5. 干热法与湿热法的灭菌效果
同一温度下，湿热比干热灭菌效果好
原 因
湿热中细菌菌体蛋白较易凝固
湿热的穿透力比干热大
湿热的蒸汽有潜热
二、辐射杀菌法

紫外线：波长200-300nm的紫外线能干扰细菌DNA的
复制与转录而杀菌。但紫外线穿透力较
弱，可损伤人体皮肤黏膜，常用于空气及
物品的表面消毒。

电离辐射：包括高速电子、X射线、γ射线等。可 产生游离基，破坏细菌DNA而杀菌。常
二、病原微生物实验室的分级
根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平 （BSL）及国家标准分为四级：
BSL－1实验室 BSL－2实验室
－－ －－
BSL－3实验室
BSL－4实验室
－－
－－
思考题
1、试述常用物理灭菌法的作用机制及适用范围
2、试分析影响化学消毒剂作用效果的因素。
3、依据病原微生物感染的危害程度，如何选择相
括结核分枝杆菌）、真菌、多数病毒
适用于纤维内窥镜、喉镜、麻醉器材等 包括含碘消毒剂、醇类消毒剂等

低效消毒剂
可杀死多数细菌繁殖体，不能杀死芽胞、
结核分枝杆菌、某些抵抗力强的真菌和病毒
适用于皮肤、粘膜、物体表面和地面等
包括季胺盐类消毒剂、氯乙定、高锰酸钾等
四、消毒剂的应用
消毒剂
含氯消毒 剂 过氧乙酸 戊二醛 碘酒 碘伏 乙醇 新洁尔灭 高锰酸钾
细菌
浓度
种类
作用时间
环境
有机物 温度 酸硷度
第三节
病原微生物实验室生物安全
指防范、处理微生物及其毒 素对人体危害的综合性措施 病原微生物实验室生物安全
的核心是防扩散和防感染
一、病原微生物的分类
根据病原微生物的传染性、感染后对个体及群体 的危害性将其分为四类：
I类（29种）－引起严重疾病，我国尚未发现或已消灭 II类（70种）－引起严重疾病，易直接或间接在个体间传播 III类（275种）－ 传播有限，所致感染可预防或治疗 IV类－ 通常对人或动物无致病性

滤菌器
含有微细小孔<0.22微米,只允许液体或气体 通过, 而大于孔径的细菌等颗粒不能通过

生物洁净技术（HEPA）
初、中、高三级高效分子空气过滤器，除去0.55μm的尘埃，并采用合理气流方式以洁净空气 生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无 菌护理室，无菌手术间等
四、超声波杀菌法
频率高于20kHz/s而不被人耳感觉到的声波。

机制：通过其过水时的空化作用在液体中造成压力 改变，应力薄弱区可形成小空腔，空腔逐渐
增大，最终崩破而裂解细菌，对G-菌较敏感。

用途：主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原。
五、低温与干燥
冷冻真空干燥法： 在低温状态下真空抽去水分
用途：保存菌种
第二节
化学消毒灭菌法
一、杀菌机理

使菌体蛋白凝固变性。如酚类、醇类、酸碱类等
烷化剂：甲烷、戊二醛、环氧乙烷等 含碘消毒剂：碘酊、碘伏等 含氯消毒剂：次氯酸钠、漂白粉等
Hale Waihona Puke 三、按杀菌能力分类
高效消毒剂
可杀死包括芽胞在内的所有微生物
适用于不耐热力，但要进入体内的物品
包括含氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛
类消毒剂、环氧乙烷等

中效消毒剂
不能杀死包括芽胞，可杀死繁殖体（包
防止或抑制体外细菌生长繁殖
第一节
物理消毒灭菌法

热力灭菌法 辐射灭菌法 滤过除菌法
一、热力灭菌法
1. 杀菌机理
高温使菌体蛋白凝固变性
2. 分类
有干热灭菌法和湿热灭菌法
3.干热灭菌法

焚烧：直接点燃物品或将其置于焚烧炉内，是最彻
底的灭菌方法，用于废弃物品或动物尸体

烧灼：直接用火焰灭菌方法，适用于接种环或试管 的口灭菌

改变细胞膜的通透性，使胞内含物逸出。如表面活
性剂、脂溶剂等

干扰细菌的酶系统及代谢。如重金属类、某些氧化
剂等
二、常用消毒剂种类

醇类：乙醇、异丙醇等，75%的乙醇最常用。 酚类：石碳酸、来苏、氯已定等


重金属类：红汞、硫柳汞、硝酸银等
氧化剂：过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾等
表面活性剂：苯扎溴安、度米芬等
灭菌温度取决于蒸汽压力。
利用高压蒸锅，在103.4kPa蒸汽
下，温度达121.3℃维持15-20分，
可杀死包括芽胞在内的所有微生物。
用于耐高温、耐潮湿物品的消毒。

流通蒸汽消毒法： 利用100 ℃水蒸汽消毒，经15-30
分钟可杀死细菌繁殖体，不能将
芽孢全杀死

间歇蒸汽灭菌法： 反复多次流通蒸汽间歇加热以达 到灭菌目的
用于一次性医用塑料制品或食品的消毒。

微波：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应具 有一定的穿透性，但不能穿透金属表面。常 用于食品、药品、非金属器械及其他物品的
消毒。
三、滤过除菌法
利用滤菌器的机械性阻挡，除去液体或空气中 的细菌。 主要用于血清、毒素、抗生素、酶制剂等不耐 热的液体及空气等的除菌。
细菌为单细胞生物，其生长极易受外界环境 因素的影响。采用物理、化学或生物学方法可抑 制或杀死环境中的病原微生物。
消毒
disinfection
杀死物体上病原微生物的方法,并不一定
能杀死芽胞或非病原微生物
杀死物体上的所有微生物
灭菌
sterilization
无菌
asepsis
不含活菌
无菌操作
防腐
antisepsis

干烤：利用干烤箱，加热160-180℃ 2小时，用于
高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
4. 湿热灭菌法

巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的特定 微生物。用于牛奶、啤酒等消毒

煮沸消毒法：100℃水煮5分钟(繁殖体)-2小时(芽胞) 用于餐具和小手术刀剪的消毒

高压蒸汽灭菌法
医学上最常用最有效的灭菌方法。
常用浓度
有效氯量25mg/L 0.2%-0.5% 2% 2.5% 2% 75% 0.4%-1.6% 0.1% 饮水
适用范围
皮肤、物体表面、空气 医疗器械 皮肤、黏膜、物体表面 皮肤、黏膜、物体表面 医疗器械、皮肤 皮肤、黏膜、物体表面 皮肤、黏膜、食具、蔬菜等
五、影响消毒剂作用的因素
种类
数量
消毒剂
应的操作实验室？
预习：
噬 菌 体