分光光度计的使用PPT课件
6
未知
×.×××
绘制标准曲线:
吸
光
根据未知溶液(6 号
度 (A)
溶液)的吸光度从标准
曲线上查得试液浓度。
● ● ● ● ●
(Fe) / mg L1
原试液含铁质量浓度 = 查得的浓度 × 稀释倍数
查得
50 5
mg L1
实验报告格式
一、实验目的
………………………………………………………
分光光度计的使用
分光光度法的主要部件框架
通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光. 波长可调, 故选择性好, 准确度高.
光源
单色器
吸收池
检测系统
稳压电源
(1)分光光度计的主要部件
光源:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够 的光强度,稳定。
可见光区:钨灯,碘钨灯(320~2500nm) 紫外区:氢灯,氘灯(180~375nm)
×.××× ×.××× ×.××× ×.×××
6
未知
×.×××
五、标准曲线(图)
六、从标准曲线上查得的 (Fe) mg L1
七、原试液的
(Fe)
查得
50 5
mg L1
八、思考题
毛面
透光面
容 量 的
3/4
用镜头纸擦净透光面,
所有关于吸收池的操作 均在实验台面之上的空 间进行,这样可保证一 旦吸收池滑落时掉在台 面上,不至于摔破。
不要将纸团成球, 不要来回擦, 而要向同一方向擦。
放入吸收池架(透光面向着透光窗一侧)。 放置顺序为:
透 光 窗
然后盖上盖子。
2号
1号 0号 遮光 黑体
指示器:
低档仪器:刻度显示 中高档仪器:数字显示,自动扫描记录
(2)分光光度计的类型
722型分光光度计结构方框图
光 分光 源 系统
吸收池
检测系统
分光光度计的使用
(1)选择波长
至所需波长
拧动此旋钮
(2)将测试溶液装入吸收池(操作如下) 手拿毛玻璃面, 先用待装液漂洗 3 遍, 装入量为吸收池高度的 3 / 4,
V磺基水杨酸/mL 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00
滴加氨水至黄色后再多加 4 mL 。定容、摇匀,测吸光度。
四、数据记录
编号
0
(Fe) / mg L1 0.000
吸光度(A) ×.×××
1
1.00
×.×××
2 345
2.00 3.00 4.00 5.00
单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。
棱镜:玻璃350~3200nm, 石英185~4000nm 光栅:波长范围宽, 色散均匀,分辨性能好, 使用方便
吸收池:(比色皿)用于盛待测及参比溶液。
可见光区:光学玻璃池 紫外区:石英池
检测器:利用光电效应,将光能转换成 电流信号。
光电池,光电管,光电倍增管
二、实验原理
………………………………………………………
三、实验步骤
编号
0 1 2345 6
V标准液/mL 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 0.00
V试液/mL VNH4Cl / mL
0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 5.00 4 4 4444 4
将 1、2 号吸收池换装入 3 、4 号溶液(黑体 和 0 号参比溶液不动),然后同法测定各溶液的 吸光度、并一一记录下来,记录格式如下表。
编号
0
(Fe) / mg L1 0.000
吸光度(A) ×.×××
1
1.00
×.×××
2 345
2.00 3.00 4.00 5.00
×.××× ×.××× ×.××× ×.×××
按“MODE”键至“ABSORBANCE”灯亮( 时转换到测吸光度功能上)。
将手柄向操作者方向再拉出一档(听到“咔嚓” 一声),此时被测(1 号)溶液进入光路。 此时仪器所显Байду номын сангаас的数值即为 1 号被测溶液的吸光 度值(记录下来)。
-0.01.80600
再拉出一档,仪器所显示的数值为 2 号溶液的吸 光度值。
将手柄向操作者方向拉出一档(听到“咔嚓”一 声),此时参比(0 号)溶液进入光路。
按一下“100% T”键, 此时仪器显示“BLA” 表示仪器正在自动校 正,校正完毕后显示 “100.0”。
1B0L0A.0
100% T
(5)重复(验证)(3)、(4)两步,直至透 射比为 0.000 和 100% 不变。
通过手柄将池架推到头, 此时黑体对着入射光。
(3)调节投射比为 0.000
按 MODE 键
至投射比(T)灯亮
按一下“0%”键,此时仪器自动校正后显示 “0.000”。 (有的分光光度计没有黑体,需要在打开试样 室盖(起黑体的作用)的情况下调 T = 0.000)
T 方式
“0%”键
(4)调透射比为 100%