NBF考研辅导班与生技论坛联合免费辅导生物化学计划第一讲习题[常考习题] 以题巧记1人体八种必须氨基酸:.“一两色素本来淡些”（异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、缬氨酸）。
2．下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？A．Leu B．Ala C．Gly D．Ser E．Val解析：Gly不具有旋光性所以选C3.有一个蛋白分子在pH7的水溶液中可以折叠成球状，通常是带极性侧链的氨基酸位于分子外部，带非极性侧链的氨基酸位于分子内部。
请解析：（1）在Val、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile、His中，哪些位于内部？哪些位于分子外部？（2）为什么在球状蛋白内部和外部都发现Gly和Ala？（3）Ser、Thr、Asn、Gln都是极性氨基酸，为什么会在内部发现？（4）在球状蛋白的分子内部和外部都能找到Cys，为什么？解析：（1）带有非极性侧链的氨基酸残基：Val、Pro、Phe、Ile位于分子内部；带有极性侧链的氨基酸残基：Asp、Lys、His位于分子外部。
（2）因Gly和Ala的侧链都比较小，疏水性和极性都小；Gly只有一个H与а-碳原子相连，Ala只有CH3与а-碳原子相连，故它们即可出现在分子内部，也可出现在分子外部。
（3）Ser、Thr、Asn、Gln都是极性氨基酸，但它们在pH7.0时含有不带电荷的极性侧链，参与分子内部的氢键形成，从而减少了它们的极性。
（4）在球状蛋白内部可见Cys，因其常常参与链内和链间的二硫键的形成，使其极性减少。
4.、天然蛋白质中不存在的氨基酸是：（C）A、半胱氨酸B、脯氨酸C、瓜氨酸D、丝氨酸5.下列氨基酸哪个含有吲哚环（ C）A MetB PheC TrpD Val6.含有咪唑环的氨基酸是（C）A TrpB TyrC HisD Phe7 下列氨基酸中，哪一个含氮量最高（A ）A ArgB HisC GlnD Lys8.在蛋白质成分中，在280nm处有最大光吸收的成分是（D）A Tyr 酚环B Phe 苯环C His 咪唑环D Trp 吲哚环重点解析在280nm吸光值升高的有Trp，Tyr ，Phe 配合知识点记忆9.蛋白质的内源荧光主要来源于酪氨酸和色氨酸10.Tyr苯环上的-OH大约解离为0.01%,其PI值按R为极性非游离氨基酸计算，实验测得Tyr 的PK1=2.20，PK2=9.11，PKR=10.07，Tyr的PI应为（D）A 6.135B 5.035C 9.59D 5.6611.下面哪种多肽在280nm具有更大的吸收?A:Gln-Leu-Glu-Phe-Thr-Leu-Asp-Gly-TyrB:Ser-Val-Trp-Asp-Phe-Gly-Tyr-Trp-Ala解答：在280nm的吸收与Trp和Tyr有关，因为这两种氨基酸在280nm处具最大吸收，而Phe的最大吸收再260nm。
由于多肽B含有2个Trp残基和1个Tyr残基，而多肽A只含有一个分子Tyr。
因此多肽B在280nm处具有更大的吸收【常考考点】以题巧忆例题：1.计算天冬氨酸（pK1=2.09, Pk2=3.86, pK3=9.8）及赖氨酸, （pK1=2.09, Pk2=3.86,pK3=9.8）的PI值。
（南京工业大学2002年）2.下列那哪个氨基酸含有羟基（）（浙江工业大学2004）A丙氨酸 B亮氨酸 C异亮氨酸 D丝氨酸3.如何用茚三酮反应定量测定氨基酸含量？答案：茚三酮在弱酸性溶液中与α-氨基酸共热，反应生成紫色物质。
用纸层析或柱层析把各种氨基酸分开后，利用茚三酮显色并用分光光度法在570nm定量测定各种氨基酸含量。
定量释放的CO2可以用测压法测量，从而计算出参加反应的氨基酸量4. 异亮氨酸有几种光学异构体？答案：异亮氨酸（及苏氨酸、羟赖氨酸和羟脯氨酸）除了α-碳原子是一个不对称碳原子外，还有第二个不对称碳原子，因此有四种光学异构体，分别为L-异亮氨酸，D-异亮氨酸，L-别异亮氨酸，D-别异亮氨酸第二讲【常考考点】以题巧忆1已知血红蛋白含铁0.34%，血红蛋白的最小相对分子量是多少？实验表明，血红蛋白的相对分子量为64500，实际上一个血红蛋白含几个铁原子？解析：血红蛋白的最小相对分子量=56（铁的原子量）÷0.34% ≈16400一个血红蛋白含铁原子=64500÷16400≈42氨基酸的定量分析表明牛血清蛋白含有0.58%的色氨酸（色氨酸的相对分子量为204）。
（1）试计算牛血清蛋白的最小分子量（假设第每个蛋白质分子只含有一个色氨酸）（2）凝胶过滤测得的牛血清蛋白相对分子量为70000，该血清蛋白分子中含几个色氨酸分子？解析：（1）牛血清蛋白的最小分子量=204÷0.58%≈35200（2）该血清蛋白分子中含色氨酸分子数=70000÷35200≈23. 肌红蛋白含铁0.335%，其最低分子量可依下式计算：最低分子量＝铁的原子量÷铁的百分含量×100计算结果为16700，与其他方法测定结果极为接近，可见肌红蛋白中只含一个铁原子。
真实分子量是最低原子量的n倍，n是蛋白质中铁原子的数目，肌红蛋白n＝1。
血红蛋白铁含量也是0.335%，最低分子量也是16700，因为含4个铁原子，所以n＝4，因此其真实分子量为66800。
有时蛋白质分子中某种氨基酸含量很少，也可用这种方法计算最低分子量。
如牛血清白蛋白含色氨酸0.58%，最低分子量为35200，用其他方法测得分子量为69000，所以其分子中含两个色氨酸。
