痰培养标本培养前规范
实验室在接种前必须作痰涂片革兰染色当 在低倍镜下白细胞小于10个每视野、上皮 细胞大于25个每视野时应作为不宜作培养 的标本
当白细胞小于10个每视野，上皮细胞小于 25个每视野时再参照油镜观察标本中细菌 分布作判断；
痰培养标本培养前规范
当标本中细菌种类超过3种以上，未见到纤 毛柱状上皮细胞，作为不合格标本；
标本
从扁桃体和后咽部采集标本的咽拭子
选择性培养基（如表1）
5%羊血琼脂 含抗生素的Thayer Martin 琼脂（GC+）和无抗生素的
<GCO>(仅用于淋病奈瑟菌病例) 巧克力琼脂（仅用于会厌炎和喉气管炎病例）
质量控制
培养基使用之前，QC由培养基组负责。
上呼吸道标本处理程序
培养程序
下呼吸道标本的处理
下呼吸道标本培养的常见病原菌
革兰阳性菌 革兰阴性菌
金黄色葡萄球菌 化脓性链球菌 肺炎链球菌
脑膜炎奈瑟氏菌 流感嗜血杆菌 肠杆菌科细菌
结核分支杆菌
非发酵菌
白喉棒状杆菌
嗜肺军团菌
假丝酵母菌
下呼吸道标本的处理
质量控制
培养基使用之前，QC由培养基组负责。
操作程序
肉眼观察 记录痰标本的外观并记录在申请单背面。 外观描述及简写如下：
培养程序
1. 水样痰标本
直接接种到培养基，并划线分离
2. 脓性标本（特别是痰）-匀浆化 3. Sputasol（OXIDE）的配制 4. 无菌操作下，取瓶中的液体1.5ml，加入到18.5 ml无菌水
中。无菌条件下2-8℃至少稳定48小时
痰液化的常规操作程序。
• 痰液中加入等体积的稀释后SPUTASOL • 旋涡振荡标本20-30 s， 并置室温15分钟 • 再次旋涡振荡是标本达到进一步液化。准备立即接种标本。 • 用拭子取混悬液到培养基，并划线。
2. 尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱 穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养
3. 便标本厌氧培养标本采集;可用排出的便 作厌氧培养但也应少与空气接触。
第二部分标本培养前规范草案
合格的标本是培养成功的最重要的因素， 实验室有权利对不合格提出终止检查或要 求重送标本的要求，因此实验室必须建立 标本接种前的质量控制和标本合格的检测。 要求对除血液外的标本均作涂片革兰染色 检查，用于评价标本的质量和区别分离细 菌是定植菌或致病菌。
5. 支气管灌洗液（BAL）的定量培养 6. 旋涡振荡BAL并用0.01 ml定量接种环接种到平板上。
放置在5%CO2培养箱内
您可能每天面临以下问题的挑战
痰标本分离出4种细菌做哪一 种细菌的药敏试验？
数量很多的凝固酶阴性葡萄 球菌在痰里分离出来是否要 做药敏?
临床微生物实验室规 范操作草案
草案分七部分
痰标本的采集和运送条例
1. 标本采集时间：用抗生素前；晨痰; 2. 采集方法： （1）自然咳痰：用清水漱口3次，应包括
咽喉部，用力咳出痰，与灭菌容器中或输 送培养基中。
痰标本的采集和运送条例
（2）帮助咳痰：不易获得痰的患者可雾化吸入加 温的氯化钠（45℃10％氯化钠水溶液）
（3）支气管镜或支气管毛刷：由医生采集，建议 直接种入输送培养基。
在1/6琼脂表面用力滚动拭子，并划线分离。 在一区用接种针穿刺血平板几次。（图1） 把平板放置在5%CO2培养。
下呼吸道标本的处理
大多数标本需要在安全柜内操作
常规细菌培养
原理
下呼吸道感染包括支气管炎，细支气管炎和 肺炎。以上炎症，特别是肺炎，可以引起严 重甚至是致命的疾病。虽然病毒，支原体， 立克次(氏)体和真菌都可以引起下呼吸道感 染，但细菌是主要的病原体，其所占的比例 要比上呼吸道感染要高很多。
唾液（S） （W）
带血 （BS） 粘液状（M） 水样
粘液脓性的（MP） 脓痰（P）脓性粘液痰（PM）
拒收“唾液”标本并报告“标本不适合用于进一步处 理”“请重留”
ห้องสมุดไป่ตู้
下呼吸道标本的处理
显微镜检
用拭子取所有类型标本的脓液部分涂片， （最好在60度热固定涂片2小时），并 准备革兰染色
低倍镜下检查涂片（10倍目镜）；定量 计数10个视野下鳞状上皮细胞和白细胞 平均数。按照表1分级标准记录在工作 表上。
低倍镜下细胞计数（10个视野平均数）
倍数
0 偶见 1+ 2+
3+
上皮细胞×100 无
<10 10-25
>2 5
WBC ×100
无 <25 / 25-75 >80(或四分之一视野> 20)
如果标本要求革兰染色，在100倍目镜下 检查病原体并记录在工作表上
对涂片显示上皮细胞占优势，（3+）丢 掉标本并报告“涂片显示口腔正常菌群 污染”“标本不适合用于进一步处 理”“请重留”
（4）胃内采集痰标本：婴幼儿不会咳痰而且常把 痰误咽入胃中。可在清晨，用胃管插入胃内，用 注射器抽出胃液。
（5）小儿采集痰标本：用压舌板刺激咳嗽使肺部 和器官的分泌物喷出，用拭子采取标本送检，如 不能立即送检应种入输送培养基。
厌氧培养标本采集规范条例
1. 痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管 穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不 能用于厌氧培养。
如见到数量不等的白细胞或纤毛柱状上皮 细胞或两者同在，含1-2种不同细菌，可考 虑继续培养，结果可根据病情再作分析；
标本采集和运送的规范条例 培养前标本质量检测规范 标本接种规范条例 细菌鉴定基本流程规范条例 细菌药物敏感试验规范条例 实验室质量控制 细菌报告规范条例等
第一部分 标本采集和运送
标本采集和运送是细菌培养成功的最重要 的关键!
但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人 自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且 不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是 阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题， 为此建议来一次革命，用输送培养基代替传统的 标本的容器。
内容简介
上呼吸道标本标准操作程序（SOP） 下呼吸道标本标准操作程序（SOP） 痰标本的规范化操作（草案）
上呼吸道标本处理程序
大部分步骤需要在生物安全柜内接种 细菌性咽炎的实验室诊断 原理
大多数上呼吸道感染是由病毒引起的。细菌性咽炎经 常是由化脓性链球菌引起。但重度的会厌炎和喉气管 炎则是例外，其一般是由于b型流感嗜血杆菌引起。