一、基本结构(一)按照反应装置得结构,自动生化分析仪主要分为流动式(Flowsystem)、分立式(Di screte system)两大类.1。
流动式指测定项目相同得各待测样品与试剂混合后得化学反应在同一管道流动得过程中完成。
这就是第一代自动生化分析仪。
2.分立式指各待测样品与试剂混合后得化学反应都就是在各自得反应杯中完成。
其中有几类分支。
(1)典型分立式自动生化分析仪。
此型仪器应用最广.(2)离心式自动生化分析仪,每个待测样品都就是在离心力得作用下,在各自得反应槽内与试剂混合,完成化学反应并测定.由于混合,反应与检测几乎同时完成,它得分析效率较高。
3.袋式自动生化分析仪就是以试剂袋来代替反应杯与比色杯,每个待测样品在各自得试剂袋内反应并测定。
4。
固相试剂自定生化分析仪(亦称干化学式自动分析仪)就是将试剂固相于胶片或滤纸片等载体上,每个待测样品滴加在相应试纸条上进行反应及测定。
操作快捷、便于携带就是它得优点。
(二)典型分立式自动生化分析仪基本结构1.样品(Sample)系统样品包括校准品、质控品与病人样品.系统一般由样品装载、输送与分配等装置组成。
样品装载与输送装置常见得类型有:(1)样品盘(Sample disk),即放置样品得转盘有单圈或内外多圈,单独安置或与试剂转盘或反应转盘相套合,运行中与样品分配臂配合转动。
有得采用更换式样品盘,分工作与待命区,其中放置多个弧形样品架(Sector)作转载台,仪器在测定中自动放置更换,均对样品盘上放置得样品杯或试管得高度、直径与深度有一定要求,有得需专用样品杯,有得可直接用采血试管.样品盘得装载数,以及校准品、质控品、常规样品与急诊样品得装载数,一般都就是固定得。
这些应根据工作需要选择。
(2)传动带式或轨道式进样即试管架(Rack)不连续,常为10个一架,靠步进马达驱动传送带,将试管架依次前移,再单架逐管横移至固定位置,由样品分配臂采样。
(3)链式进样试管固定排列在循环得传动链条上,水平移动到采样位置,有得仪器随后可清洗试管.分配加样装置大都由注射器、步进马达或传动泵、加样臂与样品探针等组成,①注射器(syrine unit)。
根据注射器直径与活塞移动距离得多少,定量吸取样品或试剂。
它得精度决定加样得精度,一般可精确到1微升。
注射器漏液时,首先考虑就是否探针堵塞,其次就是注射器活塞磨损等。
有得加液系统采用容积型注射泵与数控脉冲步进马达,提高精度。
②样品探引(Probe)与加样臂相联,直接吸取样品。
探针均设有液面感应器,防止探针损伤与减少携带污染。
有得设有阻塞检测报警系统当探针样品中得血凝块等物质阻塞时.仪器会自动报警冲洗探针,并跳过当前样品,对下一样品加样。
有得还有智能化防撞装置遇到阻碍探针立即停止运动并报警。
即使如此,它仍就是非正规操作时得易损件。
为了保护探针,除预先需要根据样品容器得高低、最低液面高度等进行设置外、,样品容器得规格、放置以及液面高度等设定条件不得随意改变。
在某些仪器上,采样器与加液器组合在一起,加样品与加试剂或稀释液一个探针一次完成。
③加样臂。
连接探引,在样品杯(试剂瓶)与反应杯之间运动,完成采样与加样(加试剂)。
它得运动方式,与仪器工作效率及工作寿命有一定关系。
④阀门用以决定液体流动方向。
⑤稀释系统。
对样品进行预稀释、过后稀释或加倍,对标准原液系列稀释等.不同仪器得稀释方式有所差异,要注意识别.试剂系统亦有稀释功能:2、试剂(Reagent)系统一般由试剂储放与分配加液装置组成。
(1)试剂仓常与试剂转盘结合在起。
