课堂反馈练习
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 --------------------（ A ）
A．细胞系 C．原代细胞 B．细胞株 D．传代细胞
讨论
1、动物细胞培养的原理是什么？
2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并 解释原因。
3、组织分散成单个细胞的方法是什么？ 其理论依据是什么？
4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？
阅读课本 观察图片， 简述动物 细胞培养 的基本过 程
2、过程
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞 制成 悬浮 物的组织、器官 剪碎 液 细胞系 原 细 细胞株 部分细胞“癌变”， 代
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细 胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞株 细胞系 遗传物质改变
细胞 悬浮 液
10代 细胞
50代 细胞
传代培养
无限传 代
原代培养
多数组织细胞固定在表面生长和分裂。
思考讨论
1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因。
细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。
问题： 1、培养基的类型
（1）天然培养基：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件
2、动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组织培养基有何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生 素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞 大都生活在液体的环境） 2、成分中有动 物血清等
细胞贴壁过程
3.有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。 培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。 • 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞 悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养， 称为传代培养。 • 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞， 大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这 种传代细胞为细胞株。 • 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状 态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养 条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 • 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具 有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
遗传物质改变，无 限传代
加培养液
培 养
胞 贴 壁
细胞 动物细胞培养不能 最终培养成动物体
50代细胞
剥离、分瓶
10代 细胞
传代培养
动物细胞生长特性
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞 就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑 制。
拓展---动物组织或细胞培养的难易程度
幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞 分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞 肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞
2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大 的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合 用于药物测试、基因表达等实验研究。 3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对 取出的动物组织进行处理？ 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.
பைடு நூலகம்
课堂小结
动物细胞和组织培养（原理、材料 选择及原因、一般过程、培养条件、 主要应用）
注意： ①概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、 细胞系 ②胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 ③动物细胞培养和植物组织培养的区别
思考与探究： 如何用细胞培养技术，为烧伤病 人植皮？
取该患者的皮肤进行
细胞培养,获得足量的细 胞后再移植
动物细胞工程
—动物细胞与组织培养
烧伤病人图片
异体皮肤移植图片
动物细胞工程 的基础
动物细胞培养
动物 细胞 工程 技术 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 体细胞克隆
动物细胞培养
1、概念（人教版）
动物细胞培养就是从动物机体中取出 相关的组织，将它分散成单个细胞，然后， 放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和 繁殖。
进一步思考：
①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？
否 ②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什 么成份？ 胰蛋白酶水解蛋白质 蛋白质 ③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 蛋白质和磷脂 能
④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个
细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与 胰蛋白酶的最适PH较接近
多细胞动物和人体的细胞 都生活在内环境中，根据你所 学的知识，认为体外培养细胞 应该模拟内环境的哪些内容呢？
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、 嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。） 3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度 4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 保证细胞顺利的 生长增殖
植物组织和动物细胞培养的比较
比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 植物组织培养 动物细胞培养
细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物 激素 植物体 快速繁殖、培育 无病毒植株等
细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动 物血清 细胞株、细胞系 获得细胞 或细胞产物
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体） • 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断 某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据