分析结果
按要求配制溶液
将溶液注入色谱仪，记录色谱图
整理数据，计算结果
分析结果
按浓度梯度配制溶液
将溶液注入色谱仪，记录色谱图
作线性图
分析结果
取线性3的溶液连续进样6次
整理数据，计算结果
分析结果
理论分析：按上述路线进行实验，理论上其实验数据是符合标准规定的，其专属性，溶液稳定性，回收率，重复性，精密度都应该是良好的，其峰面积与浓度也应该成线性关系。
国内外现状：头孢克洛是美国Lilly药厂于1975年进行开发，1979年FDA批准生产的口服抗生素，在当时，其含量测定的方法还没有明确规定，处于摸索阶段，中国药典也还没有收录此药物，一般其含量测定采用的几种方法有微生物等效法、碘量滴定法、羟胺比色法，但是这几种方法都存在着缺陷，数据较多，难以完成操作，缺乏专属性等。随着科技的进步和人类的不断探索，经过几十年的研究，头孢克洛的含量测定方法也逐步完善，美国2000年的指导分析方法和方法验证草案中就明确提出了药物申请时所需要提供的方法验证数据，分析方法在开发过程中要进行专属性，线性，检测限和定量限，范围，精度和准确度的评估。前几年，北美就已经开始使用分析方法与生产线相连，使用在线测定，用先进技术从大量的信息中提出有用的信息，其验证方法也包括了准确度、精确度、范围、线性、选择性/特异性、极限定量、对比测试验证等。由于我国医药行业起步较晚，头孢克洛在2010年才被收录进《中国药典》，当时对其含量测定的方法学验证内容还没有完善，直到2015年才明确提出其方法学验证包括的试验有哪些，其方法学验证内容也在逐步完善。
技术路线：
头孢克洛分散片含量方法学验证
专属性试验
溶液稳定性试验
重复性试验
回收率试验
线性试验
精密度试验
按要求配制溶液
将溶液注入色谱仪，记录色谱图
统计结果，分析结果
按标准配制溶液
选取几个时间点，将溶液注色谱仪，记录色谱图
整理数据，计算结果
分析结果
按要求配制溶液
将溶液注入色谱仪，记录色谱图
整理数据，计算结果
二、研究内容（具体研究/设计内容，重点解决的问题，预期结果）：
1.头孢克洛分散片的含量方法学验证的试验内容包括专属性、回收率、线性、重复性、精密度和溶液稳定性试验。利用高效液相色谱仪测定其溶液在264nm的波长下吸收峰面积的大小对其含量进行计算，从而确定其含量的大小是否符合规定。
2.重点解决的问题：通过对头孢克洛分散片的含量的方法学试验，考察其在变更原料厂家后其专属性、回收率、重复性、精密度和溶液稳定性是否变化太大，其不同浓度的溶液是否成线性，进而判断其含量的变化情况，从而判断变更原料的头孢克洛分散片中头孢克洛的含量是否符合规定，进而确定其质量标准。
[4]杜盛峰，杨直，茹城诚.高效液相色谱法测定头孢克洛分散片的含量[J].医药导报，2011，30（4）:516-517
[5]韩继永，倪善红，刘冬.HPLC法测定氯法拉滨有关物质及含量的方法学研究[J].齐鲁药事，2011,30（8）：446-448
[6]刘丽萍，曹德善.头孢克洛分散片的研制及其人体药动学的研究[J].江苏药学与临床研究，2002，10（4）：1-4
课题内容确定，听取具体指导，查阅相关文献，设计实验方案。
确定论文题目，收集相关文献资料，着手准备实验需要的设备与试剂。
完成毕业论文开题报告书，做好毕业论文的前期工作。
修改实验方案，开展实验阶段，收集实验数据。
处理实验数据，整理文献，撰写毕业论文。
毕业论文的最后整理与修改，定稿
毕业论文答辩，评定成绩，毕业论文总结。
计算：1.溶液稳定性试验：各个时间段峰面积与0h相比，计算差异，求RSD；
2.重复性试验：先求校正因子，根据校正因子求其含量，统计其含量的RSD；
3.回收率试验：先求校正因子，根据校正因子求其实际测得量，再根据实际测得量求其回收率；
4.线性试验：根据峰面积与浓度做线性，求得其回归方程和r值；
5.精密度试验：统计数据，计算其RSD。
发展趋势：随着国家政府对药品质量安全的日益重视，药品在申报时需提供的试验数据也越来越多，近几年《中国药典》在不断完善中，相信未来几年，国家将对药品质量测定的要求会越来越严格，其中方法学验证包含的试验也会越来越多，逐步向国外药物分析方法靠拢，将分析方法与生产线相连，达到准确把关药物的质量安全的目的。
参考文献
3.预期结果：
1、专属性试验和溶液稳定性试验：（1）系统适应性：头孢克洛峰与头孢克洛δ-3-异构体峰的分离度应≥1.5，头孢克洛峰的理论板数应≥1500；
（2）溶剂、辅料在对照品主峰的出峰位置无吸收；
（3）原料、供试品的主峰保留时间与对照品的保留时间一致；
