定 交叉配血方法 日常工作中问题对策
Rh血型系统
Du比正常D阳性细胞抗原弱，但一旦输给 Rh阴性的受血者后，自然有免疫产生抗D的 可能。同时Du型人者接受Rh阳性的细胞后， 也有可能产生抗D抗体。
作为供血者，Du型归类为Rh阳性， 作为受血者Du型归类为Rh阴性者。
PEG-IAT
原理：PEG（聚乙二醇）是一种水溶性的中性
多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入 PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的 抗体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合 物的形成。
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴
PEG溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水 洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。
红细胞抗体(1)
预期抗体：若已知红细胞ABO血型，按 Landsteiner´s法则可预知的ABO血型 抗体，即抗-A和抗-B。 预期抗体也叫做规则抗体
意外抗体：抗-A或抗-B以外的抗体。在ABO亚 型 中，变异的抗-A1或某种抗-B等抗体， 也称为意外抗体。 意外抗体过去也叫做不规则抗体
红细胞抗体(2)
间接抗人球蛋白试验(IAT) 在体外抗体致敏红细胞,用于抗体筛选和鉴定、交 叉配血、血型鉴定
酶试验
原理：蛋白水解酶可将红细胞表面的多肽链打断，使多
肽链带负电荷的唾液酸也一起离开红细胞表面，减少了 红细胞之间的排斥力，缩短了红细胞之间的距离，容易 产生凝集反应
程序：2滴血清、1滴2-5%红细胞，加入2滴酶，37℃
孵育15分钟，离心看结果。
注：酶会破坏一些抗原结构，如M、N、Fya、Fyb 等
影响输血效果的免疫血清学问题
速发型输血后溶血反应 血管内溶血
＞ 主要原因: ABO血型不和
迟发型输血后溶血反应 血管外溶血 主要原因: 针对红细胞抗原的同种抗体
聚凝胺试验
原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，
溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表 面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起 正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗 体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆； 无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解 散。
程序：按试剂盒说明书操作。
免疫血液学的传统方法
凝集实验和溶血实验 玻片法/试管法/微孔板法 抗人球实验
在抗原抗体反应中的去离子和低离子
盐水凝集法： 例如，ABO血型鉴定试验
包括玻片法、试管 法和微孔法
但灵敏度相对较低，只在 一些基层医院血库使用 低离子强度盐水法：
通过降低介质溶液离子 强度，减少红细胞膜外围的 离子云，促进红细胞凝集， 因而其灵敏度有所提高。
聚凝胺凝集法： 通过多聚季氨盐溶液提供大量正电荷来中和
红细胞表面负电荷，减少红细胞间的排斥，促 进红细胞凝集，其灵敏度有较大提高。此方 法目前在国内使用较多。（Rh,Duffy）
抗人球试验 - 检测 IgG
抗人球试验： 在盐水凝集法或低离子
强度盐水法的基础上，加 入抗人球蛋白抗体，通过 抗人球蛋白抗体的特异性 桥连作用，促进红细胞的 凝集。可分为直接和间接 抗人球试验。 K, k, Fya,
天然抗体：没有可察觉的抗原刺激，而机体对抗原免
疫应答的产物。天然抗体多为IgM抗体，能与含有相应 抗原的红细胞结合，在盐水介质中出现肉眼可见的凝集 反应，所以也叫盐水抗体。IgM抗体的最适反应温度为 0-25℃。
免疫抗体：抗原刺激机体而产生的。免疫抗体多为
IgG抗体，在盐水介质中只能致敏含有相应抗原的红细 胞，但不产生凝集，需要采用抗球蛋白搭桥、酶处理细 胞或聚凝胺介导等方法，才能产生凝集反应。IgG抗体 的最适反应温度为37℃。
LISS-IAT
原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接
近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用 抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液
后混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况， 用生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球 蛋白试剂，离心后判读结果。
４＋ ３＋
反应强度
4+ 3+ 2+ 1+
±
— 完全溶血 不完全溶血 混合凝集
２＋ ＋
±－Ｈ
完全
现象及说明
ＨＭ
不完全 混合凝集
红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面 大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部 红细胞复合物位于凝胶中下部
与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为±
Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, S, s, Lua, Lub
间接抗人球蛋白试验(IAT)
经典IAT LISS-IAT:试管法 卡 PEG-IAT 酶－IAT 聚凝胺－IAT
经典IAT
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，
37℃孵育45-60分钟，生理盐水洗涤3 遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。用抗体致敏 的红细胞检测试验结果的正确性。
红细胞完全沉积在凝胶管尖底部 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
抗人球蛋白试验(Coombs试验)
直接抗人球蛋白试验(DAT) 检测红细胞是否在体内被抗体或补体致敏,用于检 测自身免疫溶血性贫血、药物引起的溶血、新 生儿溶血病、溶血性输血反应
微柱凝胶技术(卡)
原理：微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶
颗粒具有分子筛作用，离心后，不凝集的 红细胞通过全程进入微管底部，而凝集的 红细胞则悬浮停留在颗粒中。
程序：按厂家说明操作
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝 试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）在微柱凝胶 管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下， 该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的 红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。