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微生物遗传变异与育种

根据感受态建立的方式,可以分为: ①自然遗传转化 ②人工转化
(二)转导(transduction)
1.转导
➢细菌细胞间进行遗传交换的另一种方式,指通过缺陷噬菌 体的媒介,将供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中,通 过交换与整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象。
➢转导子:由转导作用获得部分新性状的重组细胞。 ➢转导噬菌体:能将一个宿主(细菌)的部分染色体或质粒 DNA带到另一个宿主(细菌)的噬菌体。
(一)转化(transformation)
1、转化
R型活菌+S型死菌→ →S型活菌 ➢定义:受体菌自然或在人工技术作用下直接摄取来自供体菌 的游离DNA片段,并把它整合到自己的基因组中,而获得部 分新的遗传性状的基因转移过程,称为转化。转化后的的受 体菌称为转化子(transformant)。 ➢有关名词:
2.转导的种类
➢普遍转导(generalized transduction):通过少数完全缺陷 噬菌体对供体菌基因组上任何小片段进行“误包”而将其遗 传性状转移给受体菌的现象。 ➢局限性转导:也称局限转导,指通过部分缺陷的温和噬菌 体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者的基 因整合、重组形成转导子的现象。 ➢溶源转变:当温和噬菌体感染宿主而使其发生溶源化时, 因噬菌体的基因整合到宿主的核基因组上,而使后者获得了 除免疫性以外的新性状的现象,称为溶源转变。
原生质体融合的优点: ➢ 可以提高重组率 ➢ 双亲可以少带标记或不带标记 ➢ 可进行多亲本融合 ➢ 有利于不同种间、属间微生物的杂交 ➢ 通过原生质体融合提高产量 发展点:有关原生质体融合的遗传机制,尚未研究清楚, 目前还在探索中。
➢细菌:G – 较为多见如E. coli等最为常见。 ➢放线菌:Streptomyces 、Nocardia。 ➢接合还可发生在不同属的菌种之间。 ➢E. coli的F因子:决定性别的质粒,属于附加体(episome), 可以通过接合作用获得,也可以通过丫啶类化合物、溴化乙锭 或丝裂霉素C的处理而消除。
(三)接合(conjugation)
➢定义:供体菌(“雄”)通过其性菌毛与受体菌(“雌”)相 接触,前者传递不同长度的DNA给后者,并在后者细胞中进行 双链化或进一步与核染色体发生交换、整合,从而使后者获得 供体菌的遗传性状的现象,称为接合。 ➢通过接合而获得新性状的受体细胞就是接合子(conjugant) ➢存在范围:
(6)巨大质粒:是近年来在根瘤菌属)中发现的一 种质粒,分子量为200-300×106Dalton,比一般 质粒大几十倍到几百倍,故称巨大质粒,其上有一 系列固氮基因。
第二节 基因突变
突变(mutation):指生物体表型突然发生的可遗传变化。
染色体畸变——细胞学上可以看到染色体的变化。
突变
包括:①缺失②添加(重复、插入)③易位④倒位 。
等方法
2、几种代表性质粒
(1)F-因子:又称致育因子或性因子。存在于肠细 菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球 菌等细菌中,决定性别。
(2)R因子:即抗性转移因子和抗性决定R因子。其 上带有其它抗生素的抗性基因,也称耐药性质粒。 该因子首先是在志贺氏菌中发现。
(3)Ti质粒:即诱癌质粒。存在于根癌土壤杆菌中, 可引起许多双子叶植物的根癌。当前,Ti质粒已 成为植物遗传工程研究中的重要载体。
重组可使生物体在未发生突变的情况下,也能产 生新遗传型的个体。
重组与杂交的关系:
重组是分子水平上的一个概念,可以理解成是遗传物质分 子水平上的杂交。
而一般所说的杂交则是细胞水平上的一个概念。 杂交中必然包含着重组,而重组则不限于杂交这一形式。
一、原核微生物的基因重组
基因重组的方式
转化 转导 接合 原生质体融合
第七章 微生物的遗传变 异与育种
学习目标:
1.掌握生物体的遗传物质及存在水平; 2.理解质粒的概念,了解常见的质粒; 3.理解基因突变的概念、类型与特点; 4.了解菌种衰退的防止方法与复壮方法; 5.了解菌种保藏的原理与常见保藏方法。
1、理想的工业发酵菌种应符合以下要求:
①遗传性状稳定; ②生长速度快,不易被噬菌体等异种微生物污染; ③目标产物的产量尽可能接近理论转化率; ④目标产物最好能分泌到细胞外,以降低产物抑制并利于分 离; ⑤尽可能减少产物类似物的产量,以提高目标产物的产量并 利于分离; ⑥培养基成分简单、来源广、价格低廉; ⑦对温度、pH、离子强度、剪切力等环境因素不敏感; ⑧对溶氧的要求低,便于培养及降低能耗。
第一节 遗传变异的物质基础
一、证明核酸是遗传物质基础的三个经典实验
(一)经典转化实验(transformation) F.Griffith,肺炎双球菌转化实验。
(二)噬菌体感染实验 (三)植物病毒的重建实验
二、遗传物质在细胞内的存在部位和方式
核酸存在的七个水平