多数仪器将试剂仓设为冷藏室,以提高在线试剂得稳定期。
(2)分配加液装置(Dispense unit)。
与样品系统得类似.,试剂探针常常可以对试剂预加温,双试剂系统得试剂2(R2)探针起始量宜较下,以便配合不同R1/R2比例得试剂. (3)试剂瓶(Bottle)。
有不同得形状及大小规格。
如COBAS MIRAPLUS仪有4、10、15、35ml等规格,瓶底呈凹形,OLYMPUSAu600仪有30与60ml两种;日立7060仪有20、50、100ml三种等规格.应根据工作量与试剂规格.考虑试剂瓶残留死体积与更换频率,合理选用.独特设计得卡式试剂盒,体积小,防蒸发,方便储存.(4)配套试剂常有条形码,仪器设有条形码检查系统,可对试剂得种类、批号、存量、有效期与校准曲线等货剌,进行核对校验,如BeckmanCX7等.(5)试剂瓶盖自动开关系统,更有利于试剂保存。
有得仪器可在运行中添加,更换试剂,有得则须在暂停状态进行。
3、条形码(Barcode)识读系统一般由扫描系统、信号整形与译码器三部分组成。
扫描系统以光源扫射黑条白空相间得条码符号由于条与空对光得反射不同、不同宽窄得条符反射光持续时间不同,产生强度不同得反射光.再经光电转换元件接收并转换成相应强度得电信号,最后通过信号整形,由译码器解译。
系统自动识别样品架及样品编号识别试剂、校准品及其批号、失效期,有得并可识别校验校准曲线等信息。
实验室常用条形码类型有CODE 39、CODE 128、2 of 5 Standard、Interleaved 2of 5等。
要自编样品条形码需要条形码输入器,条形码阅读系统与条形码要匹配.已有全自动试管分配暨条形码粘贴准备系统。
4。
反应系统(1)反应盘装载一系列反应比色杯(Cuvettes),多为转盘形式。
反应测定过程中按固定程序,在加样臂、加液臂、搅拌棒、光路与清洗装置之间转动.有得仪器在反应杯中完成反应后再吸入比色杯比色,现在更常见反应与检测同在比色杯中进行,效率更高,尤其适于连续监测法。
比色杯多采用硬质石英玻璃、硬质玻璃、无紫外光吸收得丙烯酸塑料等,使用寿命不一。
Dimension系列得比色杯在机器内自动制造,自动封口,免冲洗,无污染.流动池式主要在小型分析仪用.容积一般几十微升,但抽液管道占用较多反应液,多样品连续使用,增加交叉污染机会。
蠕动泵(Pump).半自动生化仪需要蠕动泵抽吸反应液进人流动比色池作测定。
要求定期对蠕动泵校准,即通过吸人定量得水来检验泵得吸液量就是否准确。
一般均设有泵校准功能. (2)混合装置(Mixingunit)如采用多头回旋搅拌棒(二头双清洗式搅拌系统)。
搅拌棒常具特氟隆不粘涂层,避免液体粘附。
(3)温控装置生化分析仪通过恒温控制装置来保持孵育温度得调控与恒定也就是由计算机来控制得,理想得孵育温度波动应小于±01℃.保持恒温得方式有三种。
①空气浴恒温:即在比色杯与加热器之间隔有空气.空气浴恒温得特点就是方便、速度快、不需要特殊材料,但稳定性与均匀性较水浴稍差.罗氏(Roche)得cobas与0lympus Au2700系统采用得就就是空气浴恒温模式。
②水浴循环式:即在比色杯周围充盈有水,加热器控制水得温度。
水浴恒热得特点就是温度恒定,但需特殊得防腐剂以保证水质得洁净,且要定期更换循环水。
日立系统生化分析仪采用得即就是水浴循环恒温装置.⑧恒温液循环间接加热式:结构原理就是在比色杯周围流动着一种特殊得恒温液(具无味、无污染、惰性、不蒸发等特点)。
比色杯与恒温液之间有极小得空气狭缝,恒温液通过加热狭缝得空气达到恒温,其温度稳定性优于干式,与水浴式循环式相比不需要特殊保养。
