细菌的接种和注意事项终极版
G-杆菌,细长略 弯曲。不透明, 灰黄色菌落,在 血平板上可产生 氨味。本菌氧化 酶阴性,与大多 数假单胞菌不同。
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铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌
在普通琼脂培养基
上能产生水溶性绿
色素,使整个培养 基变为绿色
菌落灰绿色、半透 明、大而扁平、表 面湿润、边缘不齐; 有金属光泽;有生 姜样芳香气味;菌 落周围有宽大的兰 绿色透明溶血环。
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肺炎链球菌、A群、B群的区分:
Opt试验
+
-
抑菌环>14, 杆菌肽试验
鉴定为肺链 +
-
A群 CAMP试验
+
B群
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Opt实验
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杆菌肽实验
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葡萄球菌与链球菌的鉴别:
▪ 1.涂片—涂片革兰染色,葡萄球菌呈葡萄 串样,链球菌呈链状。
▪ 2.M-H试验—当染片不能区别时,接种到 M-H平板,长成菌落之后,可挑单个菌落 做触酶试验,+是葡萄球菌,-是链球菌。
乙型(β型)溶血性链球菌,产生强烈的 溶血毒素,在血平板上可使菌落周围出现2~ 4mm的无色透明溶血环。
丙型(r-)链球菌,菌落周围无溶血环,又 叫不溶血性链球菌,通常不致病。
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肺炎链球菌
菌落特点:在血平板上
0.5~1.5mm,灰白色半透 明,表面光滑,扁平, 周围环绕草绿色溶血环, 培养放置24h以上的菌落, 还会因为产生自溶酶的 作用,而致菌落中央塌 陷而边缘隆起,呈脐窝 状。
三区:由二区引出三四次,但
三区面积最大
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❖CO2在细菌培养中 的意义
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在细菌室的培养箱上有一个CO2的 开关,为什么要用CO2呢?
❖ 1有些细菌在初次分离培养时,需要5﹪-10﹪ 的CO2。因为细菌在生长过程中能够分解培养 基中的某些含氮物质产生氮,对该菌有杀灭作 用,而CO2能中和细菌产生的氮,以减少对细 菌的毒性。如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛 布鲁菌等。
相邻菌落容易 发生融合
可挑出长丝状 细丝
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变形杆菌
迁徙生长
菌落特点:
G-,两边钝圆,有明显 的多形性,呈球形或丝 状,无芽胞无荚膜,有 鞭毛,运动活泼。普通 变形杆菌和奇异变形杆 菌的大多数菌株呈迁徙 扩散生长,迅速弥漫。 波纹状薄膜布满整个培
养基表面。
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嗜麦芽假单胞菌
菌落特点:
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流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌
在巧克力平板上生 长,菌落为灰白色, 扁平,半透明的小 菌落
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卫星现象:
当流感嗜血杆菌与 金黄色葡萄球菌一 起培养时,靠近葡 萄球菌菌落附近可 见到流感嗜血杆菌 菌落较大,远离葡 萄球菌的菌落较小, 称为卫星现象。
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❖ 2.为细菌提供碳源,促进细菌的生长。如肺炎 链球菌,草绿色链球菌。
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常见细菌的鉴别及其特点
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阳性球菌
▪ 葡萄球菌---金黄色葡萄球菌
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金葡特点
1. 是人类化脓性感染最常见的病原菌, 可以引起局部感染,也可以引起全身感 染。
2. 血浆凝固酶,阳性。 3. 血平板上呈黄色菌落,大而凸起,表
细菌的接种及 注意事项
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灭菌接种环
❖1.要充分灭菌接种环,以免污染其 标本 。
❖2.要适当冷却再取标本,以免带不 出标本中的菌种。
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取标本
❖1.蘸取标本时应适量,以免标本 太少漏检。
❖2.液体标本,如尿液,应注意混 匀。
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接种
1.细菌的接种方法有很多,如平板划线
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链球菌
常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草 绿色链球菌、肺炎链球菌 。
根据抗原结构不同可以把链球菌分为A、 B、C、D等二十个群,但对人类有致病性的 大多数属于A群,少量属于B群。
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根据在血平板上溶血分为以下三种:
甲型(α型)溶血性链球菌,又称草绿色 链球菌,菌落周围有草绿色溶血环,致病力弱, 是条件致病菌。
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肠球菌
肠球菌属特点:G+,成圆球形或椭圆形,单 个,成对,或短链,均可。
在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑, 0.5~1.0mm大小的菌落,可有溶血现象。
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以粪肠球菌和屎肠球菌为常见:
阿拉伯糖 屎肠球菌 阳性 粪肠球菌 阴性
山梨醇 阴性 阳性
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阴性杆菌
▪ 大肠杆菌:G-杆
菌,有鞭毛、菌毛, 无芽胞。菌落 2பைடு நூலகம்3mm,圆形凸起, 灰白湿润,光滑半 透明,边缘整齐。 某些菌落可产生有 透明溶血环。
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鲍曼不动杆菌
菌落特点: 圆形、凸起光滑、边 缘整齐不透明、灰白 色 有粘性的菌落 多数菌落不溶血 在中国兰上为粉红色 菌落
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肺炎克雷伯杆菌
菌落特点:
较大菌落、凸 起、灰白色黏 液型、
面光滑,有β溶血环。 4. G+阳性球菌,葡萄状排列,无芽孢,无
荚膜。
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▪ 葡萄球菌---表面葡萄球菌
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表葡特点
1正. 常存在于人体皮肤、黏膜表面,多 见于院内感染,如体内异物留置,静 脉导管等 2.血浆凝固酶,阴性 3.
3.表葡形态同金葡相似,但是为白色、 扁平菌落,无溶血环
法、斜面接种法、穿刺接种法,等等。
但我们用的最多的是:
★平板划线法—意义
指把混杂在一起的微生物,用接种环在平板
培养基表面,通过分区划线,稀释得到较多
的独立分布的单个菌落,即将样本在固体培
养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的
目的。
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一区:所占区域大约是平板面 ★积的1/5~1/4
二区:由一区向 二区带出三四条 平行线