（4）统计不同时间点的峰面积并与0h作比较，其峰面积变化率不得大于2.0%，且RSD%应≤2.0%。
2、回收率试验：以外标法计算不同系列浓度的主成分含量，计算每个浓度下主成分的回收率，回收率在98.0～102.0%。
3、重复性试验：统计6个样品主成分含量，6个供试品含量数据的RSD值不得大于2.0%
4、线性和精密度试验：（1）以峰面积A对浓度C作线性回归，求得线性回归方程，相关系数r应＞0.999；
[1]江月华，邢亚红.HPLC法测定头孢克洛颗粒中头孢克洛及其异构体[J].中国药物评价，2013，30（2）：86-88
[2]国家药典委员会编.中华人民共和国药典2015版第四部[S]．北京，中国医药科技出版社，
[3]崔健，夏振华.HPLC测定头孢克洛干混悬剂的含量[J].江苏药学与临床研究，2001，9（2）：16-17
五、工作基础及条件：
这个实验的开展是在我的实习单位珠海市金鸿药业股份有限公司的研究所分析实验室进行的。主要的仪器有岛津高效液相色谱仪，BSA224S电子分析天平，CPA225D电子分析天平，超声仪以及一些一般实验室常用的仪器。
该方法学验证实验所需的仪器在分析实验室都有，人力、物力都能满足该实验的开展。
实验方法和步骤：
1.专属性试验：按要求配制溶液，取其溶液20ul注入色谱仪，记录色谱图
2.溶液稳定性试验：按要求制备溶液，选取几个时间段，将溶液注入色谱仪，记录色谱图
3.重复性试验：配制6份样品溶液，分别将其注入色谱仪，记录色谱图
4.回收率试验：按要求配制不同浓度的溶液，分别将其注入色谱仪，记录色谱图
起止工作时间
预计答辩时间
指导教师的具体意见：（请对该选题的意义、创新性，研究内容、方案设计的合理性、可行性等进行综合评价，并出具建议同意开题/修改后开题/不同意开题的理由）
签名：年月日
系/教研室
审批意见
系/教研室
主任签名
四、创新之处：
头孢克洛分散片属于第二代头孢类抗菌素，在现今我国医药行业中应用十分广泛，同时，其药品安全也是人们最为关心的问题。对其进行方法学验证，相较于其普通的含量测定方法而言，具有使药品更加具有准确性，安全性，更能让人信服的特点，通过对头孢克洛分散片进行专属性、溶液稳定性、回收率、重复性、线性和精密度方法学验证，从多个方面查看该方法是否能准确测定分散片中头孢克洛的含量，使头孢克洛分散片真正做到含量达标，安全的目的。
（2）连续进样6次，所得RSD值应≤2.0%。
三、研究/设计方案（包括研究/设计方法、技术路线，理论分析、计算、实验方法和步骤及其可行性，可能出现的技术问题及解决办法）：
按照《中国药典》中头孢克洛分散片含量测定的方法，结合方法学验证指导原则，设计方案，分别进行专属性、溶液稳定性、重复性、回收率、线性和精密度试验，分析数据，通过方法学验证查看该方法是否适用于头孢克洛分散片含量测定。
目的：对头孢克洛分散片进行含量方法学验证，证明采用的方法适合于相应检测要求，确定所采用的方法能准确测定药品中头孢克洛的含量，分析方法经验证后，建立药品的质量标准；
意义：通过方法学验证，验证了头孢克洛分散片含量测定的检测方法是正确的，使该方法更具说服力，能够准确测定药物中头孢克洛的含量，保证了药物的安全性。
毕业论文（设计）工作计划
时间
工作内容
预期结果
2016.1.4至2016.1.15
2016.1.16至2016.2.20
2016.2.21至2016.3.23
2016.3.24至2016.3.30
2016.3.31至2016.4.20
2016.4.21至2016.4.30
2016.5.1至2016.5.15
本科毕业论文（设计）开题报告书
头孢克洛分散片含量测定方法学验证的研究
二级学院
医药化工学院
专业
应用化学（精细化工方向）
班级
12级（2）班
学生姓名
李晓碧
学号
1215511258
指导教师
关艳贞
2016年3月日
拟定的毕业论文（设计）题目
头孢克洛分散片含量测定方法学验证的研究
一、选题依据（包括目的、意义、国内外现状和发展趋势，主要参考文献）：
5.线性试验：按浓度梯度配制溶液，将溶液注入色谱仪，记录色谱图，根据峰面积与浓度作图
6.精密度试验：取上述线性3的溶液连续进样6次，记录色谱图
可行性：该方法学验证在现有的条件是可行的，药品是足够的，仪器和试剂都能满足该实验的开展。
可能出现的技术问题及解决的办法：在实验过程中，可能会出现有数据超出标准规定，或其不成线性关系。当出现这些问题时，要根据数据分析具体是什么原因造成的，是否是药品不适合用该方法测定，还是人为造成的，先重新实验，排除人为原因，再更改实验条件，重新实验。