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总黄酮测定

槐米中总黄酮的含量测定
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仪器与试光光度仪,水浴锅,索氏提取器 槐米,芦丁对照品 甲醇,亚硝酸钠溶液,硝酸铝溶液,氢 氧化钠试液,乙醚,试剂均为分析纯
2.溶液的制备
(1)对照品溶液的制备
取芦丁对照品50mg,精密称定,置25ml量瓶中,加 甲醇适量,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度, 摇匀。精密量取 10ml ,置100ml 量瓶中,加水至刻度, 摇匀,即得(每1ml中含芦丁0.2mg)
(3)测定法
取本品粗粉约1g,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚 适量,加热回流至提取液无色,放冷,弃去乙醚液。再加甲 醇90ml,加热回流至提取液无色,移置100ml量瓶中,用甲 醇少量洗涤容器,洗液并入同一量瓶中,加甲醇至刻度,摇 匀。精密量取10ml,置100ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀 。精密量取 3ml ,置 25ml 量瓶中,加 5% 亚硝酸钠溶液 1ml ,混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6 分钟,加氢氧化钠试液 10ml ,再加水至刻度,摇匀,放置 15分钟,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中 芦丁的重量(μ g),计算,即得。
(2)标准曲线的制备
精密量取对照品溶液 1ml 、 2ml 、 3ml 、 4ml 、 5ml与6ml,分别置25ml量瓶中,各加水至6.0ml, 加 5% 亚硝酸钠溶液 1ml ,混匀,放置 6 分钟,加 10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化 钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟, 以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法,在 500nm波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓 度为横坐标,绘制标准曲线。
采用紫外分光光度法测定槐米总黄酮的含量 , 比通过显色反应测定总黄酮含量简便 , 提高了实 验的效率。本法简便、 快速、 选择性好、 线性 范围宽、 重现性好、 能全面反映样品中槐米总 黄酮的含量, 适用于槐米的质量检测和总黄酮测 定, 尤其是生产过程的质量控制。
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