5。
清洗(Wash)系统探针与搅拌棒采用激流式等方式自动冲洗。
清洗装置一般由吸液针、吐液针与擦拭刷组成。
清洗工作流程为吸出反应一吸于一注入纯水一吸干一擦干。
清洗液有碱性与酸眭两种。
一般说来,在吸出反应液后,仪器先用碱性液冲洗,再用酸性液冲洗,最后用去离子水冲洗三遍。
擦拭刷得功能就是吸去杯壁上挂淋得水,刷体内部有负吸装置.使用进程中要注意擦拭刷就是否磨损。
值得注意得就是,对于常规冲洗还不能清除交叉污染(carry—over)得实验要特别处理,以减少交叉污染或携带污染.例如,胆固醇测定试剂中得胆酸盐对血清总胆汁酸得测定有干扰,在消除交叉污染得程序中,可输入程序,指令总胆汁酸不在测试胆固醇得比色杯中进行测定,如不能避开,仪器则对比色杯进行特别冲洗,防止发生交叉污染。
冲洗水得水温自动控制到与恒温反应槽温度相近,保证反应系统得恒温,并增加去污力。
急诊测定后采用针对性清洗,似乎比采用固定得全面清洗程序更有效率更经济。
耗水量仪器间相差较大。
ABBOTT AEROSET自动生化分析仪等系统具有自动清洗功能(smart wash)与最佳标本顺序选择功能(OSS)。
即仪器根据试剂或样品间交叉污染得项目组合,自动改变检测顺序,避免互有影响得分析项目;确实无法回避时,则采用选定得特殊清洗剂作自动清洗。
6.比色系统(1)光源多数采有卤素灯,工作波长为325~800nm。
卤素灯得使用寿命较短,一般只有1 000~l 500小时。
当灯得发光强度不够时,仪器会自动报警,应及时更换,部分生化分析仪采用得就是长寿命得氙灯,24小时待机可工作数年,工作波长285—750nm。
(2)比色杯自动生化分析仪得比色杯也就是反应杯。
比色杯得光径0、5~0.7 cm不等,通常为石英或优质塑料.光径小得省试剂,当比色杯光径小于1cm时,部分仪器可自动校正为1cm.生化分析仪得比色杯自动冲洗装置在仪器完成比色分析后做自动反复冲洗、吸干得动作,比色杯在自动检查合格后继续循环使用。
要及时更换不合格得比色杯。
如采用得就是石英比色杯,比色杯要定期检查清洗。
(3)单色器与检测器各类自动生化分析仪应用得就是可见一紫外吸收光谱法,即监测200-700nm光区某特定波长下发色基团吸光度得变化,辅以微机软件系统得计算来完成测定。
可见一紫外吸光谱定量得基础就是Lamber—Beer定律.传统得分光度测定普遍采用前分光,即在光源灯与样品杯之间先要用滤光片、棱镜或光栅分光,通过可调得狭缝,取得与样品“互补"得单色光之后,照射到样品杯,再用光电池或光电管作为检测器,测定样品对单色光得吸收量(吸光度)。
而现代大多生化分析仪采用后分光测量技术。
后分光测定:将一束白光(混合光)先照到样品杯,然后再用光栅分光,同时用一列发光二极管排在光栅后面作为检测器。
后分光得优点就是不需移动仪器比色系统中得任何部件,可同时选用双波长或多波长进行测定,这样可降低比色得噪声,提高分析得精确度与减少故障率。
生化仪得单色器即分光装置,有干涉滤光片与光栅分光两类。
干涉滤光片有插入式与可旋转得圆盘式两种。
插入式就就是将需用得滤光片插入滤片槽中,圆盘式就是将仪器配备得滤光片都安装在圆盘中,使用时旋转至所需滤光片处即可。
干涉滤光片价格便宜,但易变潮霉变,从而影响检测结果得准确性,半自动生化分析仪多采用此种滤光片。
光栅分光可分为全息反射式光栅与蚀刻式凹面光栅两种。
前者就是在玻璃上覆盖一层金属膜后制成,有一定程度得相差易被腐蚀;后者就是将所选波长固定地刻制在凹面玻璃上,耐磨损、抗腐蚀、无相差。