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吉林大学《有机化学实验》氨基酸纸层析糖旋光度的测定PPT课件
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2.点样
毛细管点样:毛细管与板(纸)垂直, 点样位置、点样距离:不被展开剂浸泡、以显色后点之间易分开为准。 点样量、样品浓度:轻轻点一次即可。 本次实验:点三个样品——两个标准样品,一个混合样品
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3.展开
将薄层板斜放入层析缸中(或将滤纸挂在层析缸中),层析缸中流 动相(展开剂)的量以不浸泡样点为宜。有些层析缸如下图,易进 行先饱和后展开操作,提高重现性和避免边缘现象。
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纸色谱、薄层色谱的一般操作步骤
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滤纸芯儿的制作
将一个1.5cm 长、1cm 宽的滤纸,剪成扇子状,并卷 起来
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在滤纸中央,用铅笔画一个半径0.5cm的圆圈(直径一角硬 币大小)。
在圆圈中心扎一个孔,插入准备好的滤纸芯儿。 插入时,滤纸芯的扇花部分插进滤纸孔一小部分,以盖到培 养皿上方时不碰到液体为准。
充满蒸馏水的试管时,观察零度时视场亮度是否一致。
如不一致,说明有零位误差,应在测量读数中减去或加
上该偏差值。
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②测定旋光读数:转动度盘、检偏镜、在视场中觅得亮度一 致且暗的位置,再从度盘上读数。读数是正(顺时针方向旋 转)的为右旋物质,读数是负(逆时针方向旋转)的为左旋 物质。
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提问与回答
用思想传递正能量
滤纸,用铅笔画出展开剂前沿线。
5.去溶剂:烘干
展开剂前沿线
饱和
展开
画出展开剂前沿
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4.显色
可见光下观察 紫外灯下观察 显色剂显色: 通用:10% 硫酸乙醇溶液;碘蒸气;
大部分有机样品:磷钼酸/乙醇溶液 专用: 碘化铋钾 —生物碱;
三氯化铁 —黄酮; 茚三酮 — 氨基酸
显色操作:将茚三酮喷至滤纸润湿,不易流淌
边缘现象:两边高
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本次纸色谱实验展开步骤:
1.在培养皿中加入适量展开剂
2.把点好样的滤纸放到培养皿上,注意滤纸芯儿不能碰展开剂。盖上培养皿
饱和5~10分钟。
3.把滤纸芯儿压下去,使滤纸芯儿的另一端稍微扇开,并接触展开剂,开始
展开左右时,停止展开,立即取出
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5.计算比移值
Rf 值的意义: 定性分析的指标
评价展开剂选择是否合适、评价分离效果
薄层层析:Rf 纸 层 析:Rf
0.30~0.80, △Rf ≥0.05 0.05~0.85, △Rf ≥0.05
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2、影响旋光度的因素 测定波长、浓度、测定管长度、溶剂、温度
比旋光度
:旋光管长度,dm
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结束语
感谢参与本课程,也感激大家对我们工作的支持与积极 的参与。课程后会发放课程满意度评估表,如果对我们
课程或者工作有什么建议和意见,也请写在上边
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感谢观看
The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film
氨基酸的纸层析 糖旋光度的测定
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整体概述
概述一
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概述二
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概述三
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实验目的:
1.学习纸层析分离技术。 2.学习旋光度测定技术。
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一、氨基酸的纸色谱
纸色谱:(纸上层析)属于分配色谱的一种。主要用于多功 能团或高极性化合物如糖、氨基酸等的分析分离。 滤纸为载体,固定相为滤纸上的水分,流动相(展开剂) 为用水饱和过的有机溶剂。 操作技术:上行法、下行法、环行法
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4、旋光仪的使用和旋光度的测定方法
1)按通电源,预热约5min
2)零点误差校正
选定并清洗测定管:用水洗(留意密封垫和玻璃透光片,
不要宁得太紧,否则读数不准)
装入水:排气泡,旋上螺盖(不易过紧)
放入样品管槽:玻璃泡部位在上部
①调零点视野确定零点误差:数值与误差方向
检查旋光仪零位是否准确,即在旋光仪未放试管或放进