当前位置:文档之家› 天根琼脂糖gel DNA回收试剂盒

天根琼脂糖gel DNA回收试剂盒

超薄型产品(吸附柱CA1)每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量为5 μg。 普通型产品(吸附柱CA2)每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量为20 μg。 使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于:
快速:整个操作过程快速方便,几十分钟即可完成回收工作。 多样:可以回收单链、双链 DNA 片段以及环状质粒 DNA。 高效:独特的离心柱和精心配制的缓冲液,保证最大量回收到高纯度的目的 DNA。
7. 为了提高 DNA 的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,重复 步骤 6。
CA1 柱的洗脱体积不应少于 20 μl,CA2 柱的洗脱体积不应小于 30 μl 过小影响回收效率。 洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内 (可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围),pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率;且 DNA 产物应 保存在-20℃,以防 DNA 降解。
注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1. 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。 2. 如下一步实验要求较高,则应尽量使用 TAE 电泳缓冲液。 3. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA 造成损伤。 4. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测 pH 值,如 pH 值大于 7.5,可向含
DP208/209-03 (200 次) 2 x 100 ml 50 ml 30 ml
20 个
50 个
200 个
20 个 1份
50 个 1份
Байду номын сангаас
200 个 1份
储存条件:
本试剂盒在室温(15–25℃)干燥条件下,可保存 12 个月;更长时间的保存 可置于 2–8℃。(注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放 置一段时间,必要时可在 37℃水浴中预热 10 分钟,以平衡溶液温度。)

操作步骤:
第一次使用前请先在 15 ml 漂洗液 PW 中加入 60 ml 无水乙醇! 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的 离心管中,称取重量。
2. 向胶块中加入 3 倍体积溶胶液 PN(如果凝胶重为 0.1 g,其体积可视为 100 µl, 则加入 300 µl 溶胶液),50℃水浴放置 10 分钟,其间不断温和地上下翻转离心 管,以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块,可再补加一些溶胶液或继续 放置几分钟,直至胶块完全溶解 (若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块)。
TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD Order: 010-82629288 Technical: 010-62521767 62526072 Toll-free: 800-810-2177
超薄/普通 琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒
(离心柱型) 目录号:DP208/209
4. 向吸附柱中加入 700 μl 漂洗液 PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇), 13,000 rpm 离心 30 秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5. 向吸附柱中加入 500 μl 漂洗液 PW,13,000 rpm 离心 30 秒,倒掉废液。将离 心吸附柱 CA1 或 CA2 放回收集管中,13,000 rpm 离心 2 分钟,尽量除去漂洗 液。将吸附柱置于室温或 50℃温箱数分钟,彻底地晾干,以防止残留的漂洗液 影响下一步的实验。
注意:如果漂洗液有残留会影响回收效率和 DNA 质量。
订货电话:010-82629288
6. 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量 65–70℃ 水浴预热的洗脱缓冲液 EB,室温放置 2 分钟。13,000 rpm 离心 1 分钟收集 DNA 溶液。
产品简介:
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统, 从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、 无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100 bp–40 kb大小的片段,回收率大 于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30-50 %)。
注意:胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合 DNA 的能力较弱。
3. 将上一步所得溶液加入一个吸附柱 CA1 或 CA2 中(依所购买的试剂盒种类而定) (吸附柱放入收集管中),13,000 rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中的废液,将吸 附柱重新放入收集管中。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
试剂盒内容:
试剂盒组成
溶胶液 PN 漂洗液 PW 洗脱缓冲液 EB 吸附柱 CA1 (DP208 超薄型)
或 吸附柱 CA2 (DP209 普通型) 收集管(2 ml)
说明书
DP208/209-01 (20 次) 20 ml 15 ml 15 ml
DP208/209-02 (50 次) 50 ml 15 ml 15 ml
DNA 浓度及纯度检测
回收得到的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯 度。
DNA 应在 OD260 处有显著吸收峰,OD260 值为 1 相当于大约 50 μg/ml 双链 DNA、40 μg/ml 单链 DNA。
OD260/OD280 比值应为 1.7–1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离 子水,比值会偏低,因为 pH 值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
有 DNA 的胶溶液中加 10–30 µl 3 M 醋酸钠(pH5.2)将 pH 值调到 5–7 之间。
5. 回收<100bp 及>10kb 的 DNA 片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗
脱的时间。 6. 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率
越低。
技术支持:010-62526072 62521767
相关主题