➢细胞水平:存在于细胞核或核质体,单核或多核 ➢细胞核水平: 原与真核生物的细胞核结构不同,核外DNA ➢染色体水平: 倍性(真核)和染色体数。 ➢核酸水平:在原核中同染色体水平、存在部分二倍体 DNA或RNA,复合或裸露,双链或单链。 ➢基因水平:具自主复制能力的遗传功能单位,长度与信息 量,转录——翻译 ➢密码子水平:信息单位,起始和终止, ➢核苷酸水平:突变或交换单位,四种碱基。
b.形状变化的幅度大;
c. 变化后形成的新性状是稳定的,可遗传的。
饰变(modification):指不涉及遗传物质结构改变而只发 生在转录、转译水平上的表型变化。特点是:a.几乎整个 群体中的每一个个体都发生同样的变化;b.性状变化的幅 度小;c.因遗传物质不变,故饰变是不遗传的。引起饰变 的因素消失后,表型即可恢复。
功能:进行细胞间接合,并带有一些基因,如产生毒素、 抗药性、固氮、产生酶类、降解功能等。
重组:在质粒之间、质粒与染色体之间菌可发生。 存在范围:很多细菌如E.coli、lactis、根癌土壤杆菌等。 制备:包括增殖、裂解细胞、分离质粒与染色体和蛋白质
等成分、去除RNA和蛋白质等步骤。 鉴定:电镜观察、电泳、密度梯度离心、限制性酶切图谱
(4) Col因子:产大肠杆菌素因子。大肠杆菌素是 由E.coli的某些菌株所分泌的细菌素,能通过抑制 复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死其 它肠道细菌。
凡带Col因子的菌株,由于质粒本身编码一种免疫蛋白, 从而对大肠杆菌素有免疫作用,不受其伤害。
(5)降解性质粒:只在假单胞菌属中发现。它们的 降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码, 从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这 些质粒以其所分解的底物命名。
变,从突变株回到野生型的过程则称为回复突变 或回变。
三、基因突变的机制
本部分内容课内不进行介绍,有兴趣可以自学。P111.
第三节 基因重组
凡把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起, 经过遗传分子间的重新组合,形成新遗传型个体的 方式,称为基因重组(gene recombination)或遗传 重组,简称重组。
并因而成为必须在培养基中添加某种物质才能生长的突变 类型。 发酵突变型——丧失产生某种生物合成酶能力的突变型。 抗性突变型——因突变而产生了对某种化学药物或致死物 理因子的抗性。 条件致死突变型——突变后在某种条件下可正常生长繁殖, 而在另一条件下却无法生长繁殖的突变型。 抗原突变型——因突变而引起的抗原结构发生改变。 产量突变型——
三、原核生物的质粒
1、质粒基础知识 定义:是一类小型闭合环状核外双螺旋DNA分子,
能独立于细胞核进行自主复制。 大小:约为2-100×106Dalton,上面携带有数
个到数十个甚至上百个基因。
性质:
①可以在细胞质中独立于染色体之外独立存在(游离态),也可 以通过交换掺入染色体上,以附加体的形式存在;
★依突变发生方式分为:
1、自发突变:环境因素的影响,DNA复制过程的
偶然错误等而导致。一般频率较低,通常为106109 。
2、诱变:某些物理、化学因素对生物体的DNA进 行直接作用,突变以较高的频率产生。这些理化 因素称为诱变剂。
★按是否比较容易、迅速地分离到发生突变的细胞来分:
选择性突变株(selective mutant):具有选择标记(如营 养缺陷性、抗性突变型、条件致死突变型),只要选择适当 的环境条件,如培养基、温度、pH值等,就比较容易检出和 分离到。
3、遗传与变异的概念
遗传和变异是生物体的最本质的属性之一。
遗传(heredity):亲代生物的性状在子代得到表现;亲 代生物传递给子代一套实现与其相同形状的遗传信息。 特点:具稳定性。
遗传型(genotype):又称基因型,指某一生物个体所含有的
全部基因的总和;是一种内在可能性或潜力。
遗传型 + 环境条件 代谢
2、研究微生物遗传学的意义
微生物是研究现代遗传学和其它许多主要的 生物学基本理论问题中最热衷的研究对象。
对微生物遗传规律的深入研究,不仅促进了 现代分子生物学和生物工程学的发展,而且为育 种工作提供了丰富的理论基础,促使育种工作从 不自觉到自觉、从低效到高效、从随机到定向、 从近缘杂交到远缘杂交的方向发展。
非选择性突变株(non-selective mutant):无选择标记 (如产量突变型、抗原突变型、形态突变型),能鉴别这种 突变体的惟一方法是检查大量菌落并找出差异。
二、突变的特点
适用于整个生物界,以细菌的抗药性为例。 ➢不对应性:突变的性状与突变原因之间无直接的对应关系。 ➢自发性:突变可以在没有人为诱变因素处理下自发地产生。 ➢稀有性:突变率低且稳定。 ➢独立性:各种突变独立发生,不会互相影响。 ➢可诱发性:诱变剂可提高突变率。 ➢稳定性:变异性状稳定可遗传。 ➢可逆性:从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突
(四)原生质体融合——protoplast fusion
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