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世界10年克隆研究之路
1996年 第一只成年体细胞克隆羊“多利” 诞生 1997年 一头用胎盘克隆而成的荷兰牛亮相。 1998年 两头由母牛细胞克隆而成的小牛在东京出生。
一个国际研究小组宣布克隆出了三代实验鼠
2000年 曾参与克隆“多利” 羊的英国公司培育了第一 批克隆猪
2001年 一头稀有品种的克隆亚洲牛诞生，两天后死亡。 2002年 法国研究人员克隆出兔子2003年 美国科学家推
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▪课堂讨论
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▪ 问题1：
克隆人是不是正常的人？怎样看待 克隆人？
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▪ 不管克隆技术怎样发展，克隆人怎样产生， 都是人，与被克隆人实质上是存在着年龄 差的同胞胎。克隆人生出来就是一个与常 人无异的人。
▪ 然而，正是这一点让人们觉得很难应对克 隆人出现的伦理关系。
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罗斯林研究所科学家取一头 普通白绵羊的乳腺细胞，将 细胞核移植到一个剔除了细 胞核的卵子中，使之融合、 分裂、发育成胚胎，然后移 植到第三头羊的体内。科学 家共培育277个胚胎，只有 多莉成功出生。1996年7月5 日，多莉降临人世。直到 1997年2月23日才公布于众。
▪ 他或她将如何度过自己不平凡的一生？
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（2）遗传、疾病问题
▪ 克隆动物夭折率高，不少克隆动物天 生患有疾病或体形过大。
▪ 克隆动物没有遗传物质的交流和互补， 将会加剧一些遗传疾病的发生。
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（3）社会、伦理学问题
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A社会关系
▪ 父子？兄弟？ ▪ 母亲？ ▪ 归属感？
B——人+动物？
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把人类皮肤细胞核移植到家兔的卵母细胞里
2003.2.14日苏格兰向外界宣布：多 莉因早衰并患有肺炎，被迫实施了安 乐死。由于早衰问题，人们怀疑“多 莉是穿着羔羊服装的老羊” 。
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▪ 技术路线：
芬兰多塞特白品种绵羊 苏格兰黑面母绵羊
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具体操作
▪ 取处于后三分之一妊娠期的6岁母绵羊（芬 兰多塞特白品种绵羊）的乳腺细胞作核供 体细胞，用“饥饿法”使其进入休眠状态 而使全部基因具有活性。
动物克隆技术
(CloningTechnology)
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1 .概述
2.动物克隆的发展历史
3.克隆的基本过程。
4.克隆动物的研究价值和发展趋 势
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一、概述
1.1“克隆”的定义
是指由一个动物经无性繁殖（asexual reproduction）或孤雌生殖而产生的多个具有与 亲本相同遗传信息的同质性后代，包括孤雌激活 生殖、卵裂球分离与培养、胚胎分割以及核移植 等。
▪ 将新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6 天后发育成桑椹期胚胎或囊胚（8－16个细 胞），再移入假孕母羊子宫内。
▪ 产下多莉即为6岁母羊的复制品，也为白色。
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使用最多的克隆方法 ——胚胎细胞克隆
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3.克隆的基本过程
▪ 动物克隆技术的核心是核移植。 ▪ 核供体动物的选择与细胞核的获得。 ▪ 核受体动物的选择与细胞核的移出。 ▪ 供体核的移入及原核的取出。 ▪ 胚泡的体外试管培养。 ▪ 代母的选择与胚泡移入子宫。 ▪ 克隆动物的体内发育与出生。
出了一匹克隆骡
爱荷华州的研究人员称他们克隆出了一头濒临灭 绝的爪哇 野牛
2004年 美国加利福尼亚的一家公司培育出了第一只克隆 猫。这只猫后来成为第一只被卖出的克隆宠物。
2005年 韩国科学家宣布他们培育出了首条克隆狗叫“斯 纳皮”
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世界第一只克隆宠物
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最早培育出的克隆动物
▪ 1952年，美国人罗伯特•布里格斯和T.J.金 对豹蛙发育到胚囊期的胚胎细胞做移核试 验，成功地获得了一个可以摄食的豹蛙幼 体。
▪ 1958年到1962年，英国剑桥大学利用爪蟾 原肠内胚层细胞核移植，培育出可育的非 洲爪蟾。
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里程碑式的突破
▪ 1996-1997年伊斯维姆.穆特成功制造首只体 细胞克隆动物“多莉”羊的成功证明了成 熟的体细胞也具有全能性。
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4.克隆动物的研究价值和发展趋势
▪ ①应用克隆技术，繁殖优良物种 ▪ ②建造动物药厂，制造药物蛋白。 ▪ ③建立实验动物模型，探索人类发病
规律。 ▪ ④克隆异种纯系动物，提供移植器官。 ▪ ⑤拯救濒危动物，保护生态平衡。
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有关克隆动物与人存在 的问题
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（1）技术不成熟
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2.动物克隆的发展历史：
1938年，德国胚胎学家汉斯·斯皮曼建议用成年的细 胞核植入卵子的办法进行哺乳动物克隆。 1952年，运用斯皮曼的构想，出现世界上第一只克 隆青蛙。 1962年，美国的发育生物学家约翰·格登宣布他用一 个成年细胞克隆出一只蝌蚪，从而引发了关于克隆 的第一轮辩论。 1984年，英国剑桥大学生物学家斯蒂恩·威拉德森用 胚胎细胞克隆出一只羊。这是第一例得到证实的克 隆哺乳动物。
▪ 注射促性腺激素GN促使母羊（苏格兰黑面 母绵羊）排卵，28－33小时取其未受精卵 快速去核，放入10%FCS（小牛血清）、 1%FCS和0.5%FCS连续5天，饥饿使进入 G0期做受体细胞。
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▪ 在乳腺细胞注射GN34－36小时后与无核卵 放入同一培养皿中，在微电流作用下，将 乳腺细胞核融入卵中，形成一个含有新遗 传物质的卵细胞。
▪ 得到的克隆动物具有极大的偶然性和随机 性。迄今为止，克隆试验的成功率始终很 低。例如，在培育多莉的过程中，科学家 共克隆出２７７个绵羊还不能重复，更不能 肯定克隆多莉羊的方法也适用于其它动物 或其它不同组织器官的细胞。
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根据核卵供体的来源不同可分为胚胎细胞克隆动 物和体细胞克隆动物两种。
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1.2.理论基础
细胞全能性
个体某个器官或组织已 经分化的细胞在适宜的 条件下再生成完整个体 的遗传潜力。
尚未分化的胚胎细胞具有全能性。基于 这种认识，人们采用胚胎分割及胚胎细 胞核移植技术成功克隆出了许多动物。
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