯化钠溶 液。
蛋白质的沉淀反应
一、目的要求： 目的要求
了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义
二、实验原理：
在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水 化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒， 在一定的理化因素影响下，蛋白质颗粒可 因失去电荷和脱水，甚至变性，则以固体 形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质 的沉淀反应。
蛋白质的沉淀反应可分为两类。 （1）可逆的沉淀反应 蛋白质虽然沉淀析 出，但蛋白质分子的结构尚未发生显著变化， 除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能 溶解于原来溶剂中，并保持其天然性质而不 变性。属于这类反应的有；蛋白质的盐析作 用或在低温下用乙醇（或丙酮）短时间作用 于蛋白质。提纯蛋白质时，常利用此类反应。
（三）设备 1、水浴锅 3、200mL锥形瓶 5、吸管
2、温度计 4、100mL容量瓶 6、试管及试管架
四、实验步骤： 实验步骤：
（一）蛋白质的可逆沉淀 蛋白质的盐析 加蛋白质溶液5mL于试管中，再加等量的饱和硫 酸铵溶液，混匀后静置数分钟则析出球蛋白的沉 淀。倒出少量混浊沉淀，加少量水，观察是否溶 解，为什么？将管内容物过滤，向滤液中添加硫 酸铵粉末到不再溶解为止。此时析出沉淀为清蛋 白。 取出部分清蛋白，加少量蒸馏水，观察沉淀的再 溶解。
（2）不可逆沉淀反应 此时蛋白质分子内 部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉 淀，不再溶于原来溶剂中。加热、重金属 盐、过酸、过碱、震荡、超声波或某些有 机酸都能使蛋白质发生不可逆沉淀反应。 ]蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的 条件仍然存在（如电荷），并不析出。因 此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而 沉淀的蛋白质也未必都已变性