血清尿素氮的测定
目的要求
了解血清尿素氮测定的方法及 临床意义。
复习尿素的生成机理及其意义。
实验原理
血清（或血浆）中的尿素，在尿素氮试 剂的酸性环境中与二乙酰-肟（DAM）共 沸后，可缩合成一红色化合物，称为 fearon反应。其颜色的深浅与血清（或 血浆）中尿素的含量成正比，与同样处 理的尿素氮标准液比色，即可测算出血 清（或血浆）中尿素氮的含量。
4. 吸管必须校正，使用时务必注意清洁干净， 加量务必准确。
5.尿液中的尿素氮也可用此法进行测定。由 于尿液中尿素氮含量高，标本需用蒸馏水以 1:50稀释。如果呈色后吸光度仍超过本法的 线性范围，还需将尿液再稀释，重新测定。
思考题
血清尿素氮测定的方法及临床意 义。
作品欣赏 谢谢观看！
实验材料
1.器材 刻度吸管（0.1ml、2ml、 10ml） 恒温水浴箱 分光光 度计
2.试剂 （1）待测血浆 （2）尿素氮试剂 （3）二乙酰-肟试剂 （4）尿素氮标准液
操作步骤
取试管三支按下表操作
试管 测定管 试剂（ml） 1：4稀释血清（或血浆） 0.1
标准管
空白管
尿素氮标准液
0.1
（0.02mg/ml）
蒸馏水
0.1
二乙酰-肟
0.5
0.5
0.5
尿素氮试剂
5.0
5.0
5.0
混匀，置沸水浴中加热15min，立即用自来水冷却5分钟。 分光光度计选用540nm波长，以空白管调零点，读取各 管吸光度。
计算及结果分析
尿素（mg%）=
测定管吸光度 ×尿
标准管吸光度
素氮标准液浓度*5(mg/ml；mg/100ml)
注意事项
1. 此法灵敏度高，用量极微（一般只需 0.02ml血清即ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ）。本实验是先将血清用生 理水以1：4加以稀释再取0.1ml，故最后计 算时，应乘以稀释倍数“5”
2. 试剂中加入硫胺脲和镉离子，可增进显色 强度和色泽稳定性，但仍有轻度褪色现象 （小于5%/h）。
3. 此法操作简单，特异性强，不受其他非蛋 白质含氮化合物如尿酸、肌酸等影响，但应 控制好实验条件。