胚胎移植注意事项
胚胎移植是一项操作严谨,要求高的技术。
胚胎移植每个操作环节都十分重要,都直接影响胚胎移植成败。
因此作为手术人员,我们应该有很强的责任意识,正规的操作理念,严格的无菌操作观念。
为了使胚胎移植技术严谨、规范,提高胚胎移植成功率,现将胚胎移植中的注意事项归纳如下:
一、同期发情及超排处理
1、供体超排处理
①供体放栓(撤栓)时间:19﹕00;
②超排处理的时间为早7﹕00,晚19﹕00;
③第一次试情时间为撤栓后第二天早5﹕00,配种时,每间隔6h配1 次。
2、受体同期发情处理
①“ PG”法,注射时间为处理当天下午16﹕00;
②“海绵栓+PG”法,撤栓和PG处理时间为处理当天下午16﹕00;
③受体试情时间为PG处理后的第二天早8﹕00,下午16﹕00,晚20﹕00;④试情时,记录具体的发情时间,认真做好发情记录,按照《受体羊发情记录表》的要求填写。
二、超排的具体要求
1、严格遵守超排时间,按照超排方案的剂量要求注射,做到剂量准确,注射完全;
2、超排所用的注射器,用于PMSG的注射器要求1批换1次,用于FSH的注射器,每天要求换1 次;
3、超排所用的注射器、CIDR栓、药瓶统一收回,统一处理,严禁乱扔,乱放;
4、超排时人员安排,要求每批由专人负责,即注射PMSG1 人,注射FSH 1 人;
5、符《胚胎移植所用药品跟踪单》;
6、符《胚胎移植人员安排表》;
7、符《受体羊发情记录表》。
三、手术前的准备工作
1、羊只手术部位的消毒
①用肥皂温水将手术部位剃干净,擦干;
②清水冲洗干净;
③0.1%新洁尔灭消毒手术部位,擦干;
④5%的碘酊消毒和75%酒精脱碘。
2、手术器械的准备
①手术器械在使用之前在0.1%新洁尔灭溶液中浸泡30min,并打开器械开关;②使用时浸泡在生理盐水中(注意及时更换);
③与PBS液接触的注射器及冲卵管在使用之前,用PBS液清洗1 次。
3、手术人员手臂的消毒
①手臂要严格消毒,先剪短磨光指甲,用肥皂水清洗手臂;
②在0.1%新洁尔灭消毒盆中浸泡5min;③在生理盐水盆中清洗干净;
④注意消毒液和生理盐水的及时更换。
4、手术后手术器械及器械盘的清洗与灭菌①手术后,手术器械需认真、彻底的清洗,以便下次使用;②用清水及洗涤液将手术器械和器械盘上的污垢或斑点清洗干净;
③用流水冲洗5 次;
④用蒸馏水冲洗5 次;
⑤放入恒温干燥箱,将干燥箱的温度调至160℃,处理1.5h 。
四、手术时操作要求
1、手术时,必须戴医用手套;
2、手术要求仔细、规范、准确、迅速、手法轻柔、配合默契,及时喷洒生理盐水,尽可能的缩短冲胚时间、移植时间;
3、手术缝合要仔细、认真、保证缝合质量,促进伤口愈合。
五、黄体鉴别
1、供体采卵时黄体的鉴别
①正常黄体
注:“ ”表示黄体个数,、、、分别表示黄体级别
②异常黄体
A、中间有“红心”周围包裹发白的组织,用n m表示(“n”表示个数);
B、类似于黄体退化后形成的白体,凸起,用n 表示(“n”表示个数)。
2、受体羊卵巢情况及处理办法
注:①大黄体是指颜色鲜红,突出卵巢表面部分直径4mm以上的黄体;
②小黄体是指直径小于4mm的小黄体;
③小卵泡指直径在2mm以下的卵泡;
④大卵泡指直径在2mm以上的卵泡;
⑤“ 1”表示黄体,A、B、C、D、E、F 分别表示黄体级别。
六、检胚室的操作要求
1、Holding 液及冷冻液的灭菌:使用前用0.22um的滤器,过滤时应弃取开始2—3 滴,然后使用。
2、移植针的消毒程序:第一次使用之前用Holding 液清洗,移植针使用过程消毒时,其消毒程序:先用75%酒精棉擦洗,在用0.9%生理盐水棉擦洗,最后在用Holding 液清洗。
3、检胚针的清洗:第一次使用之前用Holding 液清洗清洗,每检一只羊的胚胎时,用Holding 液清洗一次。
4、解冻胚胎时,胚胎细管的消毒,用灭菌布擦干。
5、冷冻胚胎标记:
①胚胎细管:按照品种、耳号、胚胎类型、胚胎个数标记,具体表示方法如下:道塞特
(Dorset ):红色标记,用“ D”表示;萨福克(Suffolk ): 黑色标记,用“ S”表示;杜泊(Dorper ): 蓝色标记,用“ P”表示;德美(Merino ): 绿色标记,用“ M”表示。
②拇指管:按照胚胎类型、冷冻日期装管,编号,具体表示方法:1 号管用“ 1”表示,2 号管用“2”表示,依次类推,胚胎类型的表示方法:在拇指管上分别标注“M”、“B”、“EXB”,最后标注冷冻胚胎的日期;
③提漏:按照胚胎冷冻日期装管,在提漏上标注冷冻日期。
七、定期讨论总结
每完成一次胚胎移植工作,都要及时总结讨论胚胎移植过程中的成功、失败的原因,形成材料,获得经验,指导下步工作,提高技术水平。
符:
胚胎移植所用药品跟踪单。