最低分子量只有与其他方法配合才能确定真实分子量4.测得一种蛋白质分子中Trp残基占总量的0.29%，计算该蛋白质的最低相对分子质量？解答 Trp残基/蛋白质 Mr=0.29%蛋白质Mr=Trp/0.29%=(204-18)/0.29%=641385.一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸，计算该蛋白质的最低相对分子量？解答：亮氨酸和异亮氨酸的相对分子量都是131，根据两种氨基酸的含量来看，异亮氨酸：亮氨酸=2.18%：1.65%=1.5:1=3:2.所以在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个，异亮氨酸至少有3个，那么1.65%+2*（131-18）/蛋白质Mr 蛋白质Mr=226/1.65%=13697答此蛋白质最低相对分子质量是13697.【常考考点】以题巧记1、Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基序列的方法。
N末端氨基酸残基被苯异硫氰酸酯修饰，然后从多肽链上切下修饰的残基，再以层析鉴定，余下的多肽链（少了一个残基）被回收再进行下一轮降解循环。
一个含13个氨基酸残基的多肽链，经Edman 降解确定该肽链的氨基酸组成为：Ala、Arg、2Asp、2Glu、3Gly、Leu、3Val。
部分水解后得到以下肽段：（1）Asp-Glu-Val-Gly-Gly-Glu-Ala（2）Val-Asp-Val-Asp-Glu（3）Val-Asp-Val（4）Glu-Ala-Leu-Gly-Arg（5）Val-Gly-Gly-Glu-Ala-Leu（6）Leu-Gly-Arg问：推测原始肽链的序列解析：思路是分析这六个片段中重叠部分，结合该肽链的氨基酸组成，可分析出该肽链的原始序列为：Val-Asp-Val-Asp-Glu-Val-Gly-Gly-Glu-Ala-Leu-Gly-Arg2、有一多肽，其分子式是C55H70O19N10，将其彻底水解后只得到下图中的四种氨基酸。
根据上面的条件回答问题：问：（1）该多肽是几肽？（2）该多肽水解后，有几个谷氨酸？（3）该多肽水解后，有几个苯丙氨酸？几个丙氨酸？几个甘氨酸？解析：（1）该多肽水解后产生氨基酸中，都含1个N原子。
除谷氨酸外，又各含2个氧原子，只有谷氨酸有4个氧原子。
它们的碳氢原子比最大的是苯丙氨酸，为9：11。
又根据题中分子式可知该多肽分子共有10个N原子，因此该多肽为10肽。
（2）形成10肽时会脱去9个水分子，因此这个10肽彻底水解所得到的10个氨基酸的总和应是C55H70O19N10+9H2O，即C55H88O28N10，氧数折半后去氮数（28-10×2）/2=4（因为多了几个双氧，就有几个谷氨酸分子），即谷氨酸的个数4。
（3）将分子式总和减去这4个谷氨酸，C55H88O28N10－4 C5H9O4N=C35H52O12N6，可见还有6个氨基酸，而且碳氢比很高，推测这是由于苯丙氨酸的存在所引起的。
最多可能有几个苯丙氨酸（C9H11O2N）呢？，将35÷9等于3余8。
可见有3个苯丙氨酸，此外还有2个丙氨酸，1个甘氨酸。
3 用什么试剂可以将胰岛素链间二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内二硫键，则在反应体系中还必须添加什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的-SH基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？答案：（1）.巯基化合物可以打开并还原二硫键，包括巯基乙醇、巯基乙酸和二硫苏糖醇（DTT）等，可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带有巯基的半胱氨酸。
（2）变性剂，用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍，它们能与多肽竞争氢键，破坏蛋白质二级结构。
（3）加卤化烷如碘乙酸、碘乙酰胺等与巯基作用把它保护起来，防止其重新氧化4要测定蛋白质的二硫键位置，用什么方法？答案：对角线电泳法：1.用胃蛋白酶将靶蛋白切成含有二硫键的较短的肽段。
2.将水解后的混合肽段点到滤纸的中央进行第一向电泳，肽段将按其大小及电荷的不同而分开。
3.将滤纸暴露在过甲酸蒸气中使二硫键断裂，结果每个含二硫键的肽段被氧化成一对含磺基丙氨酸的肽。
4.滤纸旋转90°角进行第二向电泳，含磺基丙氨酸的成对肽段比原来含二硫键的肽小而负电荷增加，结果偏离对角线。
5.肽斑可用茚三酮显色确定，在对角线上的肽段均不含二硫键，而偏离对角线的肽段就是形成二硫键的肽段，测定有关肽段的氨基酸组成，即能确定蛋白质肽链中二硫键配对的情况。
目前利用质谱技术也可以测定二硫键5分离蛋白质混合物的方法主要是根据蛋白质在溶液中的哪些性质？如果蛋白质溶液中混有大量无机盐，如何简单地进行纯化？答案：1.分子大小、溶解度、电荷、吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。
2.透析法：把待纯化的蛋白质溶液装在半透膜的透析袋里，放入透析液中进行透析，直到透析袋内无机盐等小分子物质降到最小值为止；或用超滤法6下列信息求八肽的序列。
（1）酸水解得 Ala，Arg，Leu，Met，Phe，Thr，2Val。
（2）Sanger试剂处理得DNP-Ala。
（3）胰蛋白酶处理得Ala，Arg，Thr 和 Leu，Met，Phe，2Val。
当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。