[学生用书P17～P18]1．下列可以作为自养微生物氮源的是()A．N2、尿素B．牛肉膏、蛋白胨C．尿素、酵母粉D．铵盐、硝酸盐解析：选D。
自养微生物需要吸收的是自然界无机物，包括无机碳源和无机氮源。
虽然N2可以被固氮菌直接利用，但是固氮微生物不属于自养型微生物。
2．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是()A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．等培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固5～10 分钟后将平板倒过来放置解析：选A。
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。
牛肉膏容易受潮，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。
待培养基冷却至50 ℃时，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。
平板冷却凝固(大约需5 min～10 min)后还需要倒置。
3．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针D．接种针、手、高压锅解析：选C。
此题考查学生对无菌技术的掌握。
高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。
用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。
火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。
4．(2011年临沂高二检测)能够测定样品活菌数的方法是()A．稀释涂布平板法B．直接计数法C．重量法D．比浊法解析：选A。
利用稀释涂布平板法能够在不影响生活的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来，并可以繁殖形成菌落，可根据菌落数测定样品活菌数。
5．下列有关平板划线接种法的操作错误的是()A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连解析：选D。
为了避免杂菌污染，蘸取菌液和划线要在火焰旁进行；每次划线之前都需灼烧灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。
灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高，杀死菌种。
在平板划线时不要将最后一区的划线与第一区相连。
6．(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑__________、__________和渗透压等条件。
由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、__________、__________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行__________(消毒、灭菌)；操作者的双手需要进行清洗和__________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________________________________________________________________________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的__________。
(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的__________。
(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
对于固体培养基应采用的检测方法是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过__________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
解析：(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。
(2)灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌，消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。
(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合。
(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。
(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。
(6)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
答案：(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌(紧扣教材，思考感悟)1．无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？(教材P15)答案：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2．请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
(教材P16)(1)培养细菌用的培养基与培养皿。
(2)玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。
(3)实验操作者的双手。
答案：(1)(2)需要灭菌；(3)需要消毒。
培养基用高压蒸汽灭菌，培养皿、玻璃棒、试管、烧瓶、吸管可以采用干热灭菌法，实验操作者的双手可以用酒精擦拭。
3．培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度？(教材P17)答案：可以通过用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
4．为什么需要使锥形瓶口通过火焰？(教材P17)答案：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
5．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？(教材P17)答案：平板冷凝后，皿盖会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
6．在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？(教材P17)答案：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
7．为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？(教材P18)答案：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种；需要；划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
8．在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？(教材P18)答案：以免接种环温度太高，杀死菌种。
9．在作第二次以及其后的划线操作时为什么总是从上一次划线的末端开始划线？(教材P18)答案：划线后，线条末端的细菌数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
10．涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。
结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？(教材P19)答案：酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。
1．关于微生物的营养，说法正确的是()A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的无机物仅提供无机盐D．无机氮源也可能提供能量解析：选D。
此题考查我们对微生物的营养和能源的理解。
对一些微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。
CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。
CO2和N2是无机物，也是微生物的碳源和氮源。
硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。
2．(2011年宿迁高二检测)微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()A．细菌的大小、形状、颜色B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛D．培养基的不同解析：选B。
微生物的鉴别和分离，一般要用固体培养基，由于不同微生物在固体培养基上长出菌落的形状颜色等各不相同。
所以可以作为鉴别的标准。
因为每一个细菌细胞很小。
肉眼无法看到其颜色形状等。
3．下列关于配制培养基的叙述，正确的是()A．制作固体培养基必须加入琼脂B．加入青霉素可得到放线菌C．培养自生固氮菌时不需要氮源D．发酵工程一般用半固体培养基解析：选C。
固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的凝固剂，但不是唯一的；青霉素可抑制细菌和放线菌的生长；发酵工程一般用液体培养基。
自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故培养基配制时不需加氮源。
4．在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为()①溶化②调pH③加棉塞④包扎⑤分装⑥称量A．①②⑥⑤③④B．⑥①②⑤③④C．⑥①②⑤④③D．①②⑤④⑥③解析：选B。
上述步骤中，培养基的配制顺序为称量→溶化→调pH→分装→加棉塞→包扎。
5．下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是()A．大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状的DNA分子B．在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源C．用大肠杆菌作工程菌生产干扰素时，应及时添加核酸等生长因子D．处于对数期的大肠杆菌，常作为生产用的菌种和科研的材料解析：选D。
大肠杆菌以二分裂的方式进行繁殖；在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌存在分解葡萄糖的组成酶，分解葡萄糖的组成酶一直存在，只有葡萄糖分解完后，乳糖才能诱导产生分解乳糖的诱导酶，所以大肠杆菌首先利用葡萄糖作碳源；大肠杆菌的生长不需要生长因子；处于对数期的大肠杆菌生长繁殖活跃，代谢稳定，常作为生产用的菌种和科研的材料。
6．下面对发酵工程中灭菌的理解不．正确的是()A．防止杂菌污染B．消灭杂菌C．培养基和发酵设备都必须灭菌D．灭菌必须在接种前解析：选B。
灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节，A项是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种；整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌)，所以A项是正确的；B项是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物；C项是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；D项是正确的，因为发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。